Optimierungen zur ionen-chromatographischen Spurenanalytik von Schwer- und Erdalkalimetallen mittels post-chromatographischer Derivatisierung

Zusammenfassung An einem stark sauren Kationenaustauscher (Säule 100×3 mm) auf Kieselgelbasis lassen sich sechs Schwermetallionen [Fe(III), Cu, Zn, Co, Fe(II), Mn] innerhalb von 2,5 min basisliniengetrennt bestimmen. Elf Schwermetall- und Erdalkali-Ionen können an einer längeren Säule (200×4 mm) mit 0,1 mol/l Tartrat, pH 3,05 in 24 min vollständig getrennt werden. Die Detektion wird über eine postchromatographische Derivatisierung mit PAR- bzw. PAR-Zn-EDTA-Lösung durchgeführt. Die Stabilität der Farbreagenslösungen hängt von deren Konzentration und vor allem vom pH-Wert ab. Durch Untersuchungen über die Einflüsse von Konzentration, Zusammensetzung, pH-Wert, Reaktionsschlauchlänge und Temperatur ergab sich ein optimales Detektionssystem, mit dem die Empfindlichkeit für Fe(III), Pb, Cd, Fe(II) erheblich erhöht werden konnte. Die Reproduzierbarkeit für alle untersuchten Metallionen wurde mit relativen Standardabweichungen unter 1% ermittelt. Die Nachweisgrenzen liegen bei 1 bis 2 ppb. Über eine Voranreicherung lassen sich die im entmineralisierten Wasser vorliegenden Metallionen bis in den unteren ppt-Bereich bestimmen.

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Optimization of ion chromatographie trace analysis for heavy and earth alkali metals by post-chromatographic derivatization

Summary Fe(III), Cu, Zn, Co, Fe(II), Mn are baseline separable on a strong acid silica based cation exchanger (column 100×3 mm) in 2.5 min. Eleven common heavy metals and alkaline earth elements are completely separated on a longer column (200×4 mm) with 0.1 mol/l tartrate pH 3.05 in 24 min. The detection is carried out by using a post-chromatographic derivatization with PAR or PAR-Zn-EDTA solutions. The stability of the reagent solutions is dependent on the concentration and above all on the pH-value. An optimal detection system was obtained from a systematically investigation of the influences such as concentration, composition, pH-value, length of the reaction coil and temperature. By this system the sensitivity of Fe(III), Pb, Cd, Fe(II) was considerable enhanced. The reproducibility of these metal ions was found with a relative standard deviation better than 1%. The detection limits were 1 to 2 ppb. By means of pre-column concentration it is possible to determine metal ions present in demineralized water at sub-ppt levels.

     

Microdetermination of scandium,yttrium and lanthanum: Use of Chrome Azurol S as a chromogenic reagent

Summary Optimum conditions for the spectrophotometric determination of scandium, yttrium and lanthanum using Chrome Azurol S as a chromogenic reagent are described. The studies include the determination of the range for adherence toBeer's law, p_H range of stability of the chelates, sensitivity and the influence of foreign ions.

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Zusammenfassung Eine Arbeitsweise für die spektrophotometrische Bestimmung von So, Y und La mit Chromazurol S als Farbreagens wurde angegeben. Die Gültigkeit des Beerschen Gesetzes, die Stabilität der Chelate in Abhängigkeit vom P_h, die Empfindlichkeit der Reaktion und der Einfluß von Fremdionen wurden untersucht.

     

Preparation, characterization and application of an cellulose ion-exchanger with acetoacetamide functional groups

Summary A method is described for functionalizing acetoacetamide chelating groups onto microcrystalline cellulose (Cell-AcAc). This material shows a significant affinity for Fe(III), Cu(II) and U(VI) and no or very less affinity for the M(I) ions (M=Na, K), M(II) ions (M= Mg, Ca; Fe, Co, Ni, Zn), La(III) and Y(III) including Th(IV). The obtained K _d values offer a column separation method for U(VI) ions from the rest of above-mentioned metal ions except Fe(III). Cell-AcAc and its Cu(II) complexes are characterized by means of FT-IR spectra.

