家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的构象分析

用红外光谱、圆二色谱和荧光光谱研究家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的结构特征及其在不同条件下的构象变化. 红外光谱检测结果显示抗菌肽MDL-1结构中含有螺旋、无规卷曲、折叠构象的吸收特征; 圆二色谱显示抗菌肽MDL-1结构相对比较稳定, 抗菌肽在不同浓度溶液中的构象发生改变; 荧光光谱法研究发现家蝇幼虫抗菌肽MDL-1在280 nm波长的激发光下, 荧光光谱为Tyr残基和Trp残基共同提供, 而且Trp残基不是位于抗菌肽分子的表面, 而是位于分子的内部, 该研究结果为进一步探讨抗菌肽的抗菌机理奠定了基础.     

基于分子信标荧光纳米探针的李斯特菌DNA均相检测方法

基于分子信标(MB)识别和荧光纳米粒子探针技术,建立了均相体系中李斯特菌目标DNA的高灵敏检测新方法.首先以羊抗人免疫球蛋白(IgG)标记的异硫氰酸荧光素(FITC)为核材料,成功制备了FITC-IgG@SiO2核壳荧光纳米粒子,有效防止了传统方法中采用单一FITC制备纳米颗粒时泄露严重的问题.随后以FITC-IgG@SiO2荧光纳米粒子和纳米金分别标记单核细胞增生李斯特菌序列特异性分子信标探针5'端和3'端,成功构建了单核细胞增生李斯特菌序列特异性分子信标荧光纳米探针.在实验优化条件下,α(令α=F/F0,F代表MB和目标DNA杂交以后的荧光强度,F0代表MB完全闭合时的荧光强度)与目标DNA浓度在1～200pmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,检出下限为0.3pmol/L,相对标准偏差为2.6%(50pmol/L,n=11).将该方法应用于食品样品中单核细胞增生李斯特菌的检测,结果与国标法一致.     

家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的荧光特性分析

本文研究了家蝇幼虫抗菌肽MDL-1的荧光光谱和淬灭剂对内源性荧光的影响。家蝇幼虫抗菌肽MDL-1在激发波长280 nm时,其荧光光谱为酪氨酸（Tyr）残基和色氨酸（Trp）残基共同提供。结果表明,KI不能淬灭抗菌肽MDL-1的Trp残基的荧光,而丙烯酰胺（Acr）能淬灭几乎所有的Trp残基的荧光（f-0．92）;这说明,Trp残基不是位于抗菌肽分子的表面,而是位于分子的内部。     

荧光光谱分析家蝇幼虫抗菌肽与大肠杆菌染色体DNA作用机理

利用荧光光谱方法研究了家蝇幼虫抗菌肽MDL-1与大肠杆菌染色体DNA的相互作用,并以溴化乙锭为荧光探针,考察了抗菌肽MDL-1结合大肠杆菌DNA的作用方式,探讨其作用模式,即：抗菌肽MDL-1与大肠杆菌DNA骨架的磷酸基团通过静电引力结合,使抗菌肽MDL-1和DNA的空间结构都发生变化,抗菌肽MDL-1进一步与DNA双螺旋的沟槽结合,然后抗菌肽MDL-1以嵌入或部分嵌入方式与DNA相互作用,计算出抗菌肽MDL-1与DNA的结合常数和成键位点数。本试验从分子水平上研究抗菌肽与细菌DNA的作用模式和结构特征,对深入了解抗菌肽的作用机理极为重要。