天花粉蛋白一级结构的修正及不同产地天花粉蛋白的研究

胰蛋白酶酶解天花粉蛋白, 用高效液相色谱分离酶解肽段, 用顺序仪测定其有关肽段的顺序。用羧肽酶A, B, Y测定了天花粉蛋白C-端和天花粉蛋白溴化氰降解肽CB1的C-端顺序, 修正了我们1985年测定的天花粉蛋白一级结构, 证明天花粉蛋白由246(7)氨基酸残基所组成, 除C-端微观不均一外, 与Collins结果一致。同时比较了芜湖产天花粉蛋白一级结构与平湖产的天花粉蛋白一级结构, 没有发现两者的一级结构有差别。     

天花粉蛋白化学 Ⅳ.天花粉蛋白的基本一级结构

前文报道从我国民间用于引产的中草药天花粉中提取到活性组分结晶天花粉蛋白和它的物理化学性质,N-端氨基酸顺序的测定及其溴化氰降解碎片CBa的顺序分析. 天花粉蛋白是一个由224个氨基酸残基组成的单一肽链的简单蛋白质,其N-末端残基为Asp,C-端顺序经羧肽酶A测定,并结合其水解动力学的计算机拟合为     

天花粉蛋白二级结构的圆二色性研究

本文报告了室温条件下在185—330nm波长范围内天花粉蛋白的CD谱测定的结果。利用205—240nm区间的CD谱,借助参考CD谱用最小二乘拟合的方法,计算得天花粉蛋白中α螺旋平均含量为24％,β折叠含量为30％,无序构象含量为46％。     

量子点标记天花粉蛋白的研究

将半导体量子点应用于记天花粉蛋白,研究了量子占标记天花粉蛋白的吸收光谱、荧光光谱和酶活性变化,与游离的QDs 相比,QDs-TCS的吸收光谱在400－600nm范围内不发生明显变化,QDs-TCS的发射光普发生蓝移,但发射半宽不变,标记上QDs后TCS的酶活性没有发生改变,利用双光子激发扫描荧光显微镜和激光共取焦显微镜同时观察QDs-TCS在人绒癌细胞内的分布发现,QDs-TCS能够跨膜进入细胞,并在细胸核周围呈聚集分布。     

天花粉蛋白的化学 Ⅵ.用激光拉曼光谱研究天花粉蛋白的二级结构

由天花粉蛋白的水和重水溶液的激光拉曼光谱,测得酰胺Ⅲ谱带1240cm~(-1)和酰胺I谱带1632,1660cm~(-1)对CH_2弯曲模式1448cm~(-1)的强度比值。按Lippert等建立的方程组作定量计算,求得天花粉蛋白的二级结构含量为α-螺旋43.5％,β-折叠31.3％和无序25.2％,它们与4 分辨率天花粉蛋白单晶X射线衍射法的结果相一致。同时,研究了上述溶液的冻干粉状固体的二级结构,经过冻干,使其中约10％的β-折叠转变成无序构象,而α-螺旋含量无明显变化。在水溶液中,由测得的I_(850)/I_(830)比值计算,天花粉蛋白中的酪氨酸残基约有80％呈“暴露式”。     

天花粉蛋白的化学VI.用液光拉曼光谱研究天花粉蛋白的二级结构

由天花粉蛋白的水和重水溶液的激光拉曼光谱,测得酰胺III谱带1240cm[-1]和酰胺I谱带1632,1660cm[-1]对CH2弯曲模式1448cm[-1]的强度比值,按Lippert等建立的方程组作定量计算,求得天花粉蛋白的二级结构含量为α-螺旋43.5%,β-折叠31.3%和无序25.2%,它们与4A分辨率天花粉蛋白单晶X射线衍射法的结果相一致,同时,研究了上述溶液的冻干粉状固体的二级结构,经过冻干,使其中约10%的β-折叠转变成无序构象,而α-螺旋含量无明显变化,在水溶液中,由测得的I850/I830比值计算,天花粉蛋白中的酪氨酸残基约有805呈"暴露式"。     

天花粉蛋白的化学——Ⅴ.粉末状结晶天花粉蛋白的拉曼光谱

本文报道粉末状结晶天花粉蛋白的拉曼光谱。酰胺Ⅰ和酰胺Ⅲ的振动谱带在1680和1250 cm~(-1)。骨架C_α—C—N的振动谱带在965 cm~(-1)。苯丙氨酸残基的特征谱带在1010和1620 cm~(-1)。酪氨酸残基的特征谱带在845和862 cm~(-1)。色氨酸残基的特征谱带在765 cm~(-1)。酰胺Ⅰ和Ⅲ的谱带中,B折叠和无序结构的特征较为明显。表征无序结构的965 cm~(-1)谱带很弱。     

天花粉蛋白分子的肽链走向

本文证明从4分辨率的电子密度图上确定了一条合理的肽走向。天花粉蛋白属于α β型结构。整个分子包含八段α-螺旋,约占残基总数37％;13条β链组成4个β折叠层,占残基总数32％。α-螺旋相对地处于分子的中心,而4个β折叠层分布在外围。这是天花粉蛋白结构的显著特点,这种结构排布方式尚未见文献报道。用坐标叠合方法获得了不对称单位内两分子叠合时的旋转矩阵和平移向量,叠合后的均方根误差是1.31。     

