核酸化学研究 Ⅳ.常见核糖核苷及其3′-核糖核苷酸柱层析

本文介绍以涂渍12％甲基三正烷基(C_8～C_(10))氯化铵的聚三氟氯乙烯细粉(160～200目)为交换剂的反相离子交换柱层析。用碳酸铵水溶液分级洗脱,可在三小时左右一次柱层析即能把常见核糖核苷和相应的3'-核糖核苷酸共八种组分的混合物分开,并可根据各组分的峰面积定量。各组分洗脱的次序为胞嘧啶核糖核苷(CR),腺嘌呤核糖核苷(AR),尿嘧啶核糖核苷(UR),鸟嘌呤核糖核苷(GR),3'-胞嘧啶核糖核苷酸(3'-CMP),3'-腺嘌呤核糖核苷酸(3'-AMP),3'-尿嘧啶核糖核苷酸(3'-UMP),3'-鸟嘌呤核糖核苷酸(3'-GMP)。表示各峰分离情况的分离度(R)除CR和AR之间为0.77分离略差外,其它各峰之间均大于1。各个组分含量达10～20微克(0.3～0.5A_(260))~*即可定量。定量分析标准误差σ=0.06。此法已成功地用于以化学方法合成的低聚核糖核苷酸的碱基组成的测定。     

尿核苷和腺核苷的2＇位烯丙基化反应

在核苷酸合成中,核糖2＇位羟基的保护是不易的,主要原因是难以区别2＇位和3＇位的两个羟基。Markiewicz曾提出利用试剂1,3-二氯-1,1,3,3-四异丙基二硅氧烷(简写为TIPDSiCl_2)作为暂时保护基团的好方法。但是,这种方法不适应醚形式的2＇位羟基的保护。     

核酸化学研究--Ⅰ.结晶的5′-O-三苯甲基和5′-O-单对甲氧三苯甲基核糖核苷-3′-磷酸盐

本文报导了采用单对甲氧三苯甲基氯或三苯甲基氯与3′-单核糖核苷酸直接反应的方法,合成的产物通过适当的溶剂处理获得了结晶的5′-O-单对甲氧三苯甲基保护的3′-胞核糖核苷酸、3′-尿核糖核苷酸、3′-腺核糖核苷酸以及5′-O-三苯甲基保护的 N-乙酰基-3′-鸟核糖核苷酸等化合物,既简化步骤、缩短时间,又提高了产物的纯度和得率.     

核糖核苷酸和核糖核苷的N-羧酰咪唑选择性酰化

应用 N-羧酰咪唑在合适的条件下可按制备性规模进行选择性地酰化核糖核苷酸和核糖核苷,得率为50—80%.对反应机制作了初步探讨.     

核糖核苷酸和核糖核苷的N-羧酰咪唑选样性酰化

应用N-羧酰咪唑在合适的条件下可按制备性规模进行选择性地酰化核糖核苷酸和核糖核苷, 得率为50-80%. 对反应机制作了初步探讨.     

斯氏花群海葵多糖Ⅰ和Ⅱ的组成研究

从生长于我国南海西沙群岛的斯氏花群海葵中分离得到两种具有心血管活性的物质—多糖(Ⅰ)和多糖(Ⅱ),运用化学分析,光谱分析及酸水解—双向纸层析等对它们的组成进了研究。结果表明多糖(Ⅱ)由核糖、半乳糖和乙酰氨基半乳糖以分子比约为3.2:2.0:1.0组成,多糖(Ⅰ)则由核糖和半乳糖以分子比约为2.2:1.0组成。     

含双氢尿嘧啶核苷或核苷酸的低聚核苷酸的组成分析

在核酸化学研究中,核酸的组成分析已有报导,这些报导都是采用紫外检测法。1965年,Madison等人根据双氢尿嘧啶核苷(DHU_r)及其核苷酸(DHU_p)的水解产物尿代丙酸的衍生物能与对二甲氨基苯甲醛显色的特性,用纸层析证实了tRNA存在DHU_p.DHU。无明显特征紫外吸收峰,不能用通常的紫外吸收法检测。本文应用这个特性,报导了一种能用于含DHU_r或DHU_p的低聚核苷酸的组成分析方法。     

