异鼠李素的心血管药理作用研究进展

异鼠李素(Isorhamnetin, Iso)是一种已知黄酮类化合物,普遍发现于银杏、沙棘等多种植物的花、叶和果子中。有研究发现,Iso在保护血管内皮细胞、抑制脂肪分化、耐缺氧、抗肿瘤、抗炎及抗病毒等方面具有较好的作用。近年来,由于各种因素的作用,动脉粥样硬化及其相关心血管疾病的发病率和死亡率逐渐增加,使人们在心理和生理上都受到很大影响。而其发生机制除与遗传因素有关外,与不良生活习惯导致的内皮细胞氧化损伤、血管慢性炎症反应、脂质堆积等也有密切联系。本文综述了Iso的心血管药理作用,以期为更进一步的研究和开发Iso提供依据,并更好地将其应用于临床心血管疾病的防治。     

异鼠李素抑制人食道癌细胞生长及Id-1蛋白表达

采用细胞生长、克隆形成、3H-TdR 掺入实验和流式细胞术等方法研究40 ×10-6 g/mL〖JP〗异鼠李素对Eca-109细胞生长的作用,同时利用荧光显微镜观察和免疫印迹技术研究异鼠李素对 Id-1蛋白表达量的影响.经异鼠李素作用,Eca-109细胞生长明显被抑制,集落形成率和3H-TdR掺入率明显低于对照组,流式细胞仪检测显示异鼠李素处理细胞被阻止在G0/G1期.荧光显微镜观察和免疫印迹检测显示异鼠李素处理组细胞Id-1蛋白表达量降低.以上数据表明异鼠李素可能通过调低Id-1基因表达,抑制Eca-109细胞增殖.     

异鼠李素的抗炎作用研究进展

异鼠李素(Isorhamnetin, ISO)作为槲皮素的直接衍生物,多存在于沙棘中,具有良好的抗炎、抗氧化、抗过敏等作用。机体一旦遭受各种损伤刺激后,易诱发炎症的发生,在此过程中,多种炎症细胞、促炎因子、趋化因子及相关机制介导了炎症的进展。炎症反应,已贯穿大部分疾病的发生过程,有效寻找或研发出新的抗炎药物将为病人或临床工作的开展带去更多的福音。在此,文章主要对近几年来ISO在中枢神经系统、呼吸系统、循环系统、消化系统及其它五大方面的抗炎作用进行了一个综述,以期为临床工作提供更多的依据。     

异鼠李素对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

本研究在体外建立心肌细胞缺血再灌注模型.利用透射电镜、MTT,流式细胞技术,及乳酸脱氢酶活性检测细胞活性和Western Blot分析等方法探讨异鼠李素对心室肌细胞缺血再灌注损伤的作用.发现缺血再灌注心室肌细胞出现明显的细胞凋亡现象,电镜观察细胞超微结构发生明显改变,MTT,流式细胞技术,及乳酸脱氢酶活性结果显示I/R+/isor+组心肌细胞活性与I/R+/isor相比明显增强,细胞凋亡程度减弱;Western Blot也表明与I/R+/isor组相比,I/R+/isor+组心室肌细胞中Bcl-2蛋白表达明显上调,Bax及p53蛋白表达明显下降, Bcl-2/Bax比率显著减小.从实验结果显示异鼠李素对心肌缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其作用与药物浓度有关,低浓度的异鼠李素对心肌具有保护作用,且药物浓度越大,保护作用越强;而高浓度的异鼠李素则随药物浓度的增加对心肌的保护作用逐渐减弱,甚至出现一定的细胞毒性.     

异鼠李素在不同缺氧状况下抗缺氧作用的实验研究

目的:观察异鼠李素在不同缺氧状况下对小鼠缺氧性损伤的保护作用.方法:采用不同方法建立常压缺氧、特异性心肌缺氧及亚硝酸钠中毒性缺氧实验动物模型.研究异鼠李素在不同缺氧状况下,对小鼠存活时间的影响.结果:异鼠李素能使常压缺氧,特异性心肌缺氧及亚硝酸钠中毒性缺氧小鼠生存时间明显延长.结论:异鼠李素能提高实验小鼠在不同缺氧状态下的抗缺氧能力,表明异鼠李素具有一定的耐缺氧活性.     

