曼氏无针乌贼墨囊蛋白质提取及双向电泳条件优化

应用TCA/丙酮沉淀法、裂解液法、裂解液-超速离心法以及层析法4种蛋白质样品制备方法,比较了曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)墨囊蛋白质双向电泳的样品制备效果.在此基础上,比较了不同样品处理方法、不同胶条范围以及不同上样量等对电泳结果的影响,筛选出一套较优的分离墨囊蛋白质的双向电泳条件.研究结果表明:TCA/丙酮沉淀法较适合曼氏无针乌贼墨囊蛋白质双向电泳的样品制备.该方法制备的曼氏无针乌贼墨囊蛋白质样品经双向电泳分离,用固相pH 5~8梯度胶条进行等点聚焦,上样量300μg,电泳结束后硝酸银染色,最终获得了分辨率高、重复性好的双向电泳图谱.经过初步图像分析,检测到(389±19)个蛋白点,背景清晰且蛋白质得率较高.     

褪黑素和芦丁抑制蛋白质硝基化的比较研究

以牛血清白蛋白为硝化底物、过氧亚硝酸为硝化试剂,研究了褪黑素和芦丁对蛋白质硝基化的抑制作用.通过对硝基化反应各种影响因素的探讨,发现在37℃,pH 7.2,反应时间90 min以及过氧亚硝酸浓度为6.0×10~(-4)mol/L时,硝基化反应进行最完全.实验分别在硝基化反应进行前、进行中以及反应后,在硝基化反应体系中引入不同浓度的抑制剂褪黑素和芦丁.结果显示,在硝基化反应发生前加入抑制剂,抑制硝基化反应的效果最为明显;当褪黑素和芦丁的终浓度为5.0×10~(-5) mol/L时,抑制率分别达到80.7%和52.4%;若继续增加褪黑素,抑制率几乎不再变化,继续增加芦丁,抑制率小幅上升后开始呈下降趋势.总的来说,褪黑素抑制蛋白质硝基化的效果明显好于同浓度的芦丁.     

壳聚糖对番茄叶霉病菌的抑制作用

以番茄叶霉病菌为实验菌种,用含毒介质法系统研究了壳聚糖的脱乙酰度、分子量、浓度、环境pH值及溶剂等因素对壳聚糖抑菌活性的影响.结果表明,壳聚糖对番茄叶霉病菌具有明显抑制作用;在研究范围内,随浓度的增加和环境pH值降低,抑菌活性增强;较理想的溶剂是乳酸和醋酸;脱乙酰度为86%、分子量为213×103的壳聚糖抑菌效果较好;0.2%的壳聚糖与三唑酮等农药抑菌效果相同.     

液培法研究二个大豆品种对酸铝的效应

在液体培养过程中,不同 pH( 3. 5～ 6. 0)和 Al3+浓度( 0～ 40μ m)对二个大豆品种浙春 3 号和浙春 2 号 幼苗生长及根尖细胞蛋白质合成有明显的影响, 并且二个品种间存在差异. pH>4. 5 是二个品种幼苗适 宜的生长环境; pH<4. 0 明显抑制其生长.在 pH4. 3的条件下二个品种均有较强的耐铝性.总的来看, 浙 春 2号的耐酸铝性强于浙春3 号.根尖细胞蛋白质 PAGE分析表明,浙春 2号经100μ mAl3+～ 400μ mAl3+ 处理 144h 后, Rf 0. 75 带蛋白质表达受抑制.     

鄱阳湖流域沉积物中有机氯农药的残留特征及风险评估

采用GC/ECD分析了鄱阳湖流域沉积物中有机氯农药的残留特征及生态风险,结果表明:所测样品中有机氯农药浓度范围为1.22～32.19 ng/g,其中,六六六(HCHs)、滴滴涕(DDTs)、六氯苯(HCB)在几乎所有采样点都有检出,含量分别是未检出～12.95 ng/g、0.75～12.57ng/g、未检出～10.8.所测样品中大部分W_(DDT)/(W_(DDE)+W_(DDD))>1,表明有新的DDT输入,HCHs主要为长时间降解后的农药残留.鄱阳湖流域沉积物中DDT、DDD和DDE含量绝大部分小于风险评估中值(ERM),但接近一半介于风险评估低值(ERL)和ERM之间,而且有一个点大于ERM,表明其生态风险大多介于10%～50%,但有一个点的生态风险大于50%.     