L-胞嘧啶异核苷的全合成研究

为了系统研究异核苷嵌杂寡聚核苷酸的生物学效应,对L-胞嘧啶异核苷的全合成工艺进行了详细研究.以L-核糖为起始原料,以尿嘧啶碱基对5-O-三苯基甲基-2,3-O-环硫酸酯-1-脱氧-L-核糖3位的区域选择性亲核取代反应为关键步骤,经过9步反应,以28.5%的总收率合成得到了L-胞嘧啶异核苷.条件优化表明,以碳酸铯为碱可以显著提高N-1核苷键生成的产率和减少副反应的发生,同时分离得到了副产物N-1,N-3双核糖尿嘧啶异核苷.该工艺路线反应条件温和,反应中间体容易纯化,总产率高,可以作为结构类似异核苷的通用合成路线.     

核酸化学研究 Ⅶ.t-RNA_y~(Ala)的D环四个低聚核糖核苷酸片段的合成

在酸性条件下,用铂催化剂氢化尿嘧啶核糖核苷酸和核苷分别获得双氢尿嘧啶核糖核苷酸和核苷.以此制备了它们的衍生物,进一步通过磷酸二酯法,合成了酵母丙氨酸转移核糖核酸D环中含有双氢尿嘧啶核糖核苷酸的片段DpApG,ApGpDpC和ApGpDpCpGpG.同时还合成了含有双氢尿嘧啶核苷的片段ApGpD.其中DpApG还用磷酸三酯法合成过.     

核酸化学研究VII.t-RNA~Y^Ala的D环四个低聚糖核苷酸片段的合成

在酸性条件下,用铂催化剂氢化尿嘧啶核糖核苷酸和核苷分别获得双氢尿嘧啶核糖核苷酸和核苷.以此制备了它们的衍生物,进一步通过磷酸二酯法,合成了酵母丙氨酸转移核糖核酸D环中含有双氢尿嘧啶核糖核苷酸的片段DpApG,ApGpDpC和ApGpDpCpGpG.同时还合成了含有双氢尿嘧嚏核苷的片段ApGpD.其中DpApG还用磷酸三酯法合成过.     

核酸化学研究——Ⅱ.N-羧酰咪唑在酰化核糖核苷酸上的应用

N-羧酰咪唑作为酰化试剂单独与核糖核苷酸吡啶盐反应时,主要形成核糖核苷-2',3'-环磷酸或其与羧酸的混合酸酐,但是当有N,N'-二环已基吗福啉碳酰胺亚胺或无水氢氧化四乙基铵存在时,不仅可以抑制核苷酸的2',3'-环磷酰化,而且大大加快了核糖羟基和杂环氨基的酰化反应速度和反应的完全程度.羧酰咪唑试剂已应用于各种核糖核苷酸的乙酰化、异丁酰化、苯甲酰化反应.与羧酸酐和苯甲酰氰相比较,本试剂的优点在于反应速度快,副反应少,产物纯,得率高.根据产物的分离和鉴定以及³¹ P 脉冲核磁共振谱的变化初步证明,当苯甲酰咪唑与3'-尿核糖核苷酸吡啶盐在二甲基甲酰胺中反应时,一般情况下先迅速形成核苷酸-苯甲酸的混合酸酐,然后转化为核苷-2',3'-环磷酸,再进一步完成5'-羟基的苯甲酰化.若有N,N'-二环已基吗福啉碳酰胺亚胺或氢氧化四乙胺存在时,则核糖核苷酸的杂环氨基和核糖部分上的羟基都发生酰化,而且形成混合酸酐但不出现环核苷酸.     