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Darstellung, Charakterisierung und Anwendung von Ionenaustauschmaterial aus Cellulose mit chemisch gebundener Acetoacetamid-Gruppe

Zusammenfassung Die Darstellung von immobilisiertem Acetoacetamid auf mikrokristallinem Cellulosepulver (Cell-AcAc) wird beschrieben. Der Ionenaustauscher Cell-AcAc hat eine ausgeprägte Affinität für Fe(III), Cu(II) and U(VI), aber nahezu keine für die M(I)-Ionen (M=Na, K) M(II)-Ionen (M=Mg, Ca; Fe, Co, Ni, Zn), La(III), Y(III) sowie Th(IV). Die erhaltenen K _d-Werte ermöglichen für U(VI)-Ionen eine quantitative säulen-chromatographische Trennung von den anderen genannten Kationen mit Ausnahme von Fe(III). Das Ionenaustauschmaterial Cell-AcAc und sein Cu(II)-Komplex wurden durch FT-IR-Spektren charakterisiert.

     

Quantitative chemical microdetermination of beryllium with chrome azurol by the ring-oven technique

Summary A method for determination of beryllium in minerals and rocks is described. Because of the toxicity of beryllium the method is designed for determination of 1–10 ng of Be. The sample is fused with sodium carbonate and sodium tetraborate. Interfering metals are masked with EDTA. Be is determined by the Weisz ring-oven method with Chrome Azurol. The relative error is 10%.

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Quantitative Mikrobestimmung von Beryllium mit Chromazurol auf dem Ringofen

Zusammenfassung Eine Methode für die Bestimmung des Berylliums in Mineralien und Gesteinen wurde beschrieben. Wegen der Giftigkeit des Berylliums wurde die Methode für die Bestimmung von nur 1–10 ng Be ausgearbeitet. Die Probe wird mit Natriumcarbonat und Natriumtetraborat geschmolzen. Die Maskierung mit EDTA beseitigt die Störungen seitens fast aller anderen Metalle. Die Bestimmung wird am Weisz-Ringofen mit Chrom-Azurol durchgeführt. Der relative Fehler ist 10%.

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Presented at the 8th International Microchemical Symposium, Graz, August 25–30, 1980.     

Photometrische Bestimmung von Vanadium mit Brenzcatechinviolett

Zusammenfassung Das Verhalten der Hydroxytriphenylmethanfarbstoffe Brenzcatechinviolett, Eriochromcyanin R, Chromazurol S und Aluminon gegen Vanadin(IV) wurde untersucht. Alle 4 Reagentien bilden bei Reagensüberschuß mit Vanadin(IV) 11-Komplexe. Brenzcatechinviolett und Chromazurol S eignen sich zur Bestimmung. Die Reaktion mit Brenzcatechinviolett ist die empfindlichste. Chromazurol S erlaubt Vanadin(IV) neben Vanadin(V) zu bestimmen. — Da die Reagentien nur geringe Selektivität aufweisen, wurde das Vanadin vorher mittels eines stark sauren Kationenaustauschers isoliert, indem zunächst alle Anionen — Molybdat, Wolframat, Niobat und Tantalat als Citratkomplexe — mit 2 · 10^–2 N Schwefelsäure und anschließend das als VO²⁺-Kation gebundene Vanadin mit schwach schwefelsaurer 1%iger H₂O₂-Lösung eluiert werden.

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Photometric determination of vanadium by means of Pyrocatechol Violet

The reactions of vanadium(IV) with the hydroxytriphenylmethane dyes Pyrocatechol Violet (I), Chrome Azurol S (II), Eriochrome Cyanine R, and Aluminon have been investigated. The four reagents in excess to vanadium(IV) form 11 complexes. I und II are suitable for vanadium determination. I is the most sensitive reagent of the series, II tolerates vanadium(V).Because these reagents show only little selectivity the vanadium has been isolated by means of a strong acid cation exchanger. It is adsorbed as VO²⁺ cation and eluted with a weak sulphuric acid solution of 1% H₂O₂, following the 2×10^–2 N H₂SO₄ elution of the anions inclusive of citrate complexes of molybdate,tungstate, niobate, and tantalate.

