丙肝电化学免疫传感器在血清检测中的应用

丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是丙肝的致病因子,该病毒自70年代发现以来,就一直困扰着人类。丙肝已成为近年来最为严重的传染病之一。目前临床诊断丙肝的主要方法有血清学非特异性检测[1]和特异性检测(酶联免疫分析方法、重组免疫印迹、聚合酶链反应[2]等)。血清学非特     

用于乙肝表面抗原检测的压电免疫传感器的研制

研制了一种用于乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）检测的新型传感器———石英压电免疫传感器。采用聚乙烯亚胺粘附和戊二醛交联法在金电极上固定抗体蛋白，对固定化过程进行了监测。ＨＢｓＡｇ含量的检测范围为１～４０ｍｇ／Ｌ。使用过的电极用０２ｍｏｌ／Ｌ乙醇胺（ｐＨ＝８）解吸，可重复使用。将此传感器用于实际血清样品的检测，与酶联免疫吸附法所得结果吻合。     

甲胎蛋白压电免疫传感器的研究

以合成的甲基丙烯酸甲酯和甲基丙烯酸羟乙酯共聚作载体，在压电石英晶体表面涂覆共聚物涂层，经ＣＮＢｒ活化后固定ＡＦＰ抗体，研制成ＡＦＰ压电晶体免疫传感器，研究了固定化方法，载体量，抗原抗体结合时间，重现性选择性等实验条件和参数的影响，压电晶体的频移值与ＡＦＰ浓度在１００ｎｇ／ｍＬ～８００ｎｇ／ｍＬ的范围内有良好的线性关系，将此传感器初步用于人体血清样品的测定，并与放射免疫法对照，结果令人满意。     

补体1q压电免疫传感器的研究

研制了一种可重复使用的压电免疫传感器用于检测被测体Ｃ１ｑ。比较了聚乙烯亚胺粘附，戊二醛交联法，物理吸附法以及蛋白Ａ法三种固定化抗体蛋白的方法。使用蛋白Ａ法，补体Ｃ１ｑ在所测浓度范围内有良好的线性关系。使用过的晶片用０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲溶液解吸，可重复使用４次。     

压电免疫传感器在梅毒检测中的研究

用巯基丙酸(MPA)为基层物质在压电石英晶体表面形成单分子膜,经过N-乙基-N′-(3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺盐酸(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS）活化后固定梅毒抗原TpAg,制成免疫传感器检测不同浓度的标准抗体溶液。并考察了传感器的响应特性和免疫反应动力学特性,结果表明这种免疫传感器是临床检测的有效工具,有巨大的应用潜力。     

压电免疫传感器用于B因子的测定

B因子是一种不耐热的球蛋白,它参与机体的防御,在炎症过程、细胞和组织损伤中均起重要作用.B因子的检测方法常用的有单扩散法、火箭电泳法和溶血法,前者灵敏度不高,重复性差;后两者操作较复杂^[1,2].     

压电免疫传感器用于B因子测定

B因子是一种不耐热的球蛋白,它参与机体的防御,在炎症的过程、细胞和组织损伤中均起重要作用。B因子的检测方法常用的有单扩散法、火箭电泳法和溶血法,前者灵敏度不高,重复性差;后两者操作较复合^[1,2].因此,寻找一种简单、快速、灵敏且可精确定量的检测方法在临床医学上很重要的价值。压电免疫传感器具有仪器装置简单、灵敏度高、能快速检测、无需标记、可精确定量等优点,已被广泛应用^[3]。聚乙烯亚胺粘附和戊二醛交联法常用于石英晶体电极上抗体的固定^[4]。本文采用这一方法固定B因子抗体,研制了一种新型的传感器,用于B因子的检测,并选用4种解吸剂研究了电极的可重复性。     

补体C1q压电免疫传感器的研究

研制了一种可重复使用的压电免疫传感器用于检测补体C1q.比较了聚乙烯亚胺粘附、戊二醛交联法,物理吸附法以及蛋白A法三种固定化抗体蛋白的方法.使用蛋白A法,补体C1q在所测浓度范围内有良好的线性关系.使用过的晶片用0.1 mol/L柠檬酸盐缓冲溶液(pH 3.0)解吸,可重复使用4次.     

插拔式压电肿瘤标志物微阵列免疫传感器的研制

以AT切型、基频10 MHz的金膜石英晶体作为换能器,通过螺旋检测池固定夹具构建一种新型插拔式压电石英晶体传感器,并组装成2×5型压电肿瘤标志物微阵列免疫传感器。研究了传感器的响应特性及参数。该微阵列传感器在甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)和人绒毛膜促性腺激素(hCG)质量浓度分别为20~640μg/L、1.56~50μg/L、1.25~50μg/L、2.5~250 mIU/mL的范围内,压电石英晶体振荡频率偏移值对肿瘤标志物浓度均呈现良好的响应特性。应用微阵列传感器测定68例临床血清标本,结果与化学发光免疫分析法符合(相关系数分别为0.92、0.90、0.91、0.94)。该压电肿瘤标志物传感器微阵列具有结构简单、操作方便、稳定性好、灵敏度和特异性高,不需标记,能实时检测和重复使用等优点,可用于临床实验诊断,具有临床推广应用价值。     