反义HSP90诱导HeLa细胞凋亡的研究

目的 探讨反义ＨＳＰ９０降低ＨｅＬａ细胞恶性度的机制。方法 经荧光染色观察细胞形态,ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ及流式细胞仪检测凋亡细胞。结果 转染有反义ＨＳＰ９０的ＨｅＬａ细胞经荧光染色细胞呈不均一亮蓝色,荧光染色观察可见细胞变小,染色质浓缩并产生凋亡小体,ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ可见明显的梯形条带,流式细胞仪检测有凋亡的细胞。结论 反义ＨＳＰ９０可诱导细胞凋亡。     

食道癌细胞在异鼠李素处理中应激作用的研究

在前期研究的基础上,探究异鼠李素抑制食道癌细胞增殖作用过程中出现的细胞应激反应的分子机制.将食道癌Eca-109细胞经异鼠李素处理后,在前72h细胞出现持续增殖.前期细胞核内NF-κB/p65和NF-κB/p50的表达上升而后期逐渐降低;bcl-2、COX-2、mcl-1基因的表达在前期上调,后期下调;IκBα和bax的表达先下降而后上升;加入MG-132后NF-κB/p50和NF-κB/p65的核内表达明显降低,Eca-109细胞增殖受到抑制,在前72h细胞未出现持续快速增殖现象.表明在异鼠李素处理前期,通过食道癌细胞应激作用激活NF-κB信号途径,导致下游相关基因的表达变化从而抑制异鼠李素诱导Eca-109细胞的凋亡作用,而在处理后期异鼠李素诱导的细胞毒性作用占主导地位,导致NF-κB信号途径及食道癌细胞增殖被抑制.     

HPLC法测定沙棘籽粕中槲皮素山柰酚和异鼠李素的含量

目的:建立高效液相色谱测定沙棘籽粕中槲皮素、山奈酚和异鼠李素含量测定方法.方法:采用Kromasil C18(4.6㎜×250㎜,5μm)色谱柱,流速1 mL/min.流动相:甲醇-水(含磷酸0.04%)为50∶50;检测波长为360 nm;柱温35℃.结果:3种成分均达到基线分离,槲皮素、山奈酚和异鼠李素的线性范围分别为0.0895~1.79μg(r=0.9998),0.0565~1.13μg(r=0.9999),0.088~1.76μg(r=0.9997);回收率为100.7%(RSD=2.1%),98.5%(RSD=1.7%),100.5%(RSD=1.5%).结论:此方法简便、重现性良好、结果准确可靠,可用于槲皮素山柰酚和异鼠李素的含量测定.     

藏药长毛风毛菊中木犀草素和异鼠李素含量快速测定法的建立

目的采用HPLC同时测定长毛风毛菊中木犀草素和异鼠李素的含量.方法 Eclipse XOB-C18（150×4.6mm,5μm）色谱柱,甲醇和水（含0.05%的磷酸）梯度洗脱,流速1mL.min-1,检测波长350nm,柱温35℃.结果木犀草素和异鼠李素的线性范围分别为0.106～5.81μg（r=0.9996）,0.113～6.94μg（r=0.9997）;平均回收率分别为99.14%（RSD=1.47%）和98.96%（RSD=0.99%）.结论该方法可用于藏药长毛风毛菊中木犀草素和异鼠李素含量的同时快速、准确测定.     

用光谱法研究异鼠李素与牛血清白蛋白的相互作用及几种金属离子对反应的影响

用紫外光谱法、 荧光光谱法研究异鼠李素与牛血清白 蛋白的相互作用机理及几种金属离子与异鼠李素和牛血清白蛋白之间的相互作用, 并探讨了几种金属离子与异鼠李素结合的类型, 阐明了它们的结合产物对牛血清白蛋白的作用机理. 实验结果表明, 异鼠李素与牛血清白蛋白主要是凭借静电引力作用结合, 异鼠李素主要以静态猝灭方式使牛血清白蛋白荧光强度减弱. 金属离子的介入影响了异鼠李素与牛血清白蛋白 的结合, 降低了其结合能力.     

Phytophthora elicitor PB90 induced apoptosis in suspension cultures of tobacco

The protein elicitor PB90 secreted by Phytophthora boehmeriae is an efficient elicitor inducing the hypersensitive response and systemic acquired resistance in tobacco plants. Here, we observed cell death in suspension-cultured cells of Nicotiana tabacum BY-2 with PB90 treatment using Trypan blue staining method. And this cell death could be suppressed by cycloheximide, an inhibitor of proteins synthesis, which implies that PB90-induced celldeath was an active cell death process requiring new protein synthesis. DAPI staining revealed that PB90 induce rapid chromatin condensation, margination, apoptotic bodies‘ formation and DNA laddering, further TUNEL assay also observed the specific breakage of 3 ‘-OH ends. All of the above common morphological characteristics indicated that PB90 induced apoptosis in suspension cultures of tobacco, suggesting that hypersensitive response induced by PB90 is an apoptotic process.     

