同时测定体液中咖啡因和茶碱的薄层色谱扫描法

研究了同时测定血清、尿样中的咖啡因和茶碱的薄层色谱定量法。在ＧＦ２５４硅胶板上，用乙酸乙酯－氨水（Ｖ乙酸乙酯∶Ｖ氨水＝９６∶４）的二元展开体系能将这两种生物碱有效地分离。其Ｒｆ值为咖啡因０．４６，茶碱０．１６。分离后的试样用薄层色谱扫描仪进行扫描定量，测定波长２７２ｎｍ，线性范围咖啡因０．００９７～１．９４μｇ，茶碱０．００９０～１．８０μｇ。血清及尿样的加标回收率在９５．８％～１０６．５％之间，相对标准偏差２．９５％～３．５０％。本法较为简便、快速、准确     

毛细管气相色谱测定胶原蛋白和卵清蛋白氨基酸

讨论了纳克量级(ppb)的18种氨基酸在石英毛细管住气相色谱的分离和定量测定。用此法对胶原蛋白和卵清蛋白水解氨基酸进行了定量。结果的精确度为0.8～7.3%。氨基酸的衍生化采用N-TFA-butyl系统,分二步完成,第一步在酸性介质中用亚丁醇酯化;第二步是用三氟醋酐酰化。氨基酸回收率在85%以上。蛋白质水解在6N恒沸点盐酸中充氮气,在145±2℃加热4小时完成。     

卵清蛋白在疏水连续棒状色谱中吸附量与溶剂浓度间关系的研究

以推导改进的Langmuir模型过程中的总热力学平衡常数的表达式为基础,考察了卵清蛋白在疏水连续棒状色谱柱上的会行为,发现当蛋白在保留情况下,能很好地符合Langmuir模型,而且,进一步研究了吸附量与溶剂浓度的关系。发现在保留情况与,其吸附量的对数与流动相中置换剂的摩尔浓度之间在成线性关系。当流动相中硫酸铵浓度仅相关0．5mol/L时,其最大吸附量相差30倍,说明在比较柱的吸附量时,应选择适合的溶剂浓度,提出了在等浓度条件下洗脱条件蛋白能够在色谱柱保留时的饱和吸附量为其有效吸附量,在这种条件下的流动相的组成才是研究溶质饱和吸附量的合适组成。     

阳离子交换色谱及动态涂层毛细管电泳法检测牛奶中乳铁蛋白含量

建立了阳离子交换色谱及动态涂层毛细管电泳检测牛奶中乳铁蛋白含量的新方法。通过purolite C115-E弱酸性离子交换树脂对牛奶中的乳铁蛋白进行提取,运用季铵化纤维素(QC)对毛细管动态涂层并测定乳铁蛋白含量。实验结果表明,该动态涂层能有效抑制毛细管内壁对乳铁蛋白的吸附。通过对QC浓度、运行缓冲液pH值、孵育时间等萃取和电泳条件的优化,实现了对牛奶样品中乳铁蛋白的定量分析。结果显示,低、中、高3个浓度组的加标回收率为87%~112%,相对标准偏差(RSDs)为4.4%~12.1%。该方法分析速度快、分离效率高、所需牛奶样品少,适用于牛奶中乳铁蛋白的分离分析。     

毛细管电泳法测定尿中的姜黄素

采用高效毛细管电泳法测定人尿中姜黄素的含量,建立了一种测定体液中姜黄素的简便的分析方法。所用缓冲溶液为15 mmol/L的硼砂溶液(pH 9.24),运行电压为20 kV,检测波长262 nm。姜黄素的峰面积与其质量浓度的线性关系良好,其线性范围为10~300 mg/L,健康人尿中姜黄素的4个浓度水平的添加回收率均大于96.3%,相对标准偏差(RSD）小于2.3%。该法灵敏、快速、准确,可用于体液中姜黄素的批量检测。     

毛细管电泳检测奶粉中添加的大豆分离蛋白

采用毛细管电泳方法对乳蛋白和大豆分离蛋白进行检测。选择聚丙烯酰胺涂层毛细管,在紫外检测波长214 nm、分离电压25 kV条件下测出五种乳蛋白在不同线性范围内的线性相关系数均大于0.998,各乳蛋白的迁移时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)分别小于0.34%和4.50%,奶粉样品加标回收率范围为88.07%~102%;通过对比大豆7S和11S组分、大豆分离蛋白及乳蛋白的电泳图谱,定性确定出大豆分离蛋白8个特征峰,各特征峰的迁移时间和峰面积的RSD分别小于0.36%和4.87%,方法重现性较好。建立了奶粉中添加大豆分离蛋白的半定量检测方法。     

