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相似文献
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1.
将从小鼠颌下腺中分离纯化神经生长因子(NGF)的方法运用于胎盘,通过中性搅拌抽提,两次CM-52阳离子交换层析柱和一次SephadexG-75凝胶过滤得到一纯度和比活都比较高的、可促进神经节生长的碱性蛋白质,通过免疫学(Western-bloting)和生物学性质(可以促进鸡胚背根神经节长出神经纤维)的鉴定,确定此物是人的一种低分子量的神经生长因子(hNGF)。  相似文献   

2.
本文对自行纯化的人胎盘催乳素(hPL)分别进行了高效液相分析、紫外扫描、SDS-PAGE测定分子量以及等电聚焦电泳等分析手段证明了我们提纯的hPL已经达到了高纯度,在分析时,发现其等电点和以往文献报道不一致,我们认为这对深入了解探讨hPL的结构和功能有一定的参考价值。  相似文献   

3.
目的:从人足月胎盘中分离、培养间充质干细胞(MSCs),并研究其生物学特征.方法:将人足月胎盘组织经胶原酶Ⅱ消化和贴壁培养法获取间充质干细胞,运用活细胞计数和碘化丙啶(PI)检测其增殖能力;采用流式细胞术检测其细胞表面标志的表达;用地塞米松、抗坏血酸及β-磷酸甘油诱导其向成骨细胞分化,并用Yon Kos-sa染色进行鉴定;用地塞米松与胰岛素诱导其向脂肪细胞分化,并以油红O染色进行鉴定.结果:从人足月胎盘分离的间充质干细胞为梭形贴壁细胞,增殖能力较强;强表达CD44、CD29,不表达CD34、CD45、CD106和HLA-DR;经诱导后向脂肪细胞及成骨细胞分化,油红O染色、Von Kossa染色为阳性.结论:人足月胎盘中也富含间充质干细胞,与其他来源的间充质干细胞的生物学特征相似,可能是组织工程新的干细胞来源.  相似文献   

4.
功能性食品配料--丝素的性质和应用   总被引:4,自引:0,他引:4       下载免费PDF全文
采用电泳法对可溶性丝素粉末的性质进行研究 .十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)图谱表明 ,透析法制备的丝素粉末分子量主要分布在 30kD左右 ,超滤法制备的为 4 0kD左右 ;聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 (IEF)结果表明 ,丝素的等电点分布广泛 ,等电区在pH 6 .1- 6 .6 ,4 .8- 5 .3以及pH 3左右 .在蛋糕配料中添加 0 .5 % - 1% (W /V)的丝素 ,改善了蛋糕的品质 .  相似文献   

5.
野生榛蘑多糖采用水提法得到多糖粗品,经Sevage法除蛋白,H2O2法脱色素和透析法去除小分子后,采用DEAE-纤维素柱层析纯化,分离得三种多糖成分Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ.纯化得的榛蘑多糖经葡聚糖凝胶层析法测得相对分子量分别为132429,93917,74687 Da.  相似文献   

6.
将构建成功的丝瓜ACC合成酶cDNA的重组质粒, 转化为大肠杆菌BL21(DE3), 经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后得到特异性高效表达, 表达蛋白以包涵体形式存在. 包涵体经洗涤和Zn2+螯合柱层析, 得到纯化蛋白. SDS-PAGE显示纯化蛋白分子量为55 000的单一蛋白带. 经活性分析, 该酶最适pH值为8.5, 米氏常数(Km)为44.2 μmol/L.  相似文献   

7.
啤酒废酵母(108-109细胞/ml)通气发酵后,经乙醇-氯仿沉淀,加热,调PH,(NH4)2SO4沉淀等除去杂蛋白质。最后经SephadexG-75层析得到纯化的CuZn-SOD,酶比活在1500单位/mg蛋白以上,酶的分子量为148000,由四个亚基组成,紫外最大吸收峰位于256um处。A256.4/280=1.22.  相似文献   

