高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草素

在蛹虫草中腺苷和虫草素含量的反相高效液相色谱分析中,所用色谱柱为WatersNOVA-PAK C18(3.9 mm×300 mm,4μm),流动相为0.01 mol.L-1KH2PO4-K2HPO4缓冲溶液(pH 6.86)+1%(体积分数)四氢呋喃,流速为1.0 mL.min-1。紫外检测的波长为260 nm,峰面积与腺苷浓度和虫草素浓度之间的线性范围依次为1.27~50.5 mg.L-1和3.23~129.0 mg.L-1,其检出限依次为0.18 ng和0.25 ng。在腺苷及虫草素的浓度水平依次为5.05 mg.L-1和12.9 mg.L-1时测试方法的精密度,求算得RSD(n=7)值依次为0.094%和0.792%。用标准加入法试验方法的回收率,求得两者的平均回收率依次为103.2%和98.5%。     

高效液相色谱法同时测定虫草素和腺苷

本文用微波法提取蛹虫草培养基和子实体中的虫草素及腺苷,并利用高效液相色谱法同时测定虫草素和腺苷.选择Inertsil ODS-SP柱(150×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,乙腈-水为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,二极管阵列检测器(DAD)检测,检测波长260 nm,进样量10 μL.在2～10 μg...     

虫草素的合成

以腺苷为原料经原酸酯环化和乙酰溴水解原酸酯、自由基还原脱溴及水解乙酰基等3步反应合成了虫草素——3'-脱氧腺苷,总收率29.8%,纯度95%,其结构经1H NMR和MS确证。     

虫草素的合成研究进展

虫草素是从蛹虫草中分离得到的脱氧腺苷结构类似物,具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节等广泛的生物活性.虫草素的来源稀缺、价格昂贵,已有许多报道对虫草素的合成进行了研究.本文对这一领域的研究进展进行综述,以期为相关研究提供有价值的参考.     

蛹虫草超氧化物歧化酶理化性质的研究

超氧化物歧化酶[Superoxide d ismutase,SOD,(EC.1.15.1.1)]是广泛存在于生物体内的超氧阴离子自由基(·O2-)的天然清除剂,在机体保护方面起重要作用。在对SOD进行的一系列研究中,发现SOD的存在与生物体抗衰老、抗肿瘤、营养状况、免疫性疾病、炎症及辐射防护[1]有关。许多动植     

HPLC-ELSD法测定蛹虫草中6种游离氨基酸的含量

建立了反相高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)直接测定6种未衍生游离氨基酸(脯氨酸Pro、缬氨酸Val、蛋氨酸Met、异亮氨酸Ile、亮氨酸Leu、苯丙氨酸Phe)含量的分析方法。采用VenusilMP-C18色谱柱,以甲醇和水为流动相进行线性梯度洗脱,流速为0.8mL·min-1,漂移管温度40℃,氮气流速2.5L·min-1;优化了流动相的洗脱条件。结果表明,在优化实验条件下,6种氨基酸峰面积的对数值与氨基酸质量浓度的对数值呈良好线性,检出限为10.0¹5.0mg·mL-1,方法精密度及稳定性良好。采用该法对微波法提取的蛹虫草子实体中的氨基酸进行测定,待检蛹虫草样本中不含缬氨酸(Val),其余5种氨基酸的总量为16.00mg/g,约占蛹虫草总质量的1.60%,其中脯氨酸(Pro)(占0.72%)和苯氨酸(Phe)(占0.56%)的含量较高。已检出的5种Pro、Met、Ile、Leu、Phe含量分别为7.20、0.88、0.69、1.65、5.58mg/g。     

三磷酸腺苷生物发光法快速测定食品中细菌的含量

建立了测定食品中细菌三磷酸腺苷(ATP)的生物发光分析方法.生物发光原理基于萤光素酶、虫萤光素、氧气、ATP和Mg2+的催化氧化反应.产生的光信号强度与ATP含量成一定关系.考察了各种物理化学参数对反应的影响.反应体系最优化条件:pH 7.4、牛血清白蛋白(BSA)浓度为1.0 g/L和室温反应.方法检出限为1.0×10-12mol/L,线性范围1.0×10-9～1.0×10-11mol/L,分析时间30 min,批内变异和批间变异分别小于4%和5%.研究了部分食品中细菌检测的样品前处理方法,应用于糕点和饮料样品中细菌的测定,加标回收率范围为82.1%～115%.检测结果与传统培养方法检测结果相关性良好.     