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Wir danken der Deutschen Forschungsgemeinschaft, dem Verband der Chemischen Industrie, Fonds der Chemie, und dem Landesamt für Forschung des Landes Nordrhein-West-falen für Sachbeihilfen; den stud. chem. J. Schwitte und stud. chem. K. G. Häusler für ihre interessierte Mitarbeit.     

Volumetric determination of uranium in a mixture of uranium and plutonium employing Fe(III) as titrant

Summary A method for the determination of U in the presence of Pu based on the reduction of U to U(IV) and Pu to Pu(III) by zinc amalgam followed by oxidimetry of U(IV) has been developed. Fe(III) perchlorate was chosen as the most suitable titrant for the selective oxidation of U(IV) as conventional oxidising titrants fail in the presence of Pu(III). The potentiometric titration of U(IV) with Fe(III) is known to be slow. This problem, however, has been overcome by selecting a suitable buffer medium and complexing agent to alter the potentials of the Fe(III)/Fe(II) and U(VI)/U(IV) systems in the favourable direction. Results of the titration of U(IV) with Fe(III) at pH 2 in the presence of ferrozine as complexing agent for Fe(II) are summarized. R.S.D. obtained for twenty determinations of 3–5 mg of U was 0.3 % in the presence of 1–4 mg of Pu.

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Volumetrische Bestimmung von Uran in einem U/Pu-Gemisch mit Hilfe von Fe(III)

Zusammenfassung Das Verfahren beruht auf der Reduktion von U zu U(IV) und Pu zu Pu(III) mit Hilfe von Zinkamalgam und anschließender Titration mit Fe(III)-perchlorat. Dieses Reagens hat sich für die selektive Oxidation des U(IV) am besten bewährt, da andere Oxidationsmittel in Gegenwart von Pu(III) versagen. Die Endpunktsindikation erfolgt potentiometrisch, wobei die an sich langsame Einstellung des Endpunktes dadurch beschleunigt wird, daß durch Zusatz eines geeigneten Puffers und eines Komplexierungsmittels (Ferrozin) für Fe(II) die Redoxpotentiale von Fe(III)/Fe(II) und U(VI)/U(IV) entsprechend verschoben werden. Die relative Standardabweichung für die Bestimmung von 3–5 mg U in Gegenwart von 1–4 mg Pu liegt bei 0,3%.

     

Ultramicro detection of cyanide and cyano compounds

Summary Ultramicro capillary methods for testing of cyanides, thiocyanates, hexacyanoferrates(II) and (III) are proposed. Traces of any of them can be detected in the presence of the others. A mixture containing 4-(2-pyridilazo)-resorcinol and mercuric nitrate has been found to be a very sensitive reagent for hydrogen cyanide.A capillary technique is described for the azide-iodine test.

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Zusammenfassung Spuren von Cyanid, Thiocyanat, Hexacyanoferrat(II) und (III) können mit Hilfe der vorgeschlagenen Kapillarmethode nebeneinander nachgewiesen werden. Eine Mischung von 4-(2-Pyridylazo)-resorcin (PAR) und Quecksilber-nitrat dient als sehr empfindliches Reagens für Blausäure. Eine Kapillar-methode für die Jod-Azid-Reaktion wurde beschrieben.

     

Composition,stability, and analytical applications of the cupric chelate of sulfo-dichloro-hydroxy-dimethylfuchson-dicarboxylie acid

Summary Stability and composition of the chelate of copper and Chrome Azurol S have been investigated, and suggestions are made for the spectrophotometric determination of copper.

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Zusammenfassung Stabilität und Zusammensetzung des Kupferkomplexes mit Chromazurol S wurden untersucht. Nach Entfernung von Beryllium, Aluminium, der Lanthanide, Titan, Zirkon, Hafnium, Thor, Uran, Eisen, Palladium, Borat, Carbonat, Oxalat und Zitrat kann Kupfer einfach und empfindlich spektrophotometrisch bestimmt werden.