HPLC-MS/MS技术在中华绒螯蟹硝基呋喃类代谢物残留量检测中的应用

建立了中华绒螯蟹中硝基呋喃类代谢物残留量的液相色谱-串联质谱检测方法.取均质后的中华绒螯蟹可食部分样品,用盐酸水解组织中蛋白结合代谢物,经2-硝基苯甲醛37℃过夜衍生化,调节pH值至约7.0～7.4后,用乙酸乙酯提取,正己烷净化.选用电喷雾离子源,在正离子、多反应监测方式模式下进行定性,以同位素内标法进行定量.方法的检出限为0.5 μg·kg-1,工作曲线的线性范围为1.25～50.0 μg·L-1.在添加浓度为0.5～10.0 μg·kg-1的范围内,AMOZ、SEM、AHD和AOZ的回收率分别在92.8%～106%、84.5%～94.6%、80.6%～98.6%和88.4%～105%之间,相对标准偏差均小于10%.     

一株氨氧化菌的分离鉴定及其活性影响因子分析

从浙江舟山南美白对虾养殖池塘底泥样品中筛选到一株具有氨氧化功能的细菌,命名为AOB-1.菌株AOB-1好氧,革兰氏阴性,球状至短杆状;菌落呈淡黄色、干燥、针尖状.16S rDNA序列分析表明,该菌株与Nitrosomonas eutropha C91T的相似性为100%.氨氧化的关键酶--氨单加氧酶的基因（amoA）序列比对表明,该菌株与N.eutropha C91T的相似性为98%.在30℃,100r·min-1时,25～200mL培养基装量范围内装液量越少氨氧化率越高,最适pH值为8.氨氮浓度在1～200mg·L-1范围内,氨氧化速率随氨浓度的升高而加快;在200～1200mg·L-1范围内,氨氧化速率基本保持不变;但当氨氮浓度高达2000mg·L-1时,氨氧化活性受到明显抑制.菌株AOB-1不仅对养殖水体,而且对高浓度氨氮废水的处理也具有潜在的应用价值.     

不同形貌纳米氧化锌的合成及其抗菌活性

采用微波超声波组合法合成了3个不同形貌的纳米氧化锌样品,对样品的组成及形貌进行了表征,并测定了所合成3个样品对金黄色葡萄球菌(S.aureus)的抑菌活性.结果表明,所合成的3个样品分别为高纯度的花状多级结构(样品1)、纺锤状结构(样品2)及均一的棱柱状结构(样品3)纳米氧化锌.在紫外光照射后样品均具有明显抗菌活性,3个样品的抑菌活性由大到小的顺序为:棱柱状,花状,纺锤状.其中,棱柱状纳米氧化锌在浓度为3g/L时的抑菌圈为15.3mm,在浓度为0.1g/L时的抑菌率可达89.74%.     

藏药"西藏猫乳"的色谱指纹谱研究

用75%乙醇回流法提取出藏药"西藏猫乳(生等)"的有效成分并浓缩精制后,采用HPLC梯度洗脱法,在选定的色谱条件{DuPont ZORBAX ODS C18色谱柱(4.6 mm×25 cm),用甲醇(A)-甲酸铵水溶液(pH=3.5,1.0 mL·min-1,B)进行梯度洗脱(甲醇浓度0～10 min,20%～25%;10～20 min,25%～40%;20～55 min,40%～55%;55～75 min,55%～75%;75～85 min,75%～90%),检测波长为290 am}下,对藏药"生等"的提取液进行了有效的分离与检测,并建立了"生等"药材的数字化色谱指纹谱(DFPS).所建立的方法能对藏药的产地归属进行有效的分辨.     

