毛细管电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离DN …

本文报道了毛细电泳聚乙烯吡咯烷酮与羟乙基纤维素混配无胶筛分介质分离较短的ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）－ＨａｅⅢＤＢＡ片段（ＤＮＡ长度为１８～６７５ｂｐ）。研究表明,在１％的羟乙基纤维素无胶筛分介质中,加入２％的聚乙烯吡咯迷酮能显著提高ＤＮＡ片段的分辨率和分离效率。在混配无胶筛分介质中,聚乙烯吡咯烷酮有两种作用,一是动态涂渍,降低毛细管内壁对ＤＮＡ片段与ＤＮＡ荧光插入试剂的吸附,改善分离效率;二是两种不同长     

羟乙基纤维素及蔗糖无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段

提出以羟乙基纤维素、蔗糖和硼酸形成“互穿网络”无胶筛分介质，显著地提高了分离效率，分离了φＸ１７４／ＨａｅⅢＤＮＡ的所有１１个ＤＮＡ片段，探讨了“互穿网络”无胶筛分机理。将该方法应有和于决定鳝鱼性别基因ＰＣＲ扩增产物的分离与鉴定，结果较好。     

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的.使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质.本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等.     

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质(缠结溶液和稀溶液)中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。     

毛细管电泳无胶筛分介质分离DNA的机理

快速、高效而灵敏的分离技术对于DNA的分析是至关重要的。使用无胶筛分介质的毛细管电泳是最重要的DNA分离技术之一,通常使用无交联的高分子溶液作为无胶筛分介质。本文在介绍高分子溶液理论的基础上,综述了DNA在毛细管电泳无胶筛分介质（缠结溶液和稀溶液）中的分离机理,主要包括Ogston筛分模型、各种修正的爬行模型、瞬态缠结偶合机理及其改进机理等。     

无胶筛分毛细管电泳分离盐生盐杆菌DNA片段

 由羟乙基纤维素和聚吡咯烷酮混合组成筛分介质 ,在涂敷聚硅氧烷的毛细管柱上 ,研究了LambdaDNA/EcoRⅠ +HindⅢ片段分离的最佳条件。实验表明 ,混合筛分介质与单一的羟乙基纤维素筛分介质相比 ,改变了筛分介质的孔径大小 ,抑制了毛细管壁对DNA的吸附 ,从而改善了分离 ,并首次在同一条件下将所含的 13个片段完全分离。方法简便、快速 ,曾应用于两组盐生盐杆菌DNA片段的分离及其碱基对数目的推测。     

羟乙基纤维素中毛细管电泳DNA分离特性研究

本实验以羟乙基纤维素(HEC)为筛分介质,以100～1500 bp DNA ladder为分离对象,系统地研究了直流电场下毛细管电泳时DNA分离特性.论文考察了DNA迁移淌度及分离度随HEC溶液浓度和分子量、毛细管两端电场强度(E)、毛细管有效长度(le)及其内径形状、背景电解液(BGE)温度等因素变化规律.研究发现:(1)当筛分介质HEC浓度高于其阈值浓度c*时,HEC分子量越大,相邻DNA片段之间淌度差越大,HEC浓度越高,其迁移淌度越低;(2)对于相邻的DNA片段,le在一定范围内,其分离度随le增大而线性升高;(3)毛细管有效长度一定时,DNA淌度随毛细管侧面积与截面积之比R增大而升高,分离效率提高;(4)BGE温度升高,DNA在筛分介质中扩散效应增强,迁移淌度变大,相邻DNA片段间分离度减小.根据以上结论,在直流电场下毛细管电泳φ×174-Hirc II限制性酶切片段,并实现了其高分离度、快速分离.     

基于纤维素衍生物的毛细管无胶筛分电泳及其应用

毛细管无胶筛分电泳近年来取得了很大进展。本文综述了以纤维素衍生物作为筛分介质的毛细管无胶筛分电泳的研究进展,包括筛分理论,筛分体系模式,以及它在DNA、蛋白质分离方面的应用。     

毛细管无胶筛分电泳中一种DNA定量分离模型的优化讨论

对已建立的交缠聚合物溶液中DNA定量分离模型的影响因素,如DNA尺寸、电场强度、聚合物性质及聚合物质量浓度等进行了讨论,并就该模型对聚合物介质选择的指导性进行评价.实验证明,DNA链越长,电泳迁移的时间越长;聚合物相对分子质量越高,越利于长链DNA的分离;筛分聚合物质量浓度越高,DNA分离时所需的迁移时间越长;快速分离要求使用较大的场强,而基于对大片段DNA的有效分离则应限制高场强的使用.该模型还可用于计算DNA分离的最佳聚合物质量浓度,结果表明高质量浓度聚合物有利于DNA的筛分.以上实验结果和模型预测的结论一致,对DNA电泳分离模型的研究有较大的促进作用,对毛细管无胶筛分电泳实验参数的选择和优化具有一定的指导意义.     