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Résumé On a étudié la stabilité et la composition du complexe que donne le cuivre avec le chromazurol S. Aprés séparation du Be, de l'Al, des lanthanides, de Ti, Zr, Hf, Th, U, Fe, Pd, des borates, carbonates, oxalates et citrates, on peut doser le cuivre par spectrophotométrie, d'une maniére simple et sensible.

     

Kopplung von HPLC und chemischem Reaktionsdetektor zur Trennung und Bestimmung von bleiorganischen Verbindungen

Zusammenfassung Blei(II), Di- und Triorganobleiverbindungen sowie Bleitetraalkyle werden mit reversed-phase-HPLC getrennt und mit einem chemischen Reaktionsdetektor über 4-(2-Pyridylazo)-resorcin (PAR) als Nachweisreagenz im Konzentrationsbereich von 0,1–1,6 g/ml bestimmt. Die Anwendbarkeit des chemischen Reaktionsdetektors für die Bestimmung von Organozinnverbindungen und anderen Metallionen wird ebenfalls gezeigt.

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Coupling of HPLC and chemical reaction detector for the separation and determination of organolead compounds

Summary Lead(II), di- and triorganolead salts as well as tetraalkyllead compounds are separated by reversed phase HPLC and determined in the concentration range of 0.1–1.6 g/ml by a chemical reaction detector based on the use of 4-(2-pyridylazo)-resorcinol (PAR) as analytical reagent. The applicability of the chemical reaction detector for the determination of organotin species and different metal-ions is also shown.

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Prof. Dr. W. Fresenius zum 70. Geburtstag gewidmet

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Der Deutschen Forschungsgemeinschaft sind wir für die freundliche Unterstützung der Untersuchungen zu Dank verpflichtet.     

Ionen-chromatographische Multi-Element-Analyse

Zusammenfassung Am stark sauren Kationenaustauscher Nucleosil SA-10 lassen sich mit einer Tartratlösung pH 2,75 als mobiler Phase 13 Metallionen innerhalb von 34 min trennen. Selektive Trennungen werden mit komplexierenden Gemischen aus Ethylendiamin und Wein-, Oxal- und Citronensäure erreicht. Durch eine gezielte Auswahl des Eluenten kann z. B. für Elementbestimmungen in Lebensmitteln die Elutionsreihenfolge so variiert werden, daß die Elution der Erdalkali- nach den Spurenelement-Ionen erfolgt. Die Detektion der Kationen läßt sich nach post-chromatographischer Umsetzung mit dem Reagensgemisch PAR-ZnEDTA sehr empfindlich photometrisch durchführen. Die Nachweisgrenzen liegen unter 0,1 ppm, für ppm-Gehalte betragen die relativen Standardabweichungen 1% und weniger.

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Multi element analysis by ion-chromatography

Summary On the strongly acid cation-exchanger Nucleosil SA-10 13 metal ions are separable within 34 min using a tartrate solution pH 2.75 as mobile phase. Selective separations are possible by means of complexing mixtures of ethylenediamine and tartaric, oxalic and citric acid. By a proper selection of the eluents for the determination of elements in foods, e. g., the sequence of elution is variable so that the elution of the alkaline earth ions follows that of the trace element ions. The detection of the cations is carried out photometrically by post-chromatographic derivatisation with the reagent mixture PAR-ZnEDTA with high sensitivity. The detection limits are below 0.1 ppm; in the ppm-range the relative standard deviations amount to 1% and less.

