几种辅酶模型化合物的研究

本文简要介绍了四氢叶酸、烟酰胺二核苷酸和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、黄素单核苷酸和黄素腺嘌呤二核苷酸、生物素、硫胺素焦磷酸以及磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺等辅酶的生物化学;对与它们有关的仿生化学研究进行了评述,包括辅酶模型化合物的仿生有机合成和有关的机理研究。     

三维荧光光谱结合二阶校正方法测定细胞培养基中阿霉素的含量

本文采用交替三线性分解(ATLD)和交替归一加权残差三线性分解(ANWE)两种二阶校正方法结合激发发射矩阵荧光光谱对完全不经任何预处理的细胞培养基中的阿霉素进行简单、快速、直接的定量测定.当算法选取组分数为2时,解析得到细胞培养基中阿霉素的平均回收率分别为(100.5±1.8)%和(100.3±1.9)%.在细胞培养基中加入烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)、黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)和黄素单核苷酸(FMN)四种细胞内的自发荧光物后,选取组分数为4时,解析得到细胞培养基中阿霉素的平均回收率分别为(99.1±2.9)%和(99.2±3.1)%.结果表明该分析方法能够准确、快速地直接测定细胞培养基中阿霉素的含量,并且在模拟细胞内荧光干扰环境下可定量测定阿霉素,且能获得令人满意的结果.     

高等植物叶绿体中光诱导生成NO的ESR证据

NO分子在生物细胞体系中是一个十分重要的信使分子,它具有调节细胞凋亡、松弛平滑肌、抑制血小板聚集与黏附、抑制病原体和肿瘤生长等多种生理功能^[1,2],因而备受生物学家的关注.众所周知,动物细胞中NO主要来源于一氧化氮合酶(NOS)的表达^[3];然而,直到最近才有研究证明植物细胞中存在参与调节植物生长和激素信号转导的NOS基因^[4].一般认为植物细胞中NO主要来源于硝酸盐还原酶(NR)^[5].我们曾在高等植物光系统中研究发现了与电子传递相关的活性氧生成机制^[6～8],但其间是否也会通过光诱导电子传递产生NO尚不清楚.Kozlov等^[9]曾报道在小鼠线粒体内存在与亚硝酸盐还原酶功能类似的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)诱导电子传递生成NO的反应,本文采用电子自旋共振(ESR)方法验证了高等植物叶绿体内光诱导电子传递可产生NO的设想.     

Tb3+-钛铁试剂络合物荧光猝灭法测定含磷酸基辅酶

含磷酸基辅酶磷酸吡哆醛(PALP)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、烟酰胺腺嘌呤磷酸二核苷酸(NADP)、黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)可显著猝灭铽-钛铁试剂(Tb3 -TR)络合物的荧光,其荧光猝灭值△F=F0-F分别与PALP、NAD、NADP和FAD的浓度呈线性关系。分别对测定条件进行了优化,并研究了干扰物质情况,建立了Tb3 -TR络合物荧光探针灵敏测定PALP、NAD、NADP和FAD的方法。PALP、NAD、NADP和FAD的检出限分别为:1.1×10-7mol/L、6.4×10-8mol/L、1.6×10-8mol/L和1.15×10-8mol/L。     

脱氢酶电化学生物传感器的研究进展

自然界中超过400种脱氢酶使用辅酶-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)作为生物催化反应中氢和电子的传递体,因此烟酰胺型辅酶的电化学氧化对构筑此类脱氢酶电化学生物传感器具有重要的意义.本文介绍了还原型辅酶在人工电子媒介体存在下的电化学氧化,以及脱氢酶电化学生物传感器的设计和应用.     