天花粉蛋白的C端测定

天花粉蛋白(trichosanthin)是从葫芦科植物(Culurbitaceae)括楼(trichosantheskerilowii Maxim)的块根中提取的一种植物性蛋白质。该蛋白质有中期妊娠引产、抗早孕和治疗其它有关妇产科疾病的效力。根据已经测定的结果,该蛋白质系由19种约219个氨基酸组成,估计其分子量为24000。本项研究的主要目的是测定天花粉蛋白的C端和C端的部分氨基酸顺序。     

天花粉蛋白低分辨率晶体结构的测定

本文测出:天花粉蛋白分子量为24000,有219个氨基酸残基。晶体属单斜晶系,空间群为C2,晶胞参数a=75.64埃,b=75.52埃,c=88.85埃,β=99.51°,每个不对称单元内含2个分子。 用UO_2Ac_2和K_2Pt(NO_2)_4浸泡获得两个重原子衍生物,按照多对同晶置换加反常散射的联合概率法求得母体相角,计算了5埃和4埃分辨率电子密度图,从图上分辨出两个独立分子的界面,分子大小约为45×40×35埃~3,每个分子中有4段棒状的电子密度更为清晰,可辨认为α-螺旋结构。     

天花粉蛋白分子的三维结构

本文报道了我们最近建立的单斜晶胞内一个不对称单元中两个天花粉蛋白分子的模型,指出蛋白分子结构可以划分为大小两个结构域以及二级结构的一些特点,描述了独立单元中以一种非对称方式相关联的两个蛋白分子的差异及其相互作用,并解释了重原子衍生物的结合位置。     

肽键水解断裂的理论研究

用量子化学从头计算方法（Ｇａｕｓｓｉａｎ ９４Ｗ,ＲＨＦ／ＬＡＮＬ２ＤＺ）对钯（Ⅱ）与蛋氨酸以及二肽ＡｃＭｃｔ－Ｇｌｙ形成的配合物〔Ｐｄ（Ｓ,Ｎ,Ｏ－ＡｃＭｅｔ－Ｇｌｙ）（Ｈ２Ｏ）〕＾＋进行了结构优化,得到了稳定的构象。计算结果表明,当肽键中的羰基氧与钯（Ⅱ）配位之后,羰基碳所带的正电荷增加了２８．３％,使它极易受到亲试剂（溶济水）的进攻而使肽键发生断裂,这为钯（Ⅱ）配合物水解切割小肽的外部水进攻     

激光光散射研究天花粉蛋白的聚集过程

运用激光光散射技术研究天花粉蛋白在水溶液及不同浓度KSCN水溶液中的聚集过程．KSCN的加入能提高天花粉在水溶液中的稳定性. KSCN浓度大于0．5mol•L－1时，天花粉溶液透明、稳定，溶液中天花粉以单个分子与聚集体两种形式存在．聚集体主要是由约120个天花粉分子组成，平均流体力学半径Rh值约为49nm，在溶液中排列疏松，类似θ溶剂中的无规线团。     

天花粉蛋白研讨会在京召开

中国科学院化学学部和生物学学部主持召开的“天花粉蛋白研究讨论会”于1986年4月22日至25日在北京召开。出席会议的有化学、分子生物学、医学和药物学等方面专家和科技工作者80多人。中国科学院学部委员、著名化学家汪猷教授致开幕词,中国科学     

天花粉蛋白C-端顺序的测定

采用肼解法、乙内酰硫脲法和羧肽酶法检测了天花粉蛋白的C-端氨基酸有二,分别为Met和Ala借计算机辅助的羧肽酶法, 测定了天花粉蛋白C-端顺序, 其结果显示C-端是非均一的, 有两个未端, 分别为-ArgAsnAsnMetOH和-ArgAsnAsnMetAlaOH.这些结论已经从天花粉蛋白的溴化氰降解物中获得游离的Ala, 和从该蛋白的胰蛋白酶酶解物中分离得与该两顺序相符的两个碎片而完全证实.     

天花粉清液中成分的研究

从天花粉中分离得到二水合L-瓜氨酸,含量为772ppm.α-羟甲基丝氨酸,含量为67ppm.     

《天花粉蛋白》第二版出版

《天花粉蛋白》第二版由汪猷院士任主编 ,包括三位院士在内的从事天花粉蛋白研究多年的 6 0余位教授、专家共同写作 ,于 2 0 0 0年 6月科学出版社出版。该书第一版 1 990年出版。天花粉是从中华民族丰富的医药宝库中发掘的新药 ,它具有抗孕、抗病毒、抗肿瘤 ,特别是能抑制人艾滋病病毒的复制和繁殖诸多功能。在计划生育、治疗各种滋养层细胞疾病和艾滋病以及养牛业方面有良好的应用价值。《天花粉蛋白》第二版较第一版的篇幅有较大增加 ,内容也更加丰富 ,全面总结了我国科学工作者在天花粉蛋白的基础研究和应用领域中取得的成果。该书的主要…