基于Nafion膜修饰的血吸虫抗体压电免疫传感器研究

将Nafion膜包埋血吸虫抗原固定在石英晶体微天平表面上，构制了用于测定血清中血吸虫抗体的压电免疫传感器。这种生物敏感膜由涂敷在石英晶片表面上的一滴Nafion＋血吸虫抗原磷酸盐缓冲液干燥而成，它的构制和再生过程具有良好的重现性。用扫描电镜观察了这种生物敏感膜的形貌，并对传感器的构制参数、测量条件进行了优化，优化的传感器埘血吸虫抗体的检测范围为0．2～6．0mg／L。本传感器具有仪器简单、操作方便、灵敏度高、重现性好等优点，可判断血吸虫感染情况。     

A Piezoelectric Immunosensor for the Detection of Cortisol

Abstract

A piezoelectric crystal immunosensor has been developed for the detection and determination of cortisol. Cortisol antibody was layered onto the gold electrodes of a 10 MHz piezoelectric crystal which was precoated with either protein A or gluteraldehyde. Crystals pre-coated with protein A showed the best results with respect to stability and sensitivity.

The sensor was successfully used for the determination of cortisol in standard solutions from 36–3628 μg/L (part per billion). The advantages of the proposed sensor include simplicity, short analysis time, cost effectiveness and selectivity. The results demonstrate the feasibility of cortisol assay in clinical testing and in drug monitoring.     

压电免疫传感器用于乙肝表面抗原的测定

乙肝表面抗原 ( HBs Ag)的检测是临床诊断乙型肝炎的一项重要指标 .目前常用酶联免疫法和放射免疫法检测 [1] ,但酶本身性质不稳定且价格昂贵、操作繁琐 ;而放射免疫法存在放射性废物难处理的局限性 .压电免疫传感器具有装置简单、价格便宜、灵敏度高、实时快速和无需标记等优点 ,广泛应用于环境监测、药物分析及微生物检测等多个领域 [2～ 4 ] .本文应用自组装单分子膜技术 ,在压电石英晶体表面形成致密有序的半胱胺单分子膜 ,通过戊二醛共价交联 ,将乙肝表面抗原单克隆抗体分子固定于晶体电极表面 ,研制成 HBs Ag压电免疫传感器 ,用于…     

压电胰岛素-C肽微阵列免疫传感器研究

以AT切型、基频10MHz的镀金膜石英晶体作为换能器,将抗人胰岛素和C肽单克隆抗体固定在石英晶体电极表面,用2×5检测池固定夹具构建一种新型压电胰岛素-C肽微阵列免疫传感器.研究了抗体固定方法、抗体工作浓度、固定量、一致性以及传感器的响应参数如检测温度、时间和特异性等的影响.该微阵列传感器在胰岛素浓度为2.5～160.0mIU/L、C肽浓度为0.375～12.0ng/mL范围内响应特性良好,压电晶体频率偏移值与胰岛素和C肽浓度呈良好的线性关系.将此微阵列传感器用于人血清标本的测定,结果与放射免疫法符合(r为0.92和0.94).此微阵列传感器具有灵敏度高、特异性好,低密度阵列结构,检测通量较高,不需标记,操作简单、能实时在线检测和重复使用等优点,能用于临床实验诊断,具有临床推广应用价值.     

Development of Piezoelectric Immunosensor for the Detection of Probiotic Bacteria

A Quartz Crystal Microbalance (QCM) based direct immunosensor was developed for real-time detection of probiotic bacteria. To optimize the immunosensor system, model measurements were carried out with bovine serum albumin (BSA) and anti-BSA IgG (a-BSA) antibody. During the model experiments, two kinds of self-assembled monolayers were created to compare their efficiency on antigen binding. Sulfosuccinimidyl 6-[3-(2-pyridyldithio)propionamido] hexanoate (sulfo-LC-SPDP) and 16-mercapto-hexadecanoic acid (MHDA) cross-linking agents were used for immobilizing anti-BSA antibody onto the gold surface of the AT-cut quartz wafer. Two different measuring procedures, flow-through and stopped-flow methods, were applied, and the frequency responses obtained by both analytical methods were compared.

After the model experiments probiotic bacteria, Bifidobacterium bifidum O1356 and Lactobacillus acidophilus O1132 serotypes were detected from buffer solution and from real samples (spiked milk samples, acidophilus, and bifidus milk samples).

Using the novel immunosensor, the target bacteria could be detected in the range of 10⁴–10⁷ colony-forming units (CFU)/ml within 60 minutes. The selectivity of a-Bifidobacterium bifidum and a-Lactobacillus acidophilus antibody coated sensors were also tested.     

用于液相中检测的压电免疫传感器研究

利用聚乙烯亚胺法,将Ｃ２型葡萄菌肠毒素（ＳＥ）抗体固化在未抛光的压电晶体的金电极上,利用双调式振荡电路制作的振荡器,构建压电免疫传感器,其稳定性,特异性都较好。