γ射线辐照的多晶态嘧啶核苷类中自旋捕捉自由基的ESR研究——Ⅰ.胞苷、脱氧胞苷、尿苷和脱氧尿苷

本文以NtB(亚硝基特丁烷)为捕捉剂,利用自旋捕捉(Spin Trapping)和ESR方法,研究了γ射线辐照的四种多晶态嘧啶核苷(胞苷、脱氧胞苷、尿苷和脱氧尿苷)中产生的室温自由基。对所有样品确定了有三种类型的自由基存在,即—(?)(5)H-C(6)H_2-和-C(5)H_2-(?)(6)H-碱基自由基以及由HO(?)(5′)H-C(4′)H<演变而来的—(?)(5′)H_2核糖自由基。此外,还倾向于鉴别出未成对电子定域在核糖C(1′)和C(4′)位的自由基。着重讨论了核糖自由基形成的机制。     

鸟核糖核苷酸(G_p)2’-位保护基的稳定性研究

为参与缩合反应的单核糖核苷酸的各个官能团寻找合适的保护基是化学合成低聚核糖核苷酸的一个重要课题。保护基在缩合反应和产物纯化过程中必须稳定,在除去时必须易于除尽,同时不引起其他基团的变化。关于保护基在某些条件下的稳定性虽然在有些文章中曾提     

用高效毛细管电泳测定二(2'-脱氧-2'-氟)嘧啶核糖核苷酸对蛇毒磷酸二酯酶的稳定性

本文报道用高效毛细管电泳测定蛇毒磷酸二酯酶催化的二(2'-脱氧-2'-氟)嘧啶核糖核苷酸的水解速度。高效毛细管电泳用于这个目的有分辨率高、样品需要量'、使用不含有机溶剂的缓冲液和操作方便等优点。用来测定具有中等反应速度的反应是很方便的。     

用高效毛细管电泳测定二(2'-脱氧-2'-氟)嘧啶核糖核苷酸对蛇毒磷酸二酯酶的稳定性

本文报道用高效毛细管电泳测定蛇毒磷酸二酯酶催化的二(2'-脱氧-2'-氟)嘧啶核糖核苷酸的水解速度。高效毛细管电泳用于这个目的有分辨率高、样品需要量'、使用不含有机溶剂的缓冲液和操作方便等优点。用来测定具有中等反应速度的反应是很方便的。     

烟酰胺碳核苷类似物的模块化合成

以核糖异头羧酸制备为起始,以可见光/金属镍双重催化脱羧偶联反应为核心,与氰基水解反应相结合,开发了一条新的模块化合成路线,实现了一系列苄基保护烟酰胺碳核苷类似物的高效合成,其结构经¹H NMR, ¹³C NMR和HR-MS( ESI)表征。      

核苷和核苷酸混合物的层析

本文介绍五个核苷和六个核苷酸混合物的反相柱层析。柱上用涂有N263固定相(它与聚三氟氯乙烯担体的重量比为1:1)的交换剂装填。以含有KCl的咪唑·盐酸缓冲液(pH7.0)分三级洗脱,除了3＇-T_p和3＇-A_p外,每一对洗脱成份的分离度都大于1。     

用高效毛细管电泳测定二(2′-脱氧-2′-氟)嘧啶核糖核苷酸对蛇毒磷酸二酯酶的稳定性

本文报道用高效毛细管电泳测定蛇毒磷酸二酯酶催化的二(2’-脱氧-2’-氟)嘧啶核糖核苷酸的水解速度.高效毛细管电泳用于这个目的有分辨率高、样品需要量’、使用不含有机溶剂的缓冲液和操作方便等优点.用来测定具有中等反应速度的反应是很方便的.     

含双核铁中心金属蛋白和金属酶的研究进展

介绍了三种含双核铁活性中心的金属蛋白和金属酶的最新研究进展，它们是蚯蚓血红蛋白，甲烷单加氧酶，核糖核苷酸还原酶。     

L-鸟嘌呤异核苷的全合成研究

发展了一条改进的L-鸟嘌呤异核苷全合成路线.以L-核糖为起始原料,合成了3,5-O-二苄基-1-脱氧-L-核糖,再与碱基N~2,N~2-二叔丁氧羰基-6-氯鸟嘌呤发生关键的Mitsunobu反应来合成异核苷6.经过9步反应,以37.3%的总收率合成了L-鸟嘌呤异核苷,其中Mitsunobu反应构建异核苷键具有立体专一性、高产率、条件温和、区域选择性高等优点.该方法可以作为鸟嘌呤异核苷的通用合成路线.