以四磺基铝酞菁-牛血清白蛋白为底物的荧光恢复均相法测定胃蛋白酶

酸性介质中,红区荧光探针四磺基铝酞菁(AlS4Pc)的荧光被白蛋白显著猝灭,加入胃蛋白酶后,体系荧光明显回复。基于此现象,建立了荧光恢复均相测定胃蛋白酶的新方法。考察了各种影响因素,在最佳实验条件(pH2.5、反应温度50℃、反应时间1h)下,本方法的线性范围为0.04～4mg/L,检出限为20μg/L。用本方法测定实际样品中胃蛋白酶,取得了满意的结果。     

耐尔蓝-十二烷基苯磺酸钠-蛋白质体系的荧光反应及其分析应用

研究了耐尔蓝-十二烷基苯磺酸钠体系的吸收光谱和荧光光谱特性，并以此体系建立了测定蛋白质的新型荧光探针。在优化实验条件下，对人血清白蛋白和γ-球蛋白测定的线性范围均为0．16mg/L，检出限分别为0．020mg/L和0．036mg/L。该方法用于人血清中总蛋白含量的测定，与临床测定结果相吻合。     

探针JDC-108测定生物样品中的蛋白质

在模拟人体生理条件下,基于JDC-108与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以JDC-108为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法。体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响。在20℃、Tris-HCl缓冲液(pH=7.40)及离子强度为0.1 mol/L的NaCl溶液中,体系的Δλ为20 nm的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在2.0~497 mg/L的浓度范围内呈良好的线性关系;检出限为0.76 mg/L(n=11)。本实验对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在97.7%~103.4%之间。实验结果表明:本方法具有简单、快速、灵敏度较高、线性范围宽、精密度和回收率较好等优点,可直接用于生物样品中蛋白质总量的测定,结果令人满意。     

以碲化镉量子点为荧光探针测定西红柿中残留吗啉胍

利用吗啉胍使CdTe量子点荧光增强的特性,建立了西红柿中吗啉胍残留量的检测新方法。研究了影响量子点荧光探针行为的因素,确定最佳工作条件:量子点浓度为1×10-4mol/L,pH=5.6,反应温度为20℃,反应时间为20 min。在最佳测定条件下,CdTe量子点荧光探针对吗啉胍响应的线性范围为1.0×10-12~5.0×10-10mol/L,检出限为5.2×10-13mol/L,线性相关系数R=0.9981,方法的回收率97%~106%,常见共存离子、抗生素、维生素等共存物质对吗啉胍的测定不产生干扰。本方法用于西红柿中吗啉胍残留量的测定,结果令人满意。     

灿烂甲酚蓝与表面活性剂的作用及其在蛋白质测定中的应用

对阳离子染料灿烂甲酚蓝 (BCB)在阴离子表面活性剂存在时的溶液的吸收光谱进行了研究。同时还研究了BCB在阴离子表面活性剂作用下形成的现场二聚体的荧光性能 ,并用其现场二聚体作为探针 ,首次用于蛋白质的测定 ,结果令人满意。用于牛血清白蛋白的测定 ,线性范围为 0～ 7mg/L ,检测限为 3.6 6× 10 -3mg/L。     

荧光聚多巴纳米粒子在血红蛋白检测中的应用

以多巴为原料,通过自聚反应一步法合成了形貌尺寸均匀的聚多巴纳米粒子,在酸性缓冲溶液中该材料发出强烈的绿色荧光并有良好的稳定性。基于血红蛋白对聚多巴纳米粒子的荧光猝灭现象,建立了快速、灵敏检测血红蛋白的荧光分析方法。在优化的条件下,检测血红蛋白的线性范围为0.065～5.9 mg/L和6.5～65 mg/L,检出限(S/N=3)为0.0098 mg/L,用于实际血样中血红蛋白的测定,回收率为94.6%～106.8%,相对标准偏差为2.48%～3.67%。本方法具有探针合成方法简便,反应条件温和,灵敏度高,选择性好的优点。     

近红外荧光探针天青A检测DNA

近红外荧光探针天青A(AZ)可与DNA结合,结合常数为K=5.90×105L/mol,结合位点数n=0.94碱基对。利用在pH=8.0的tris-HCl缓冲体系中,DNA浓度与天青A的荧光强度呈线性关系,在近红外区建立测定核酸的方法。其检测下限为0.064mg/L;线性范围为0.064~26mg/L(r=0.9942)。本方法具有测试简单、背景干扰小、灵敏度高等优点。     