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Auszugsweise vorgetragen während des Symposiums Instrumentelle Multi-Element-Analyse, Jülich 2.–5. April 1984     

Bestimmung von Wolfram durch amperometrische Redoxtitration mit Dichromat

Zusammenfassung Wolfram wird in etwa 10 M salzsaurer Lösung durch überschüssiges Cr(II) reduziert. Dies ist experimentell einfacher als die Verwendung von Reduktorsäulen oder flüssigen Amalgamen. Die Titration mit Fe(III) oder Cr(VI) erfaßt zunächst den Reagensüberschuß; danach wird W(V) zu W(VI) oxidiert. Die potentiometrische Indikation ist gehemmt. Geeignet ist die Biamperometrie bei E _pol= 0,2 V. In einer Folgetitration können außer W auch Fe und Mo oder V bestimmt werden. Nur Ti stört. Gegenüber der reduktometrischen Titration von W(VI) mit Cr(II) ergeben sich als Vorteile, daß ein titerkonstantes Reagens benutzt werden kann und die Lösung nicht entlüftet werden muß. Probenvorbereitungen für Ferrowolfram, Stahl, Hartmetall-Vorlegierung und Wolframerz werden beschrieben.

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Determination of tungsten by amperometric redox titration with dichromate

Summary Tungsten is reduced by an excess of Cr(II) in about 10 M HCl. This is technically simpler than the use of reductor columns or liquid amalgams. Titration with Fe(III) or Cr(VI) first consumes the excess of Cr(II) and then oxidizes W(V) to W(VI). The potentiometric response of metal electrodes to W(V) is slow but biamperometric indication at E_pol=0.2 V applies well. A mixture of W, Fe and Mo can be analyzed in a consecutive titration. Only Ti interferes. As compared to the reductometric titration of W(VI) with Cr(II) the method uses a stable titrant and avoids deairating of the sample solution. Sample preparations for ferrotungsten, steel and wolframite ore are described.

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Die Publikation beruht auf den Diplomarbeiten von R. Kranich [8] und R. Aupers [1].

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Wir danken dem Fonds der Chemischen Industrie für finanzielle Unterstützung sowie J. Becker, U. Görs und G. Schrovenwever für ihre Mitarbeit.     

Pr?- und post-chromatographische Derivatisierung mit wasserl?slichen Dithiocarbamaten zur HPLC-Analyse von Metallionen

Zusammenfassung Co, Ni und Cu werden nach prä-chromatographischer Derivatisierung als N-Methyl-N-2-sulfoethyl-dithiocarbamate (DTC) mittels eines Ionenpaar-Reversedphase-Systems getrennt. Die Metalle lassen sich bis zu Nachweisgrenzen von etwa 1 ng in der Säule bei 400 nm Detektionswellenlänge quantitativ analysieren. Bei hohen Eisenüberschüssen ist die post-chromatographische Derivatisierung mit dem ebenfalls wasserlöslichen 1-Carboxy-N,N-cyclotetramethylen-DTC in Kombination der Ionen-Chromatographie der Metallionen besser geeignet. Neben Cu, Co und Ni lassen sich auch Fe und Pb trennen sowie bei 320 nm optimal detektieren. Die Nachweisgrenzen für Co und Ni betragen 0,5 bzw. 0,2 ng absolut. Die Anwendbarkeit dieses Analysensystems für Co- und Ni-Spurenanalysen in Hülsenfrüchten wird gezeigt.

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Pre- and post-chromatographic derivatization by water soluble dithiocarbamates for HPLC analysis of metal ions

Summary Cobalt, nickel and copper are separated by ionpair reversed-phase chromatography after pre-chromatographic derivatization to N-methyl-N-2-sulfoethyl-dithiocarbamates (DTC). The metals can be quantitatively determined with detection limits of 1 ng in the column at a detection wavelength of 400 nm. In the presence of a high excess of iron the post-chromatographic derivatization with 1-carboxy-N,N-cyclotetramethylene-DTC in combination with the ion-chromatography of the metal ions is more suitable. Besides cobalt, nickel and copper, iron and lead can also be separated and optimally detected at 320 nm. The detection limits in the column are 0.5 ng for cobalt and 0.2 ng for nickel. The applicability of this system has been shown for the trace analysis of cobalt and nickel in legumes.