微分脉冲伏安法测定药物中盐酸去氧肾上腺素的含量

应用微分脉冲伏安法研究了盐酸去氧肾上腺素在玻碳电极上的电化学行为及其测定方法.在pH 9.62的Britton-Robinson缓冲液中,盐酸去氧肾上腺素在E=350 mV处具有良好的电化学氧化峰,线性范围为O.1～1懈·mL-1,检出限为0.033μg·mL-1,利用该方法对针剂样品中的盐酸去氧肾上腺素进行直接测定.获得了较好的定量分析结果.     

固定化微生物在降解含油污水中的应用

通过活性炭吸附前后菌液浓度的变化测定了活性炭在25℃时对石油烃降解菌(W-2)的动态吸附量.考察了不同的固定化方法、交联剂的pH和包埋菌的量对固定化微球的物理性质和降解效果的影响.实验结果表明,直接包埋法优于先吸附后包埋固定法,在25℃交联24h时,最佳固定化条件为:交联剂溶液的pH值为5～6,包埋菌液与凝胶剂溶液体积比为1∶5,而且,包埋无机盐离子能加快固定化W-2恢复活性,并利用扫描电镜观察降解前后微球的表面结构.在含油量为300mg/L的无机盐培养基中,游离W-2适应的pH范围为7～8、盐度为3%左右,固定化W-2适应的pH范围为6～9、盐度范围为2%～5%,比游离W-2的适应范围变宽;游离W-2降解率最高达到40%左右,固定化W-2能达到70%以上,原油降解率提高了30%以上.     

海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠生物微胶囊的制备

采用两步法制备了海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(ACA)生物微胶囊,并考察了氯化钙浓度、海藻酸钠浓度、壳聚糖浓度及其pH值以及柠檬酸钠溶液pH值对微胶囊性能的影响.实验结果表明:胶囊粒径随氯化钙浓度和海藻酸钠浓度的增加而增大,胶囊的膜厚随壳聚糖浓度的增加而增厚,随壳聚糖溶液pH值的增加而降低;而在胶囊液化处理过程中,柠檬酸钠溶液的pH值对微胶囊的机械强度有很大的影响.当氯化钙浓度为1.5%,海藻酸钠浓度为2%,壳聚糖浓度和pH值分别为1.5%和5.0及柠檬酸钠溶液的pH值为7.2时,可制得粒径为2.65mm、机械强度为150mN的ACA生物微胶囊.     

不同复性条件对重组人组织纤溶酶原激活剂复性的影响

大肠杆菌生产菌株诱导表达产生的无活性重组人组织纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)包涵体蛋白,溶解于尿素中变性后进行复性.通过单因子试验和正交试验考察了不同复性条件下透析复性对tPA包涵体蛋白复性效率的影响.结果表明蛋白质浓度、复性温度、pH值、复性介质、还原剂浓度对tPA的复性效果都有不同程度的影响,当0.5 g/L tPA包涵体蛋白溶解于pH 9.5的7 mol/L的尿素,加入5 mmol/L β-巯基乙醇,在20 ℃、pH 8.0的双蒸水条件下复性时,可以取得最高的复性效率(2.0×107IU/g).通过对稀释复性、透析复性和凝胶过滤层析复性3种方法比较,建立了适宜工业化生产tPA的复性方法.     

用EDXRF法对新疆和田玉进行元素分析

本文利用能量色散X射线荧光分析(Energy dispersive x-ray fluorescence:EDXRF)方法对产于和田的三种常见玉料进行了无损定性、半定量元素分析.结果表明,三种和田玉样品中都有含量较多的Mg,Ca,Si,O等元素以及微量的Al,K,Mn,S,Zn,Fe,Cu等元素.其中样品质量高、油脂性好的白玉和羊脂玉所包含的碳元素浓度较高,分别为24.545%和54.216%,而青玉中没有检测到碳元素.因此和田玉中碳元素的含量也许可以成为鉴别和田玉产品质量的一个标志性参数,对确定软玉的种类具有较好的参考意义.     

