嗜盐古生菌AJ6的分离及系统发育分析

从新疆阿尔金山国家自然保护区阿牙克库木湖分离纯化得到嗜盐古生菌AJ6,革兰氏染色呈阴性、杆状、少数球形、菌体大小为0.2～0.6 μm×1.6～4.2 μm,最适NaCl和Mg2+质量浓度分别为15%和0.6%,在pH为6.0～7.0条件下生长良好.在此基础上,进一步通过PCR方法扩增了菌株AJ6的16S rRNA基因(16S rDNA),测定了该基因的核苷酸序列,并利用"Clustalw"软件和"PHYLIP"软件包分析16S rDNA序列,对其进行同源性比较和系统发育学分析,建立了嗜盐古细菌的系统发育树.结果表明菌株AJ6与Nnm.pallidum、Nnm.pellirubrum和Nnm.versiforme分在同一类群中,16S rDNA序列同源性分别为97.47%,96.44%和98.12%,菌株AJ6是Na-trinema属中的一个新成员,命名为Natrinema altuensis.菌株AJ6的1 6S rDNA序列已登陆到GenBank,其序列号为AY277584.     

棉浆黑液生物处理系统中嗜碱细菌的多样性

以棉浆黑液为细菌分离培养基,从某化纤厂黑液生物处理系统中分离到16株嗜碱细菌,对其形态及生理生化等特征的研究结果表明,所分离的嗜碱细菌以产芽孢的革兰氏阴性细菌占优势,在个体形态和生理生化特性方面具有丰富的多样性.扩增rDNA限制性分析(ARDRA)结果表明,棉浆黑液中的嗜碱细菌分为2大类群,不同菌株之间的酶切图谱具有较大的差异.测定黑液生物处理系统中6株占优势的嗜碱细菌的16S rDNA序列,与国际上已报道的细菌的16S rDNA序列进行比较,结果表明:它们的序列与芽孢杆菌属(Bacillus)或副球菌属(Paracoccus)中的参比菌株的同源性达到98%以上.以16S rDNA序列为基础的Bacillus属嗜细菌的系统发育分析结果显示,其中3个菌株与B.halodurans和B.wakoensis的相似性大于99%.     

新疆伊吾湖嗜盐菌bop基因多样性

为了研究新疆中部地区伊吾湖嗜盐微生物和细菌视蛋白基因（bop）资源，分离纯化了95株嗜盐和耐盐菌．并从中挑选了10株红色的菌株，采用PCR和TA克隆的方法，扩增出bop基因螺旋C到螺旋G的核心序列，测定了基因的核苷酸序列．基于bop基因序列的同源性比较和系统发育学分析，发现9个序列分布在同一分支下，表明伊吾湖嗜盐菌bop基因具有一定的多样性和明显的自身地域性．     

我国中部地区热泉嗜热菌的分离及其产酶研究

从我国中部的四川喜德、普格地区以及陕西南部地区分别采集地表热泉和地下热水水样，采用培养方法分离得到47株中度嗜热细菌．16S rRNA基因片段序列的分析和比对结果表明，采集地的嗜热细菌以芽孢杆菌为主，并且主要分布在Anoxybacillus和Geobacillus 2个属中．同时，通过平板法对分离的嗜热菌进行产酶定性实验，发现其在60℃或70℃条件下能够分泌多种耐热的水解酶类，其中60％的菌株能够利用吐温，38％的菌株分泌蛋白酶，29％的菌株能够降解木聚糖，38％的菌株产生淀粉酶．根据筛酶统计结果，所分离的菌株在种间和种内均存有显著的产酶差异．     