毛细管电泳扫描伏安电化学法分离检测肾上腺素、氯丙嗪和异丙嗪

采用自制的高效毛细管电泳扫描伏安电化学检测装置,在磷酸盐缓冲溶液中进行了肾上腺素、异丙嗪和氯丙嗪的分离检测,在优化的条件下获得了较好的检测重现性和低的检出限。结果表明,采用扫描伏安电化学方法不但能够减少电极的污染,而且可以在电泳过程中获得被测物质的伏安特性及检测体系的动态伏安图,更有利于被测物质的识别。     

毛细管电泳多次进样法快速测定尿肌酐

采用毛细管电泳多次进样技术快速测定了尿肌酐。采用３６ｃｍ×５０μｍｉ．ｄ涂层柱,０．１ｍｍｏｌ／ＬｐＨ２．５的磷酸缓冲液,在２００ｎｍ处检测。连续进样５个样品总分析时间为１２ｍｉｎ,比单次进样节省２０ｍｉｎ左右。日内、日间变异系数均小于７．０％,用吡啶作内标,在肌酐浓度为５～８０ｍｇ／Ｌ范围内,肌酐浓度与肌酐同吡啶的峰高比值的线性关系很好（ｒ＝０．９９９６）。测定１２个样品同生化分析仪测定的结果相关性好（ｒ＝０．９７７３）,且分析时间节省了约３０ｍｉｎ。     

毛细管电泳微机化扫描伏安检测器

描述了一种毛细管电泳微机化扫描伏安检测器,用微机通过D/A和A/D转换器控制扫描电压和采集电流信号,用12bit的D/A转换器和12bit的A/D转换器通过伏安仪分别与Ag/AgCl参比电极和工作电极相连,进行电位控制和数据采集.讨论了扫描电位的产生和数据采集的控制方法,并用本系统分离测定了对苯二酚和儿茶酚,结果令人满意.     

毛细管区带电泳法测定尿中甲酸含量

采用高效毛细管区带电泳法测定人体尿中甲酸含量,尿样经过滤后直接进样,方法简单、快速,测定结果令人满意。电泳电解质体系采用５ｍｍｏｌ／Ｌ邻苯二甲酸氢钾,０．５ｍｍｏｌ／Ｌ十六烷基三甲基溴化铵,ｐＨ６,５０ｃｍ×５０μｍｉ．ｄ．熔融石英毛细管（有效长度４８．５ｃｍ）,检测波长２１０ｎｍ,负电源,分离电压３０ｋＶ,压力进样,恒温２５℃,每次电泳前用０．１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ及缓冲溶液对毛细管各冲洗５ｍｉｎ。同时,采用检测波长与参比波长对调的方法使负峰转变为正峰。     

毛细管电泳分离与测定尿液中扑尔敏对映体

以ＨＰ－β－ＣＤ作为手性分离添加剂,对标样和实际尿液中的扑尔敏进行了手性分离和测定研究。在实际样品的分离测定时,用液液萃取时间样品预处理,并采用电堆集进样以提高检测灵敏度,对于尿液中扑尔敏对映体的检测限为１．５×１０＾－７ｇ／Ｌ。     

Simultaneous Determination of Lidocaine, Proline and Lomefloxacin in Human Urine by CE with Electrochemiluminescence Detection

A new method was developed for the simultaneous determination of lidocaine, proline and lomefloxacin in human urine by capillary electrophoresis-electrochemiluminescence detection with Ru(bpy)₃ ²⁺. Conditions of the separation and detection were investigated and optimized. It was proved that 20 mM phosphate buffer at pH 6.7 could achieve the most favorable resolution, and the high sensitivity of detection was obtained by using the detection potential at 1.15 V and 5 mM Ru(bpy)₃ ²⁺–60 mM phosphate buffer at pH 7.6 in the detection reservoir. The detection limits were 0.02 μg mL⁻¹ for lidocaine, 0.03 μg mL⁻¹ for proline and 0.06 μg mL⁻¹ for lomefloxacin. Relative standard deviations of the ECL intensity and the migration time were 3.5 and 1.1% for 6 μg mL⁻¹ lidocaine, 3.2 and 1.0% for 6 μg mL⁻¹ proline and 3.7 and 1.2% for 6 μg mL⁻¹ lomefloxacin, respectively. A baseline separation for lidocaine, proline and lomefloxacin was achieved within 360 s. The developed method was successfully applied to determine the amounts of lidocaine, proline and lomefloxacin in human urine. The recovery and RSD were in the range of 93.3–97.2 and 3.8–4.9%, respectively.     