蛹虫草中硒的赋存形态及蛋白硒分析

为研究蛹虫草中硒的赋存形态,并进一步探究蛹虫草硒蛋白组分中硒含量的分布,以蛹虫草子实体为研究对象,用DAN荧光法测定了硒含量,用连续提取法进行了蛋白硒分析。结果表明,蛹虫草最高硒含量为89.486mg·kg-1,有机硒占85.96%;蛹虫草中蛋白硒、多糖硒和核酸硒分别占有机硒的71.4%~77.1%、19.7%~32.3%和0.138%~2.727%;在硒蛋白组分中虫草盐溶性蛋白、水溶性蛋白、醇溶性蛋白和碱溶性蛋白结合硒分别占总蛋白硒的55.13%~56.80%、20.47%~24.60%、15.30%~16.49%和2.99%~3.35%。蛹虫草具有很强的富硒能力;在蛹虫草子实体中,有机硒主要与蛋白质、多糖、核酸等生物大分子结合,其中蛋白质结合硒是硒的主要赋存形态;在蛋白质组分中,又以盐溶性蛋白质结合硒量最多。     

富硒蛹虫草试样中硒的形态分析

本文采用连续浸提法研究了富硒蛹虫草中硒的赋存形态。结果表明,碱溶态>盐溶态>水溶态>醇溶态>残渣态。可见,碱浸取是获取植物蛋白的有效途径,在富硒蛹虫草试样中硒主要以硒蛋白的形式存在。     

高效液相色谱法测定地顶孢霉培养物中的腺苷

建立测定虫草源饲料添加剂地顶孢霉培养物中腺苷含量的高效液相色谱方法。样品经过研碎、超声处理,离心、过滤后上机测定。腺苷的最佳提取条件:以超纯水为浸提液,用超声波浸提,浸提温度为40℃,浸提时间为55 min。使用Waters Spherisorb ODS2柱(150 mm×3.9 mm,5μm),以甲醇-0.01 mol/L磷酸二氢钾混合液(10∶90)为流动相,流量为1.0 mL/min,进样体积为20μL,检测波长为254 nm。腺苷的质量浓度在0.5~100μg/mL范围内与色谱峰面积成良好的线性关系,相关系数为0.9990。样品测定结果的相对标准偏差为1.65%(n=6),3水平加标的平均回收率为98.19%。该方法简便、快捷,可准确测定虫草饲料添加剂地顶孢霉培养物中腺苷的含量。     

新型微填充柱－毛细管柱二维色谱系统过程的动力学研究

从色谱动力学角度对新型微填充柱－毛细管柱二维色谱系统过程中双柱条件与流出曲线及柱效之间的依赖关系加以系统研究。结果表明：由于双柱条件之间存在关联，双柱系统流出曲线特征与单柱系统存在一定的差异，流出曲线一阶矩和二、三阶中心矩以及双柱系统的柱效皆由预柱和主柱条件综合确定。     

宽口径填充毛细管液相色谱柱柱尾结构的改进

 设计并评价了尾锥形填充毛细管液相色谱柱,与粘结型柱尾比较,前者柱效高且van Deemter曲线高流速部分的流速-柱效关系明显改善。在折合流速为10～15时,前者的柱效比后者高出30%～50%。谱带的抛物线状的流形在尾锥形柱内得到改善,使色谱峰的对称性有明显提高。比较了两种结构的色谱柱在芳烃快速分析中的分离效果,结果是尾锥形柱的分离性能优于粘结型柱。     