嗜盐古菌中氯视紫红质基因序列的遗传分析

采用PCR方法扩增了嗜盐古菌AB19、AB30和AJ5编码螺旋C至螺旋G的氯视紫红质（halorhodopsin，HR）蛋白基因片断和168rRNA基因（168rDNA），测定了它们的核苷酸序列，与已报道的，hr基因序列差异显著．获得AJ5 HR蛋白基因序列在Halobiforma属中尚属首次．对hr基因序列进行的遗传分析，包括GC含量、转换与颠换的比值、密码子使用偏好，表明hr基因面临进化选择和偏倚突变压的双重制约，是一类进化程度较高的基因．对比br基因编码蛋白螺旋C到G的序列发现它们具有相似的种属特征．采用BR和HR蛋白螺旋C到G序列构建系统发生树比传统的168rDNA序列具有优势，BR和HR可以作为两种新型的分子指标．     

荚膜红假单胞菌的自然选育及培养特性

从高产对虾塘底泥中分离到一株细胞产量较高的荚膜红假单胞菌（Ｒｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃａｐｓｕｌａｔａ）茵株Ｊ３２５,光照厌氧培养生长,实验表明：Ｊ３２５菌株生长的最适温度为２７．５—３０℃,最适ｐＨ值为６．５—７．５,最适浓度为２．５％～５．０％．光照强度为２０００—５０００ｌｘ,培养基中添加０．２５％－０．３５％酵母提取物能明显地促进细胞生长．     

舟山地区嗜盐菌的分离和产胞外多糖菌株的筛选

对浙江舟山地区近海和盐田的样品进行分离检测．从11份泥样和16份水样中共分离纯化120株嗜盐菌，其中多数为中度嗜盐菌或耐盐菌，颜色以白色为主，其次是红色和黄色，细胞形态多为杆状或球状，革兰氏阴性菌株占81．6％．研究表明，嗜盐菌在该地区具有广泛的分布和一定的多样性．以分离菌株为材料筛选产胞外多糖的菌株，发现19株能产生胞外多糖，其中菌株HS239产量较高．     

水分与微颗粒坛紫菜生产工艺的研究

生产微颗粒坛紫菜的物料随着粗粉碎、细粉碎、超微粉碎的加工进程，粒径逐渐缩小，水分含量降低．紫菜经过粗粉碎后，含水量为7．26％～7．90％，粒径为3～15mm，平均7．40mm；细粉碎后的含水量为3．99％±0．26％，粒径为61～245μm，主要为100～125μm，平均为108．4μm；超微粉碎后的含水量为3．42％，粒径为0．020～20μm，平均4．57μm．物料的水分含量与加工的效率呈负相关，物料预脱水，能提高生产效率；单位重量的微颗粒、超微颗粒紫菜的体积比初级物料缩小3～8倍，能减轻仓储与运输成本．     

水浮莲（Pistia stratiotes L．）在极端环境中的生存能力检测

检测水浮莲（Pistia　stratiotes　L．）在不同pH和不同温度条件下的生长能力以及对NaCl的敏感性，结果表明．水浮莲最适合的生长繁殖温度条件为20-35℃．低于10℃时不能够正常生长繁殖，低于5℃时难以保持生存能力；最适pH范围在pH6～10之间；水浮莲对NaCl非常敏感，10mM·L^-1NaCl影响水浮莲的正常生长，高于此浓度的NaCl会导致水浮莲的黄化以及死亡．     

甘蓝rDNA及C0t-1 DNA荧光原位杂交及其核型分析

为了探索一种高效可靠的芸薹属植物核型分析方法，本文以甘蓝品种黑叶小平头为实验材料，从其基因组DNA中分离出C0t-1 DNA并用生物素标记作探针，对有丝分裂中期相染色体进行原位杂交，每对染色体上均显示出了特定的荧光原位杂交带型．将植物25S和5SrDNA分别用地高辛和生物素标记作探针，单色荧光原位杂交结果显示黑叶小平头2对染色体具有25SrDNA基因座，1对染色体具有5S rDNA基因座．生物素标记的C0t-1 DNA与地高辛标记的25S rDNA等量混合作探针，双色荧光原位杂交证实了C0t-1 DNA与25S rDNA二者具有一致的染色体位置特征，表明基于rDNA及C0t-1 DNA荧光原位杂交的核型分析技术，优于目前普遍采用的只基于rDNA荧光原位杂交的核型分析方法．结合已报道的rDNA染色体定位结果，及C0t-1 DNA荧光原位杂交带型与染色体形态，更准确地构建了甘蓝的核型．     