聚环氧乙烷无胶筛分毛细管电泳分离宽分子量范围DNA片段

在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱（31.2 cm×75 μm有效长度21.0 cm）分离DL5000 DNA Marker（DNA长度为100~5000 bp）,研究筛分介质浓度、缓冲液pH、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链DNA片段的影响,优化出分离100~5000 bp DNA片段的最佳条件。毛细管电泳的最佳条件为PEO浓度0.5%、缓冲液pH值8.0、电压12 kV、溴化乙锭浓度3.0 μg/mL。此条件下,对山梨醇脱氢酶基因（SDH）和乙烯受体基因（ETR1）的聚合酶链式反应（PCR）扩增产物同时检测,分离、鉴定效果良好。     

聚N-异丙基丙烯酰胺无胶筛分毛细管电泳分离DNA片段

采用0．5％～6％聚N-异丙基丙烯酰胺作为筛分介质,对ФX174／Hae Ⅲ酶切DNA片段毛细管电泳分离进行了研究,结果表明其筛分效果差,信噪比低。然而,添加适量甘露醇可以显著改善分离效率。在3％聚N-异丙基丙烯酰胺中添加2％～6％甘露醇可以取得较好的分离结果,并对甘露醇改善筛分能力的机制进行了探讨。     

用未涂敷毛细管电泳分离DNA片段

用内壁未涂敷毛细管，以羟乙基纤维素的无胶筛分介质，在６ｍｉｎ内分离了λＤＮＡ／ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ片段，探讨了ＤＮＡ片段在未涂敷毛细管中的分离机理，讨论了羟乙基纤维素和缓冲溶液浓度及电压对分离的影响，考察了ＤＮＡ片段迁移时间的重现性。     

样品稀释对毛细管电泳分离检测DNA片段的影响

通过理论推导和实验验证表明;适当稀释DNA样品溶液,采用流体力学进样或电动进样都不会较大地减低峰高,而DNA片段毛细管电泳的分离效率和分离度还能有所提高。采用稀释样品的方法可提高DNA样品的使用效率。采用羟乙基纤维素无胶筛分介质分离了DNA片段。用激光诱导荧光（氩离子激光器,488nm）电荷耦合器件检测。用低浓度的筛分介质（0．4％）分离了分子质量较大的ADNA－HindⅢ全部8个片段（12bp～23130bP）。用高浓度的筛分介质（1．6％）分离分子质量较小的pBR322－HaeⅢ22个片段（18bp～587bp）。     

聚甲基丙烯酸甲酯微流控芯片分离DNA片段的初步研究

自从1995年Mathies^[1]首次将微流控芯片毛细管凝胶电泳用于基因测序研究以来,DNA片段的分离已成为微流控芯片应用的重要领域之一.最早应用于DNA分析的微流控芯片是玻璃芯片,聚合物微流控芯片以其品种多、成本低、易于加工,与玻璃芯片相比具有封接温度大大降低,微通道内电渗流显著减小等特点,已被成功应用于DNA片段的分离^[2,3].     

用于毛细管电泳分离DNA的聚合物介质的研究进展

综述了用于毛细管电泳分离DNA及测序的聚合物介质的研究进展。这类聚合物主要有均聚物、无规共聚物、嵌段共聚物、接枝共聚物、共混聚合物、准互穿聚合物网络和微交联纳米凝胶聚合物,并对各种结构的聚合物的筛分性能进行了比较。     

样品溶液基质对毛细管电泳分离的影响

用样品苯甲醇，苯甲醛和苯甲酸研究了样品溶液基质十二烷基硫酸钠，磷酸二氢钾－四硼酸钠和乙醇对毛细管电泳分离的影响。实验结果显示，随着样品溶液基质种类和浓度的变化，非离子型的苯甲醇和苯甲醛的毛细管电泳分离有相同的变化规律，离子型的苯甲酸有相反的变化规律。乙醇的添加导致了三个组份的区带扩张。     

用于毛细管电泳DNA分离的合成聚合物*

毛细管电泳的无胶筛分方法在DNA片段分离、DNA 测序方面取得了显著的成绩并已成功应用于人类基因组计划.该法是在毛细管柱中充入一定浓度和组成的线性高分子溶液,利用其对样品组分电泳迁移时的阻滞作用,按分子量大小对DNA等生物大分子进行筛分分离分析.因此,聚合物筛分介质的类型、组成和性质会显著影响分离效果.近年来,由于受到基因组计划的影响,出现了许多用于DNA片段分离和DNA测序的水溶性高分子聚合物,并取得很大进展.本文按照均聚物和共聚物的分类,综述了作为筛分介质的各种合成聚合物及其应用效果,并简要介绍了有关的筛分理论和分离的评价指标.     

毛细管电泳-激光诱导荧光法分离检测DNA片段及基因扩增产物

以羟丙甲基纤维素和非交联聚丙烯酰胺浴液为筛分介质,将毛细管电泳-激光诱导荧光法用于DNA片段及基因扩增产物的分离检测。探讨了非胶筛分介质中高分子化合物的浓度、电解质的浓度、内插试剂用量等对DNA片段分离检测的影响;考察了DNA片段迁移时间和峰面积的重现性及DNA片段定量检测的关系。建立了一种快速、灵敏的DNA片段及基因扩增产物分离检测方法。