基于磁性纳米粒子的葡萄糖生物传感器

葡萄糖是生物体的重要代谢产物,其浓度的检测对糖尿病人极为重要.葡萄糖氧化酶因其价格低廉、稳定性好和实用性强而成为一种理想的酶.它含有素黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)氧化还原中心,能催化电子从葡萄糖转移至葡萄糖酸内酯,已经被广泛应用于监测糖尿病的葡萄糖水平.     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸与生物光化学

生物光化学的核心内容是光合作用。在光合作用这个生物光化学的核心领域，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)始终起着极其重要的作用，NADPH就是一个传递电子和能量的最关键活性生物分子。本文对海洋里的光合作用、细菌与光合作用以及光合作用的模拟等作了介绍。     

硝基还原酶荧光探针的研究进展

硝基还原酶是一类依赖于黄素单核苷酸或黄素腺嘌呤二核苷酸的细胞质酶,广泛存在于细菌中。肿瘤细胞缺氧通常也可导致胞内硝基还原酶增加。在电子供体如还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的存在下,硝基还原酶可以将芳香族硝基化合物有效还原为相应的氨基化合物。这种还原行为不仅用于药物的激活和芳香族硝基化合物的生物降解,同时也可用来设计含硝基的荧光探针对实体瘤细胞的缺氧状况进行检测。本文简要评述近年来硝基还原酶荧光探针的研究进展,包括基于多米诺分解反应以及荧光体上硝基直接还原为氨的反应而发展的荧光探针。     

线性变位极谱法研究（Ⅹ）：玻碳电极上NADH的氧化

Elving等认为二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(简称NADH)在玻碳电极上的氧化反应属于ECE过程,如式(1)所示:     

高通量微孔板DAMBO-P~H荧光检测一氧化氮

一氧化氮(NO)是生物体内的一种重要生物信号传导分子,广泛参与生物体内多种生理及病理过程.为建立快速高效、准确检测生物体释放NO的分析方法,本文选用高灵敏度、高选择性的NO特异性荧光探针8-(3,4-diaminophenyl)-2,6-bis(2-carboxyethyl)-4,4-difluoro-1,3,5,7-tetramethyl-4- bora-3a,4a-diaza-s-indacene (DAMBO-P~H),激发波长和发射波长分别为520 nm和535 nm,以高通量微孔板(384孔)作为实验工具载体.该方法荧光强度与NO浓度在8.0×10~(-10)～8.0×10~(-7) mol·~(-1)范围内呈良好线性关系,R=0.9989,检出限为0.18 nmol·~(-1),回收率为98%～102%.该方法应用于多种生物样品中释放NO的分析检测,结果令人满意.     

一氧化氮诱导植物DNA反应机理的初步研究

一氧化氮(NO)在生物体内能对各种生物或非生物胁迫产生应答~([1]),能够调节植物生长发育,在植物抗病反应中起重要作用~([2]),NO与超氧离子(O_2~-)迅速生成过氧亚硝酸根(ONOO~-),损伤机体组织,影响植物的生长~([3]).     

超高效液相色谱-质谱联用法同时快速测定细胞中的4种吡啶核苷酸辅酶

建立了超高效液相色谱-质谱联用法同时测定细胞内4种吡啶核苷酸辅酶(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP+)以及它们的还原态(NADH和NADPH))的方法.样品经甲醇低温快速提取后,在新型混合模式Atlantis PREMIER BEH C18 AX色谱柱上分离,10 mmol/L甲酸铵...     

乙醇含量的酶法测定

利用醇脱氢酶(ADH)催化乙醇与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)反应的原理，通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)吸光度的变化率得出其酶促反应速度，对应不同的乙醇含量而制得标准曲线，试样中乙醇含量由测定值查标准曲线求得；讨论了pH值和抑制剂对测定的影响；方法简便、快速、准确。     

酶催化动力学荧光法测定乙醇

利用醇脱氢酶(ADH)催化乙醇与氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)反应的原理,通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)荧光强度的变化率得出其酶促反应速度,对应乙醇浓度而制得标准曲线,试样中乙醇含量由标准曲线求得,检出限为4.0×10-6mol/L。考察了试剂用量、pH、共存组分对测定的影响。该方法简便、快速、准确。     

黄素腺嘌呤二核苷酸在热石墨柱电极上电化学行为及吸附溶出分析

研究了黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)在热石墨柱电极上的电化学行为.发现对吸附有FAD的电极加热同时进行循环伏安扫描,随电极温度升高,氧化还原峰电位负移,峰电流减小,峰形变差.采用方波伏安进行吸附溶出分析,如果只在吸附步骤对电极加热,室温溶出,则随电极温度升高,溶出峰电流显著增加.这主要归因于直接对电极加热引起的强制热对流,这种对流能提高传质,促进吸附,增强溶出响应.5 min预富集对电极加热到72 ℃,检出限可以达到1×10-8 mol/L(S/N=3),比室温27 ℃时降低了一个多数量级,相应灵敏度也明显提高.     