一株嗜温高效产氢细菌Clostridium sp.08-1的分离鉴定与产氢特征

从10L连续搅拌式罐式反应器(CSTR)中分离得到1株嗜温高效产氢菌株08-1.根据菌株的形态特征和16S rDNA序列结果分析,初步鉴定菌株08-1属于Clostridium sp..同时还进一步研究了温度、pH值控制、底物浓度和种类对菌株08-1产氢的影响.结果表明.该菌株更适合利用蔗糖或成分复杂的生物质木薯粉以及废弃物厨余垃圾生长及产氢,最适产氢温度为40℃,产氢系统pH值控制在5.5时获得最大产氢量.在间歇发酵中,蔗糖浓度为20 g/L,控制温度40℃,pH值5.5,搅拌速度100 r/min时实现最大产氢速率为245 mL·(L·h)~(-1),最大产氢量达到3.06 mol.该菌株在生物制氢中具有潜在的应用价值.     

黑鱾（Girellaleonina）淀粉酶与蛋白酶的活力研究

通过测定1＋龄黑鱾的胃、盲囊、肝脏和肠道4个消化组织中蛋白酶和淀粉酶活性,并研究其与温度及pH值的关系,可以为黑纪的合理投饵提供理论依据．实验设9个温度梯度（10～50℃）和14个pH缓冲液梯度（pH2．0～9．0）,用淀粉-碘显色法测淀粉酶活力,用福林-酚试剂法测蛋白酶活力．结果表明：黑纪盲囊、肠道中淀粉酶和蛋白酶活力均较高,最适温度为35℃,淀粉酶最高活力为每克鲜组织46．02U和42．61U蛋白酶最高活力为每克鲜组织156．52u和147．79U;胃中酶的最适温度为40℃,肝脏中淀粉酶温度要求稍低,最适温度为30℃,酶活力值也最低;胃淀粉酶和胃蛋白酶最适pH值分别为6．5和3．5,盲囊、肠道和肝脏组织中的最适pH值相近,为7．0-8．0．可以认为黑鲍胃中主要存在着酸性蛋白酶,胃是食物蛋白质初步分解消化的场所;Q10值充分反映了温度对消化酶活力的影响,当温度从10℃上升至20℃时。2种消化酶活力增幅显著,可作为开始投饵的温度指标．     

乳化-热交联法制备明胶微球

采用乳化-热交联法制备了明胶微球,研究了乳化条件对微球粒径大小和溶胀性的影响.研究结果表明,最佳的乳化条件为:明胶溶液质量分数为20%,水油比为1:5(体积比),乳化温度为50℃,乳化时间为30 min,冷却时间为1.5 h,冷却温度为4℃.采用该方法可制备出粒径为50～1400 μm,溶胀率为150%～400%的明胶微球.     

温度和盐度对细巧华哲水蚤存活率的影响

研究了温度,盐度及其交互作用对细巧华哲水蚤24h存活率的影响,结果表明：该种适温范围1－27度,最适温度为15－20度,适盐范围0－29．3‰,最适盐度为12．4－18．9方差分析显示了温度,盐度及其交互作用对存活率均有极显著影响,依贡献大小为温度＞盐度＞交互作用,当培养条件接近自然海区的温度或盐度时,细巧华哲水蚤具有最大的适盐,适温范围。     

延迟投饵对鱼仔鱼早期阶段摄食、存活及生长的影响

对延迟投饵0～6d的鮸鱼仔鱼的摄食、生长与存活进行了研究,结果表明：（1）当海水温度为24．5～25℃,盐度为24．2～24．8时,鮸鱼仔鱼3日龄后开口摄食,初次摄食率为25％．其不可逆点（PNR）出现在开口后第3天;（2）鮸鱼仔鱼体长的增长率随着延迟投饵天数的增加而减低,鮸鱼仔鱼的存活率亦随着延迟投饵天数的增加而降低,延迟6d投饵,8日龄仔鱼全部死亡;（3）鮸鱼仔鱼的适宜投饵时间为孵出后的1d之内．     