碱性品红荧光法测定脱氧核糖核酸及其机理的研究

以三苯甲烷类阳离子染料碱性品红(RL)为荧光探针建立脱氧核糖核酸(DNA)的定量分析方法。在近中性范围内碱性品红与DNA有较强的结合,生成复合物的荧光强度与DNA的量呈线性上升关系;线性响应范围为0．05—33．0mg／L(r=0．9904),检出限39μg／L。方法用于样品中DNA含量的测定,取得满意的结果;对作用机理进行了探讨,认为RL与DNA相互作用存在插入结合形式。     

甲磺基铝酞菁与爱尔新蓝的缔合作用在核酸定量中的应用

阴离子荧光染料四磺基铝酞菁与阳离子荧光染料爱尔新蓝的缔合作用，使四磺基铝酞菁发生荧光猝灭，而当核酸存在时，染料缔合平衡受到影响而导致四磺基铝酞菁的荧光恢复。根据这一原理，建立了核酸定量测定的新方法。方法具有很高的灵敏度和较好的选择性，其线性范围为0-200цg/L；检测限分别为1.8цg/L(SMDNA)、2.0цg/L(CTDNA)、5.4цg/L（酵母RNA）。将方法用于实际样品金黄色葡萄球菌中DNA含量的测定，获得满意结果。     

杯[8]芳烃与铈形成的镧系超分子作荧光探针测定蛋白质

研究了Ce 杯 [8]芳烃 蛋白质体系的相互作用和荧光发光情况。实验结果表明 :Ce 可产生λex,max=2 5 4nm ,λem ,max=36 1nm的自身荧光。杯 [8]芳烃在一定条件下能猝灭其荧光 ,加入蛋白质后体系的荧光又进一步猝灭 ,故可利用杯 [8]芳烃 Ce 形成的镧系超分子作荧光探针测定蛋白质 ,同时 ,初步探讨了体系的相互作用机理。该实验方法的线性范围为 1 1～ 11.4mg/L ;检出限为 2 .83× 10 -3 mg/L。本方法简便、可靠、灵敏度高     

亚甲基蓝荧光猝灭法测定抗坏血酸

在稀H2SO4介质中,抗坏血酸与亚甲基蓝发生反应,使其荧光猝灭,建立了荧光光度法测定痕量抗坏血酸的新方法,用正交法确定最佳测定条件。方法的激发波长为660 nm,发射波长为694 nm,在最佳条件下该法测定抗坏血酸的线性范围为0.1~40 mg/L,检出限为0.23 mg/L。方法可用于药品、饮料、果蔬中抗坏血酸的测定。     

核壳纳米晶二硒化镉/硫化镉的合成及荧光法测定溶菌酶

以3-巯基丙酸为修饰剂,水相合成了具有发光效率高,光稳定性强等优良特性的CdSe2／CdS核壳纳米晶,粒径约为4nm,并将其成功用于溶菌酶的测定。在pH7．4的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲溶液中,以365nm激发,体系在642nm处的荧光强度与溶菌酶的浓度呈线性关系,线性响应范围为0．5～8．0mg／L和8.0～32mg／L;线性方程分别为△F=0．97 2．21C(mg/L)和△F=12．20 0．70C(mg／L);检出限为0．20mg／L。将该方法应用于样品的测定,结果令人满意。     

杯[8]芳烃与铈(Ⅲ)形成的镧系超分子作荧光探针测定蛋白质

研究了Ce(Ⅲ)-杯[8]芳烃-蛋白质体系的相互作用和荧光发光情况.实验结果表明:Ce(Ⅲ)可产生λex,max＝254nm,λem,max=361nm的自身荧光.杯[8]芳烃在一定条件下能猝灭其荧光,加入蛋白质后体系的荧光又进一步猝灭,故可利用杯[8]芳烃-Ce(Ⅲ)形成的镧系超分子作荧光探针测定蛋白质,同时,初步探讨了体系的相互作用机理.该实验方法的线性范围为1.1～11.4mg/L;检出限为2.83×10-3 mg/L.本方法简便、可靠、灵敏度高.     

新荧光增敏法测定人血清蛋白质

合成了新荧光试剂5-(4-羧基苯偶氮)-8-水杨醛缩氨基喹啉(p-CPSAQ),探讨了与人血清蛋白反应的最佳实验条件.在pH=7.0的缓冲体系中,蛋白质的存在使p-CPSAQ的荧光大大增强,据此建立了测定人血清蛋白质的灵敏方法;对人血清白蛋白和γ-球蛋白的线性范围分别为0.1～4.5 mg/L和 0.1～4.0 mg/L;检出限分别为0.028和0.027 mg/L.方法灵敏、快速、选择性好,用于人血清样品中总蛋白的测定,结果满意.     