自动变换波长反相高效液相色谱法同时定量测定生物样品中磷酸肌酸和腺嘌呤核苷酸

腺嘌呤核苷酸(ATP、ADP和AMP)及磷酸肌酸(CP)是生物能量转换的主要成分。测定这些成分将 有助于了解组织器官的功能状态及某些能提高缺氧耐力的药物与改善能量代谢的可能关系。HPLC可以同时测定多种核苷酸成分,但要同时测定CP却有困     

酶法测定乙醛

乙醛作为化工原料 ,其工业废水若处理不当 ,将造成天然水系的污染 ,因此 ,乙醛是环境监测的一项重要指标 .测定方法主要有碘量法 ,色谱法 ,光度法 ,及化学发光法等 [1 ,2 ] ,近年来酶法在分析测定方面得到广泛应用 ,以酶法测定食品中乙醛含量已有报道 [3] .本文基于乙醛 NADH(还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 ) 乙醇 NAD (氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 )在2 5℃时 ,反应平衡常数为 1 .0× 1 0 1 1 ,反应平衡偏向生成乙醇的方向 ,因此有利于痕量乙醛的测定 .通过在醇脱氢酶存在下 ,NADH→NAD 的转化 ,测定 NADH吸光度的变化率 ,得出其…     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸类CD38抑制剂的合成及生物活性评价

分别以1,3,5-三苯甲酰基-α-D-核糖、3,5-二苯甲酰基-2-脱氧-2,2-二氟戊呋喃糖-1-酮和D-木糖为原料, 经由烟酰胺核苷及烟酰胺核苷酸中间体, 合成了系列糖环经氟原子取代的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)类CD38抑制剂. 基于对CD38的水解抑制能力的考察, 评价了所合成氟代NAD类似物的活性. 结果表明, 糖环上氟原子取代的数目和位置对抑制剂活性的影响十分明显, 烟酰胺核苷的端基构型对活性的影响较大. 2个化合物均显示出非常好的CD38抑制活性, 其中化合物2a的抑制活性高出阳性对照物阿糖型氟代烟酰胺腺嘌呤二核苷酸2个数量级.     

NAD-硅胶亲和色谱固定相的合成和在核苷酸及其碱基分析中的应用

ＮＡＤ－硅胶亲和色谱固定相的合成和在核苷酸及其碱基分析中的应用于世林,苗凤琴,杨朝霞,冯茹（北京化工大学应用化学系,北京,１０００２９）关键词烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ＮＡＤ）,亲和色谱,核苷酸烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（ＮＡＤ,辅酶Ⅰ）是多种脱氢酶的辅酶,通...     

核酸化学研究 Ⅳ.常见核糖核苷及其3′-核糖核苷酸柱层析

本文介绍以涂渍12％甲基三正烷基(C_8～C_(10))氯化铵的聚三氟氯乙烯细粉(160～200目)为交换剂的反相离子交换柱层析。用碳酸铵水溶液分级洗脱,可在三小时左右一次柱层析即能把常见核糖核苷和相应的3'-核糖核苷酸共八种组分的混合物分开,并可根据各组分的峰面积定量。各组分洗脱的次序为胞嘧啶核糖核苷(CR),腺嘌呤核糖核苷(AR),尿嘧啶核糖核苷(UR),鸟嘌呤核糖核苷(GR),3'-胞嘧啶核糖核苷酸(3'-CMP),3'-腺嘌呤核糖核苷酸(3'-AMP),3'-尿嘧啶核糖核苷酸(3'-UMP),3'-鸟嘌呤核糖核苷酸(3'-GMP)。表示各峰分离情况的分离度(R)除CR和AR之间为0.77分离略差外,其它各峰之间均大于1。各个组分含量达10～20微克(0.3～0.5A_(260))~*即可定量。定量分析标准误差σ=0.06。此法已成功地用于以化学方法合成的低聚核糖核苷酸的碱基组成的测定。