盐酸丙咪嗪-人血清白蛋白结合作用的毛细管区带电泳测定法

采用毛细管区带电泳(CZE)技术,研究了抗抑郁三环类碱性药物盐酸丙咪嗪与人血清白蛋白(HSA)的结合作用。通过经典方法(超滤法)对该方法进行了方法学确证。该法适宜于水溶性良好的碱性药物(迁移时间足够短,且与蛋白质形成的复合物较稳定)-蛋白系统中分子间相互作用的定量考察。应用SAS 统计软件中非线性回归分析平台自编程序,求得了丙咪嗪与HSA的结合常数和结合位点数:K=0.18 L/μmol;n=2.2。 实验证明:该法可靠、简单、高效、低耗。     

毛细管电泳中移动反应界面法富集和检测尿样中的氧化苦参碱

采用建立在移动反应界面理论上的体系进行尿样中氧化苦参碱的富集与定量检测。与传统的毛细管电泳相比,体系中引入了富集缓冲溶液(富集相)和分离缓冲溶液(分离相)。优化的条件如下:样品缓冲溶液为20 mmol/L 甲酸钠(用氨水调节pH至10.70),富集缓冲溶液为40 mmol/L 甲酸-甲酸钠(pH 2.60),分离缓冲溶液为100 mmol/L 甲酸-甲酸钠(pH 4.80);样品相压力进样1.4 kPa×3 min,富集相压力进样1.4 kPa×7 min,紫外检测波长210 nm,电压21 kV。氧化苦参碱在2.2~65 mg/L的质量浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9991),检出限为0.74 mg/L,灵敏度比常规毛细管电泳方法提高约70倍,重现性良好。该方法已经成功地应用于尿样中氧化苦参碱的检测。     

Determination of Binding Constants for Basic Drugs with Serum Albumin by Affinity Capillary Electrophoresis with the Partial Filling Technique

A simple, rapid, and accurate method is presented for determination of the binding constants of eight basic drugs with serum albumin by affinity capillary electrophoresis with the partial filling technique. Molecular modeling and multivariate regression analysis were used to investigate the relationship between the binding constants and the physicochemical properties of the drugs. The results show that hydrophobic attraction is responsible for interaction of most of the drugs with HAS, although interaction between sulfamethoxazole and HSA is because of electrostatic attraction.     

毛细管电泳-间接化学发光法检测尿液与血液中吗啡含量

在碱性溶液中,吗啡对Ag(Ⅲ)配合物-鲁米诺化学发光体系的化学发光信号有显著抑制作用,且抑制程度与吗啡浓度成正比。基于此,建立了毛细管电泳-间接化学发光检测尿液和血液中吗啡含量的方法。在优化条件下,方法检出限为0.75 mg/L,线性范围为2.0~30.0 mg/L,相关系数(r)为0.999 8;对20mg/L的吗啡进行7次平行测定,测得的相对标准偏差(RSD)为2.0%。结合固相萃取法,该方法成功用于尿液和血液中吗啡含量的测定,平均加标回收率分别为109.0%与101.3%。该方法分辨率高、灵敏、分析成本低,可用于尿液和血液中吗啡含量的测定。     

Comparative Evaluation of CE and HPLC for Determination of Cotinine in Human Urine

Two rapid and popular methods—capillary electrophoresis (CE) and high-performance liquid chromatography (HPLC) have been compared for analysis of cotinine in human urine. Cotinine was analyzed in less than 7 min, with detection limits of 5 and 3.2 ng mL⁻¹ for CE and HPLC, respectively. The performance of the methods was evaluated in terms of sensitivity, specificity, precision, accuracy, and limits of detection and quantification. Calibration plots were linear in the range 50–4,000 ng mL⁻¹, at least, and mean recoveries were satisfactory for both techniques. The methods were successfully used for quantification of cotinine in urine.