CdCl2诱导秋粘虫细胞(Sf9)凋亡的初步研究

以秋粘虫（Spodoptera frugiperda Sf9）的细胞为材料，用不同浓度的CdCl2，通过Giemsa染色的形态学方法，研究其细胞凋亡．结果表明，在重金属离子的胁迫作用下，不同浓度的重金属离子致使细胞死亡率不同；其急性损伤域为136μmol／L；20μmol／L CdCl2作用6h后，Sf9细胞出现了凋亡小体．     

西兰花中ITCS诱导SGC-7901细胞凋亡作用机制

研究西兰花中异硫氰酸盐(isothiocyanates,ITCS)诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡的作用及其机制.应用MTT法检测ITCS对SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞仪检测活性氧、线粒体膜电位(Δψm)和细胞凋亡率.实验证明ITCS可明显抑制SGC-7901细胞增殖;不同质量浓度的ITCS作用于SGC-7901细胞24 h后,细胞内活性氧含量随给药剂量的增加而升高、线粒体膜电位依次降低.60、120、240μg/mL的ITCS作用于SGC-7901细胞48 h后可见细胞凋亡率分别为9.1%、20.1%和55.4%.ITCS可通过刺激SGC-7901细胞内活性氧的产生,损伤肿瘤细胞线粒体,使其膜电位下降最终引起SGC-7901细胞凋亡.     

Expression of bcl-2 gene increases in apoptosis of vascular endothelial cells induced by rattlesnake venom

Apoptosis of vascular endothelial cells (VEC) has been induced by deprivation of survival factors (aFGF and serum) and by rattlesnake venom. The expression of bcl-2 gene has been examined by Northern blotting in the two apoptosis inducing systems. Our results show that the expression of bcl-2 has not been detected in normal culture cells and in apoptotic cells induced by deprivation of survival factors. But in apoptotic cells induced by rattlesnake venom (10 g/mL), the expression of bcl-2 increases, and its mRNA exhibits two bands. The data first suggest that increasing expression and splitting of bcl-2 mRNA may play an important role in apoptosis of VEC induced by rattlesnake venom, and this finding is helpful to understanding the role of bcl-2 in regulation of apoptosis.     

硒诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究硒抑制肿瘤细胞生长的机理。方法：采用DNA电泳及流式细胞仪分析等方法。结果：硒能诱导Hela细胞调亡。1．5％琼脂凝胶电泳呈现典型的阶梯现象。流式细胞仪检测显示大量的亚二倍体细胞。结论：硒促进Hela。肿瘤细胞凋亡,可能是硒抑制肿瘤细胞生长的机理之一。     

莱菔硫烷诱导人肝癌HepG -2细胞凋亡的JNK途径

探讨莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)诱导人肝癌HepG -2细胞凋亡过程中,JNK途径的作用.采用荧光显微镜观察凋亡细胞形态;采用Western Blot法检测人肝癌HepG -2细胞内JNK和p- JNK 蛋白的表达.结果表明,10、20、40 μmol/L的SFN作用人肝癌HepG -2细胞48 h后,...     

Expression ofbcl-2 gene increases in apoptosis of vascular endothelial cells induced by rattlesnake venom

Apoptosis of vascular endothelial cells (VEC) has been induced by deprivation of survival factors (aFGF and serum) and by rattlesnake venom. The expression ofbcl-2 gene has been examined by Northern blotting in the two apoptosis inducing systems. Our results show that the expression ofbcl-2 has not been detected in normal culture cells and in apoptotic cells induced by deprivation of survival factors. But in apoptotic cells induced by rattlesnake venom (10 ng/mL), the expression ofbcl-2 increases, and its mRNA exhibits two bands. The data first suggest that increasing expression and splitting ofbcl-2 mRNA may play an important role in apoptosis of VEC induced by rattlesnake venom, and this finding is helpful to understanding the role ofbcl-2 in regulation of apoptosis.     

Z-ajoene induces tumor cells to die by apoptosis

To unravel the pharmacological actions of garlic, a simple thio-compound, z-ajoene, was purified from the fresh cloves. Three tumor cell lines were subjected to treatment with z-ajoene at different concentrationsin vitro and the morphological changes, DNA content of the cells and chromosome DNA fragmentation were observed by light microscopy, flow cytometry and agarose gel electrophoresis respectively. It was found that z-ajoene induced cell death by apoptosis in human HL-60 promyelocytic leukemia cells, MGc-803 gastric mucoid adenocarcinoma cells and Molt4 T lymphocyte leukemia cells. Western blot assay showed that z-ajoene Inhibited proto-oncogene bcl-2 expression in the three different kinds of tumor cells, suggesting that z-ajoene may be a potential agent for tumor chemotherapy.     

兔血清诱导Shope肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：前期实验结果已证明兔血清对Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞具有伤作用。本实验拟从细胞凋亡角度探讨兔血清杀伤该细胞的机理。方法：通过电子显微镜、激光共聚焦显微镜、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测等方法,观察了兔血清诱导细胞凋亡的可能性。结果：经１０％兔血清处理３ｈ的中等分化程度的Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞（ＳＣＢ－６ａ）在电镜、激光共聚焦显微镜下均可见典型的细胞凋亡的形态学特征;１．５％琼脂糖凝胶电泳呈现明显的“阶梯状”图谱（ＤＮＡ ｌｅｄｄｅｒ）;ＰＩ染色后经流式细胞仪检测显示大量亚二倍体细胞（凋亡细胞）。结论：兔血清诱导Ｓｈｏｐｅ肿瘤细胞凋亡可能是其伤细胞的作用机理之一。