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Herrn Prof. Dr. H. Hartkamp zum 60. Geburtstag gewidmet     

Mikrotitration von Peptiden und Aminos?uren

Zusammenfassung Eine nichtwäßrige Titration von Peptiden und Aminosäuren mit Perchlorsäure unter spezieller Berücksichtigung von Verbindungen dieser Substanzklasse mit Thioether- und Sulfidfunktionen wird beschrieben. Störungen durch Bildung von Quecksilberkomplexen dieser Schwefelgruppen bei Zusatz von Quecksilber(II)-acetat werden durch das Lösungsmittel Nitromethan-Ameisensäure verhindert. Probenmengen im Mikromol-Bereich werden mit einer relativen Standardabweichung von unter 2% titriert.

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Microtitration of peptides and amino acids

Summary A non-aqueous titration method with perchloric acid is described for the determination of peptides and amino acids under special consideration of compounds containing thioether and sulphide functions. Interferences by formation of mercury complexes with these groups upon addition of mercuric acetate are prevented by use of the solvent nitromethane-formic acid. Samples in the micromole range are titrated with a relative standard deviation of less than 2%.

Frau S. Alex und Frl. S. Rieder danken wir für die sorgfältige Durchführung der Experimente.     

Darstellung und Strukturanalyse neuer Komplexe von Eisen(II), Cobalt(II) und Nickel(II) nach synergistischer Extraktion

Zusammenfassung Die synergistische Extraktion von Eisen(II)-, Cobalt(II)- und Nickel(II)-Komplexen wird untersucht. Verwendet werden fluorierte Diketone (A) (Derivate des Thenoyltrifluoracetons) und eine neue Gruppe Schiff' scher Basen. Aus den Extraktionskurven nach der Job- und Molar-Ratio-Methode, der Elementaranalyse und aus Molmassenbestimmungen werden Komplexverbindungen der Zusammensetzung [M₄A₈B⁴] nachgewiesen. Aus den Elektronen- und IR-Spektren und aus magnetischen Messungen wird für die Ni(II)-Komplexe eine octaedrische Struktur vorgeschlagen.

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Preparation and structure analysis of new iron(II), cobalt(II) and nickel(II) complexes by synergistic extraction

Summary The synergistic extraction of iron(II), cobalt(II) and nickel(II) complexes was investigated. Fluorinated diketones (A) (derivates of thenoyltrifluoracetones) and a new group of Schiff bases were used. By Job and molar-ratio method investigation on the extraction curves, by elementary analysis and molar mass detection, complex compounds of the composition [M₄A₈B⁴] could be proved. Electron and infrared spectra and magnetical measurements led to an octahedral structure proposal for the Ni(II)-complexes.

Mein Dank gilt besonders Herrn Professor Dr. H. Specker, Direktor des Instituts für Anorganische Chemie I der RUB, für die Zurverfügungstellung der Geräte und Chemikalien, Herrn Professor Dr. Metfessel und Frau Dr. Magdela Gronau für die magnetischen Messungen in der Abteilung Physik der RUB.     

Semi-automatic catalytic titrations based on the 1,4-dihydroxyphthalimide dioxime/iodate/nickel system

Summary A new system, in which the nickel-catalysed oxidation of 1,4-dihydroxyphthalimide dioxime by iodate as the indicator reaction, is described. This system can be used for semi-automatic titration of aminopolycarboxylic acids because of their inhibitory effect on the indicator reaction. Amounts of EDTA and DCTA in the range 700–6000g were determined with an error of about 1%. The method has also been used for the indirect catalytic titrimetric determination of Ni(II), Hg(II) and Fe(III) with good results.

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Zusammenfassung Die von Nickel katalysierte Oxydation von 1,4-Dihydroxyphthalimiddioxim durch Jodat wird als neue Indikator-Reaktion beschrieben. Sie kann für die halbautomatische Titration von Aminopolycarbonsäuren wegen deren Hinderungseffekt auf diese Reaktion verwendet werden. Mengen von 700 bis 6000 g ÄDTA und DCTA wurden mit einem Fehler von etwa 1% bestimmt. Außerdem wurde die Reaktion für die indirekte katalytische Titration von Ni(II), Hg(II) und Fe(III) mit gutem Erfolg angewendet.