微波消解-塞曼石墨炉原子吸收光谱法检测贝类中的铬

建立了分析贝类样品中铬含量的微波消解-塞曼石墨炉原子吸收光谱法,并对样品前处理方法和检测条件进行探讨.实验结果表明,利用微波消解进行前处理的样品溶样均匀,样品消解完全.石墨炉铬工作曲线浓度范围设定在0.00~15.00μg·L-1之间时,铬浓度与其吸光值呈良好的曲线关系,得出的新合理一元二次方程相关系数r=1.0000.同时对3种贝类样品进行平行测定和加标回收率测定,平行性好,加标回收率保持在82%~95%.并利用国家标准物质海带和贻贝成份分析标准物质进行质量控制,得到的测定值在标准证书的允许误差范围内,相对标准偏差分别为2.93%和2.54%.表明该方法具有操作简便、灵敏度高、准确可靠等优点,适合贝类等水产品中铬含量的检测.     

CdSeS合金量子点在阿霉素定量分析中的应用

以巯基丙酸为稳定剂和硫源,采用水热法制备了CdSeS合金量子点,并将其应用于阿霉素(DOX)的定量分析.结果表明,DOX对CdSeS合金量子点有荧光猝灭作用,DOX分析的线性范围及检出限与CdSeS的浓度有关.在pH值为7.5的Tris-HCl缓冲溶液中,量子点浓度(以Cd2+计)为0.1,0.3,0.5 mmol·L-1时,对应的DOX分析线性范围分别为0.029~12,0.032~20,0.037~40mg·L-1,检出限分别为8.9,9.6,11.2μg·L-1.一定量的Cu2+和Fe3+会干扰DOX的测定.去除干扰物质后,对实际水样品进行分析,加标回收率为99%~102%,相对标准偏差小于1.4%.     

基于分子印迹-量子点荧光材料的双酚A检测技术研究

利用分子印迹聚合物的高选择性和量子点的优良荧光特性,制备获得了对双酚A(BisphenolA,BPA)具有特异荧光响应的分子印迹-量子点纳米结构聚合物(MIP-QDs),并应用于痕量BPA的测定.采用扫描电镜、红外光谱、选择性分析等对获得的MIP-QDs特征进行分析,表明其对BPA具有较高的选择性响应.在此基础上获得的MIP-QDs最佳反应体系如下:水:乙醇=6:4 (V/V)、pH为5.0、Na Cl质量浓度3.5%.在最佳条件下, MIP-QDs在0.002～10.0 mg·L~(-1)时,抑制剂浓度与(F——0-F)/F之间具有较好的线性关系,相关系数为0.998 3,LOD为0.75μg·L~(-1).在添加质量浓度分别为0.002,0.1,2.0 mg·L~(-1)时,回收率为96.8%～102.8%,相对标准偏差(RSD)低于7.4%.结果表明,获得的MIP-QDs对BPA具有较好的选择性荧光抑制性能.     

植物蛋白质双向电泳及其考马斯亮兰—银染复合染色法

在样品制备、凝胶电泳及染色方法等方面,对植物蛋白质双向电泳技术进行了系统的改进,重点发展了一处适合于蛋白质电泳凝胶染以的考马斯亮兰－银染复合染色法。这染色方法兼具考马斯亮兰染色法和银染色法的优点,灵敏度高、重复性好,可明显地提高蛋白质凝胶电泳的分辨率。     

乌鲁木齐市南山地区雾水总离子变化规律及常量阴离子化学表征的研究

本文通过对2003年至2005年间在乌鲁木齐市南山地区采集的23个雾水样品和2005年采集的7个雨水样品进行了分析和研究.讨论了雾水总离子浓度随季节的变化情况,SO2-4、NO-3浓度与pH之间的关系以及硝酸离子的浓度与硫酸离子浓度的相关性关系.     

芯片胶束毛细管电动色谱分离荧光素异硫氰酸酯衍生的氨基酸

研究了用芯片毛细管电泳-激光诱导荧光检测系统分离多种荧光素异硫氰酸酯(FITC)衍生氨基酸的实验条件.通过实验优化了夹流式进样的电压条件.采用以乙醇作有机添加剂的胶束毛细管电动色谱分离体系(50mmol/L SDS,15% 乙醇,5 mmol/L pH9.2的硼砂缓冲液),在72 mm长的通道上实现了10种常见氨基酸的分离,一次分离的时间小于5 min.