硅胶整体柱的制备及对苯取代物的分离

研究了一种制备硅胶整体柱的新方法。该工艺以四甲氧基硅烷和聚乙二醇为原料,采用改进的溶胶—凝胶技术,建立了消除柱体开裂和变形弯曲的方法及中孔的构建方法,考察了流速对柱压降的影响,并在正相色谱模式下应用制备的硅胶整体柱对苯取代化合物进行了分离。结果表明采用新工艺所制备的硅胶整体柱不开裂,不变形,并具有通孔和中孔双孔结构,渗透性强,柱压降低,机械强度高,柱效高等特点。这些特性尤其适合化合物的高效快速分离。     

半制备型柱与饼性能的比较

 通过比较具有相同柱几何体积的半制备柱和饼的性能 ,发现在同样的条件下 ,用液相方法分离生物大分子时 ,在分离效率和蛋白活性回收方面 ,饼和柱的差异不大 ;由于饼中的填料较柱中的装填更为紧密和均匀 ,当流动相流速增加时 ,饼不仅反向压力上升慢 ,而且质量和体积负载也比柱高。该结果表明使用饼的分离不仅具有可与高效液相 (HPLC)媲美的分离效率 ,而且还具有中、低压分离的高柱负载 ,这有利于蛋白保持高的生物活性 ,为饼的工业化应用奠定了基础。     

台锥形柱尾的填充毛细管液相色谱柱

首次将台锥形柱尾用于填充毛细管液相色谱柱,并与环氧胶粘的柱尾连接方式进行比较,发现在柱内径≥０．３２ｍｍ时,前者的柱效比后者高出３０％～５０％,且明显改善柱效－流速特性。对比研究了不同内径柱（０．５３ｍｍ,０．３２ｍｍ,０．２５ｍｍ）采用两种尾接方式的塔板高度与流速的关系,对产生差异的原因进行了探讨。     

不锈钢宽口径填充毛细管液相色谱柱的制备及评价

设计了一种零死体积的柱尾连接方式和一种能使匀浆填料均匀进入色谱柱管内的锥形储料池。详述了以反相 ＯＤＳ为固定相,制备高效稳定的不锈钢宽口径（０．８ ｍｍＩ．Ｄ．）填充毛细管液相色谱柱的方法。系统地考察了填装方向、加压溶剂、匀浆溶剂、匀浆浓度和填装压力等不同因素对柱效的影响。在４０ＭＰａ压强和优化条件下,可重复制得柱效达理论塔板数为７．５×１０４／ｍ。对所测试的样品,色谱峰不对称因子为１．０３～１．１０。     

不锈钢宽口径填充毛细管液相色谱柱

 设计了一种零死体积的二通式柱尾结构和一种使匀浆填料均匀进入色谱柱管内的储料池 ,研究了制备内径在 0 5mm～ 1 0mm的不锈钢宽口径填充毛细管液相色谱柱的方法。详述了以不同牌号、规格的反相ODS类固定相制备的不同柱长的色谱柱的性能。通过折合板高 /折合流速关系和不对称因子对柱性能进行了评价 ,结果表明 ,该方法制备的色谱柱柱效达到理论值的 75 %以上、RSD为 6% ,稳定性也很好。将其应用于抗癫痫药物和氯苯类化合物的分析 ,结果令人满意。     

金属-有机骨架材料在色谱分离中的应用

金属-有机骨架材料（Metal-organic frameworks,MOFs）,因其具有较好的热稳定性、化学稳定性、可设计性等特点,广泛应用于气体吸附、物质分离、提纯、催化等领域,同时也作为模板制备各种功能材料.MOFs作为色谱分离的材料已得到了较多的研究与应用.按照被分离物质的类别,综述和总结了不同MOFs材料作为色谱固定相的分离效果,重点介绍了MOFs材料的色谱分离机理.MOFs材料的孔径、功能基团和不饱和金属位点在分离中起到重要的作用,最后对MOFs在色谱分离应用中的问题和前景进行了分析和展望.