     

Automatische photometrische Fluorid-Titration mit Thoriumnitrat und Alizarin S

Zusammenfassung Für Fluoridgehalte zwischen 1 und 20 mg in 85 ml Lösung wurde die photometrische Titration mit Thoriumnitrat und Alizarin S automatisiert und die Arbeitsbedingungen optimiert. Ausgewählte Matrixeinflüsse werden eingehender untersucht. Dieses Verfahren ist besonders für die Bestimmung von Fluorid aus Peroxid-Aufschlüssen geeignet.

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Automatic photometric titration of fluoride with thorium nitrate and Alizarin S as indicator

Summary The photometric titration of fluoride with thorium nitrate and Alizarin S as indicator has been automated and optimized for fluoride levels between 1 and 20 mg/85 ml solution. The interference of several ions has been investigated. This procedure is particularly useful for the determination of fluoride after fusion with peroxides as fluxing agents.

Der Deutschen Metrohm, Filderstadt, die für diese Untersuchungen alle Meßgeräte zur Verfügung gestellt hat, sei für die großzügige Unterstützung dieser Arbeit gedankt. Herrn Dr. C. Harzdorf (Bayer AG, Leverkusen) danken wir für wertvolle Diskussionsbeiträge, Herrn H. Kreft und Herrn Ing. (grad.) M. Schlamelcher für zahlreiche Hilfeleistungen.     

Zur Fluorescenzmarkierung von Trypsin, Trypsinogen, Chymotrypsin und Chymotrypsinogen mit Fluoresceinisothiocyanat

Zusammenfassung In der vorliegenden Arbeit wurde die Einwirkung von Fluoresceinisothiocyanat auf Trypsin (I), Trypsinogen (II), Chymotrypsin (III) und Chymotrypsinogen (IV) untersucht. Während sich natives I nicht dotieren ließ, konnten an teilautolysiertes Trypsin 17T (V), II und IV je 1 Mol, an III 2 Mole Farbstoff kovalent gebunden werden. Die spezifischen Aktivitäten der Fluoresceinderivate von III und V lagen über denen der undotierten Enzyme.Wir danken der Deutschen Forschungsgemeinschaft für die Gewährung von Sachmitteln.     

4H-3,1-Benzoxazinone-(4), 2. Mitt.: Die Reaktion von 1,2-Dihydro-2-imino-4H-3,1-Benzoxazinonen-(4) mit nukleophilen Reagentien und ihre Umwandlung in 1,2,3,4-Tetrahydro-chinazolindione-(2,4)

Zusammenfassung 1,2-Dihydro-2-imino-4H-3,1-benzoxazinon-(4) (I a), bzw. das tautomere II a wird durch Wasser, wäßr. Alkohole und Amine zu 2-Ureido-benzoesäure (III), bzw. deren Estern und Amiden aufgespalten. Das Hydrochlorid (X) von II a erfährt dieselben Aufspaltungen unter milderen Reaktionsbedingungen. Unter energischeren Reaktionsbedingungen werden sowohl III als auch seine Ester und Amide zu 1,2,3,4-Tetrahydro-chinazolindion-(2,4) (XII) cyclisiert. Beim Kochen der Amide von III mit Pyridin werden diese in in Stellung 3 substituierte Derivate (XXII) von XII übergeführt. Das 2-Phenylimino-analoge von I a, bzw. II a (I b oder II b) ist gegen Wasser und Alkohole beständig, mit Benzylamin reagiert es jedoch ebenso wie die Grundverbindung. Das Hydrochlorid von II b reagiert auch mit Wasser und Methanol analog X. Einige der hier und in der vorangehenden Mitteilung besprochenen Umsetzungen sind in Hinblick auf einen Beweis für den vonKhorana für durch Carbodiimide hervorgerufene Carboxyl-Kondensationsreaktion vorgeschlagenen Mechanismus von Bedeutung.1. Mitt.: Mh. Chem.95, 950 (1964).Vgl. die vorläufigen MitteilungenK. Lempert undG. Doleschall, Tetrahedron Letters [London]1963, 781, sowieG. Doleschall undK. Lempert, ebenda, S. 1195.