褪黑素和芦丁抑制蛋白质硝基化的比较研究

以牛血清白蛋白为硝化底物、过氧亚硝酸为硝化试剂,研究了褪黑素和芦丁对蛋白质硝基化的抑制作用.通过对硝基化反应各种影响因素的探讨,发现在37℃,pH 7.2,反应时间90 min以及过氧亚硝酸浓度为6.0×10~(-4)mol/L时,硝基化反应进行最完全.实验分别在硝基化反应进行前、进行中以及反应后,在硝基化反应体系中引入不同浓度的抑制剂褪黑素和芦丁.结果显示,在硝基化反应发生前加入抑制剂,抑制硝基化反应的效果最为明显;当褪黑素和芦丁的终浓度为5.0×10~(-5) mol/L时,抑制率分别达到80.7%和52.4%;若继续增加褪黑素,抑制率几乎不再变化,继续增加芦丁,抑制率小幅上升后开始呈下降趋势.总的来说,褪黑素抑制蛋白质硝基化的效果明显好于同浓度的芦丁.     

单分散核-壳型银包覆二氧化硅微球的制备及复合机理研究

基于Stober水解法制备得到纯二氧化硅微球, 通过以PVP为保护剂和还原剂的可控还原法制备得到银包覆二氧化硅复合微球. 该复合微球的单分散性好, 且均匀而稳定, 其中核的平均粒径在255nm, 壳层银纳米粒子粒径约为8nm. 根据银源溶液的浓度、反应温度以及反应液pH值等3个主要因素对复合微球的生长和形貌的重要影响, 研究了该核-壳型复合微球的合成机理, 得到最优合成条件: 最佳离子浓度为2.0mmol?L-1, 主要生长温度为40~50℃, 且最适酸碱度在pH=12.12处. 该复合微球在光学和催化等诸多领域都有广泛的潜在应用前景.     

鲭鱼中组胺降解酶产生菌的分离筛选和基本酶学性质研究

鲭鱼亚目的海洋鱼类在捕获后易产生组胺,导致鲭鱼中毒．为研究组胺消长与微生物的关系,通过平板分离和摇瓶发酵,以荧光光度法测定酶活力,从鲭鱼（Pneumatophorus japonicus）皮肉、内脏和腮中分离筛选组胺降解菌,并对所产组胺降解酶的酶学性质进行研究和分析．结果表明：自内脏中分离筛选到一株组胺降解酶活力较高的革兰氏阴性杆菌,从生长产酶曲线推测该酶为初级代谢产物．该酶反应的最适温度为35℃,最适pH为7．2．在pH6．0～8．0和温度20～35℃范围内有较好的稳定性．Mn^2＋、Ca^2＋、Na^-、Mg^2＋、K^＋等金属离子存在时酶活力增加。Zn^2＋、Al^3＋、Fe^3＋、Fe^2＋、Cu^2＋等金属离子存在时,酶活力下降,在EDTA存在条件下酶活力完全丧失．对其动力学研究表明,在甘氨酸-NaOH缓冲反应体系中,最大反应速度Vmax=156．25U·mL^-1,米氏常数Km=0．22mg·mL^-1．组胺降解菌国内还朱见报道,研究结果对进一步研究水产品组胺生物控制技术具有重要意义．     

鸡土从菌的小白球菌阶段培养初探

通过模拟实验来研究鸡纵菌的小白球阶段的培养条件.结果表明小白球菌除需要低 p H值 (4.0一4.5) 和低浓度有机氮外,还需要多种维生素和一定的糖类,小白球菌在实验 室条件下生长良好,液体培养已获得成功,为人工利用和栽培鸡纵菌提供了一 条 可能的 途径