8.
经大肠杆菌E.coli K12D31诱导后的家蚕幼虫,其免疫血淋巴经CM-Sepharose CL-6B离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析及HPLC分离后,得到2种抗菌蛋白,经液相色谱-电喷雾质谱(ESI-MS)分析鉴定,纯化的2种抗菌蛋白分别是家蚕抗菌肽eeeropin D和溶菌酶lysozyme酸性电泳(A-PAGE)测活免疫血淋巴得到抗菌蛋白活性谱:cecropin D在8h无显著表达,12h有较强抗菌活性,30h达到最高,以后逐渐降低;lysozyme在8h后检测到表达,12h到达高峰,之后逐渐下降,48h的血淋巴中未检测到明显的表达.研究认为抗菌蛋白lysozyme和cecropin D是家蚕幼虫感染细菌8h后大量表达的抗菌蛋白,主要参与细菌感染12~30h的血淋巴对细菌的清除,是参与家蚕幼虫抗菌免疫的重要蛋白.  相似文献   

9.
竹荪子实体经热水提取,乙醇沉淀,蛋白酶法和Sevag法相结合去蛋白,再通过DEAE-SephadexA-25和SephadexG-200柱层析纯化,得到竹荪多糖(简称Dd)纯品。经凝胶过滤法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定表明,Dd多糖为均一的物质。Dd经紫外扫描,无核酸和蛋白质的特征吸收峰,IR-400扫描表明有典型多糖吸收峰,Dd的相对分子质量约为196000。  相似文献   

10.
南欧紫荆萌发种子的提取液,经硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素柱层析,Bio-GelP-60和SephadexG-100柱层析,得到了酶活为98.6μ/mg的甘露聚糖酶。柱层析和聚丙烯酰胺凝胶电泳均表明其为均一性物质。南欧紫荆甘露聚糖酶由两个分子量为2万的相同亚基组成,可将以甘露聚糖为主链的多种半纤维素水解为含4~6个单糖残基的寡糖片断。它的最适pH为5,最适温度为37℃。Zn ̄2+对该酶活性有强烈的激活作用,Cu ̄2+和Mn ̄2+则为这种甘露聚糖酶的竞争性抑制剂。动力学性质研究表明酶的活性明显地依赖于底物浓度,且只有一个活性中心。南欧紫荆甘露聚糖酶的作用方式为专一性地内切水解以β-(1→4)键连接的甘露聚糖。  相似文献   

11.
为研究钙钛矿锰氧化物中电-声子耦合作用,采用共沉淀法制备La1-xCaxMnO3(0.25≤x≤0.45)块材.利用Keithley 220可编程电阻测量系统、超声衰减测量系统、超导量子干涉仪等,系统研究了体系的电输运行为和超声衰减性质.结果表明:体系的铁磁相变温度、金属-绝缘转变温度以及出现超声衰减行为异常的温度相近,室温下声速相对变化值大于1%.这是Zener双交换作用机制和电-声子耦合共同作用的结果.  相似文献   

12.
从新生牛肝脏分离纯化到一种具有刺激肝源性SMMC—7721人肝癌细胞和原代培养的人胎肝细胞DNA合成的单一组分,命名为小牛肝细胞生长因子(calfhepatocytegrowthfactor,cHGF),测得分子量为39.8kd,蒽酮法测得糖含量极少,部分纯化的cHGF在与胰岛素和表皮生长因子混合使用时活性有一定增加,对CCl4处理的肝坏死大鼠有明显的促肝再生功能。  相似文献   

13.
根据人纤溶酶原的cDNA序列,利用PCR技术获得人纤溶酶原kringle5结构域的基因,并将其克隆至表达质粒pET25b( )中。重组载体pET25b( )/kringle5转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,在12kD处可见明显的表达条带,表达产物大部分以无活性的包涵体形式存在。包涵体经过体外变复性,SP-SepharoseFF离子交换柱一步纯化,15%SDS-PAGE鉴定考染一条带,纯度达95%以上。所得到的目标蛋白明显的抑制bFGF诱导的牛毛细血管内皮细胞增生。  相似文献   

14.
抗铬(Ⅵ)细菌的分离、鉴定及其铬(Ⅵ)还原能力   总被引:3,自引:0,他引:3  
从湖北省某重金属矿区的土样中分离出一株能在15 mmol/L的Cr(Ⅵ)培养基上生长的菌株 (MDS08). 经对该菌株进行形态观察和16S rDNA同源性比较,该菌株被初步鉴定为Bacillus luciferensis.通过测定MDS08对7种重金属的最低抑制浓度,可知其对多种重金属都具有较高的抗性.将MDS08接种到含0.2 mmol/L的铬(Ⅵ)的LB液体培养基中,24 h对铬(Ⅵ)的还原率达到99 %. 研究表明: MDS08可以用于重金属污染区六价铬的微生物修复.  相似文献   