CdTe/CdS@SiO_2@BPEI-CQDs双发射比率荧光探针的构建及在测定生物样品中Cu(Ⅱ)的应用

本文制备了对Cu(Ⅱ)具有选择性识别作用的Cd Te/Cd S@Si O_2@BPEI-CQDs双发射比率荧光探针。基于Cu(Ⅱ)能使探针表面的BPEI-CQDs荧光猝灭的现象,建立了测定Cu(Ⅱ)的比率荧光新方法。在最佳条件下,该方法测定Cu(Ⅱ)的线性范围为0.40~70μmol/L,检测限为0.27μmol/L。建立的方法已被成功用于人体尿液及血浆中Cu(Ⅱ)的测定。     

新荧光试剂5—（4—羧基苯偶氮）—8—水杨醛缩氨基喹啉荧光增敏法测定人血清蛋白质

合成了新荧光试剂5-(4-羧基苯偶氮)-8-水杨醛缩氨基喹啉(p-CPSAQ)，探讨了与人血清蛋白反应的最佳实验条件。在pH=7．0的缓冲体系中，蛋白质的存在使p-CPSAQ的荧光大大增强，据此建立了测定人血清蛋白质的灵敏方法；对人血清白蛋白和γ-球蛋白的线性范围分别为0．1—4．5mg／L和0．1—4．0mg／L；检出限分别为0．028和0．027mg／L。方法灵敏、快速、选择性好，用于人血清样品中总蛋白的测定，结果满意。     

四磺基铝酞菁与爱尔新蓝的缔合作用在核酸定量中的应用

阴离子荧光染料四磺基铝酞菁与阳离子荧光染料爱尔新蓝的缔合作用 ,使四磺基铝酞菁发生荧光猝灭 ,而当核酸存在时 ,染料缔合平衡受到影响而导致四磺基铝酞菁的荧光恢复。根据这一原理 ,建立了核酸定量测定的新方法。方法具有很高的灵敏度和较好的选择性 ,其线性范围为 0～ 2 0 0 μg/L ;检测限分别为 1.8μg/L(SMDNA)、2 .0 μg/L(CTDNA)、5 .4μg/L(酵母RNA)。将方法用于实际样品金黄色葡萄球菌中DNA含量的测定 ,获得满意结果     

以四硝基铝酞菁为荧光探针测定葡萄糖的荧光分析新方法

建立以四硝基铝酞菁为荧光探针测定葡萄糖的荧光分析新方法。方法基于四硝基铝酞菁苯环上的硝基与葡萄糖发生还原反应,形成铝酞菁的氨基化产物;氨基化铝酞菁具有红区激发和发射的特性,在强酸性介质中可发射较强荧光;体系的荧光强度和葡萄糖的含量呈良好的线性关系,并具有较好的准确性和稳定性。方法用于测定发酵样品中的还原糖,结果满意。     

探针5-硝基水杨酸同步荧光法测定生物样品中蛋白质的应用研究

在模拟人体生理条件下,基于5-硝基水杨酸与人血清白蛋白(HSA)相互作用生成复合物,导致血清白蛋白的内源荧光产生特异性变化,而建立了以5-硝基水杨酸为分子探针,用固定波长同步荧光光谱分析测定蛋白质的新方法。体系同步荧光光谱特征及强度受Δλ、反应介质、反应温度等因素的影响。对上述实验条件进行了优化,结果表明,在最佳实验条件下,体系的同步荧光强度(ISF)与人血清白蛋白在2.21 ~ 469.2 mg/L 的浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为0.81 mg/L(n=11)。本实验对血清、尿样和唾液样品进行了测定,回收率在98.4% ~ 102.6 %之间。     

酪蛋白对双羧基1,8-萘酰亚胺荧光探针聚集诱导发光效应的光谱研究及分析应用

建立高效快速、操作简便、价格低廉的乳品真蛋白检测方法具有重要意义。本实验合成了具有双羧基官能团的水溶性1,8-萘酰亚胺荧光探针2,探针2对酪蛋白具有特异性发光效应,其机理是双羧基为前导嵌入基团插入酪蛋白胶团子域的疏水腔中,与色氨酸、酪氨酸等氨基酸残基以氢键及疏水作用相结合后使酪蛋白胶团结构收缩,萘酰亚胺荧光基元吸附于酪蛋白胶团表面呈现聚集诱导发光效应(Aggregation induced emission,AIE)。以300 nm为激发波长,一定范围内探针2在480 nm附近处发光强度与酪蛋白浓度成正比,在pH 5.5条件下建立了酪蛋白AIE定量分析方法;线性范围为0.1~9.5 mg/L,检出限(3σ)为2.9 mg/L,对不同浓度酪蛋白平行测定9次,相对标准偏差<3%;三聚氰胺、铵肥、尿素、乳清蛋白、血清蛋白、I型胶原蛋白及粗卵清蛋白等对于测定结果无显著影响(±5%),用于奶粉中总酪蛋白含量的测定结果与双缩脲法相一致。