15.
为解决重组人瘦素蛋白(hLeptin)大规模生产过程中包涵体的形成以及体外重折叠过程中蛋白聚集导致的低产量,探究在大肠杆菌中hLeptin高水平可溶性的表达,并进行生物学活性检测.利用hLeptin成熟肽基因与pET-30a(+)-SUMO系统构建融合表达质粒pET-30a(+)-SUMO-Lep,转化至大肠杆菌BL21(DE3),加入异丙基-β-D-硫代半乳糖(IPTG)进行诱导表达,之后经Ni金属亲和层析纯化,并切去SUMO融合标签后获得成熟hLeptin.重组hLeptin表达量高,主要以可溶形式存在.通过KM小鼠减肥实验和CCK8实验证明重组hLeptin具有生物学活性.综上,使用SUMO融合标签,以增强hLeptin在大肠杆菌中的高效可溶性高纯度的表达,为大规模生产hLeptin提供了一种新方法,同时为表达可溶性重组蛋白研究提供了一定的基础.  相似文献   

16.
从芥菜干中投取水溶性多糖,经分离纯化后得棕色固体,再经双氧水缓慢氧化脱色得白色固体,经市效液相色语分析鉴定,本品含有葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等六种组分.  相似文献   

17.
人组织型纤溶酶原激活剂(t—PA)。DNA重组在表达质粒pDR720中,在E.coliC600中获得了表达,表达水平为2%.以醋酸钟显色PAGE凝胶回收t—PA表达条带,进行复性处理.R性产物经Benzamidine—Sepharose4B,Lysine—Sepharose4B亲和层析,纯化得到SDS—PAGE银染一条带纯度,比活为为4,000mol/s·g的人t—PA.  相似文献   

18.
人胎肝MSCs的分离、鉴定及其向脂肪和成骨细胞的分化   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的:分离纯化人胎肝中的间充质样干细胞(mesenchymal-like stem cells,MSCs),观察化学因子诱导其定向分化的作用,并初步鉴定其生物学特性.方法:利用二步离心法、羟乙基淀粉沉淀法及细胞差速贴壁生长特性分离纯化人胎肝MSCs;流式细胞仪检测其细胞周期和表面标志;添加常规诱导液诱导其向脂肪、成骨细胞分化并加以鉴定.结果:从人胎肝中成功分离纯化得到MSCs,P3代细胞有91.2%的细胞处于GO/G1期;表达CD29、CD44、CD105和CD166,不表达造血细胞标志CD15、CD34、CD45,不表达与GVHD相关的HLA-DR、CD80、CD86、CD40、CD40L.在经典诱导条件下,人胎肝MSCs可向脂肪及成骨细胞分化.结论:人胎肝中含有较丰富的MSCs,人胎肝MSCs具有多向分化潜能,且免疫原性弱,是组织工程和细胞治疗较为理想的种子细胞.  相似文献   

19.
用不同规格的壳聚糖与海藻酸钠和羧甲基维素钠制备了各种微囊.研究了壳聚糖的脱乙酰度、分子量及溶液浓度对微囊形成和特性的影响.确定了微囊制备的最佳参数,并发现壳聚糖的分子量在一定范围内对微囊通透性无影响而脱乙酰度显著地影响微囊通透性.降低壳聚糖的脱乙酰度可明显增加微囊的通透性,而不影响微囊机械强度.这种微囊制备方法简便、通透性可调,在多种生物活性物质的固定化及药物缓释方面具有重要应用前景  相似文献   

20.
采用溶剂热合成方法,得到了2种未见报道的配合物[Cd2(bpp)2(DNBA)4](1)和[Zn(bpp)(DNBA)2](2)[bpp=1,3-二(4-吡啶基)丙烷,DNBA=3,5-二硝基苯甲酸],通过元素分析、TG、IR、单晶X-射线衍射对化合物的结构进行了表征.结果表明化合物1为双核镉配合物,相邻的双核单元通过π-π堆积作用拓展为1D超分子.化合物2为1D螺旋链状配位聚合物.此外,固态标题化合物在室温下表现出蓝色的荧光性质.  相似文献   

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