HPLC-DRC-ICP-MS测定富硒蔬菜中的硒形态

建立了高效液相色谱-动态反应池-电感耦合等离子体质谱(HPLC-DRC-ICP-MS)联用测定硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基硒代半光氨酸(MeSeCys)、亚硒酸盐(SeIV)、硒代蛋氨酸(SeMet)和硒酸盐(SeVI)的方法。样品通过胃蛋白酶提取,采用Hamilton PRP X-100色谱柱(250 mm×4.6 mm,10μm),使用5 mmol/L的柠檬酸溶液(pH 4.7)作为流动相,在10 min内可以完全分离5种硒形态。在80Se质量数下,采用甲烷作为DRC反应气,可有效消除40Ar40Ar+对80Se的干扰,提高检测灵敏度。电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)检测,各硒形态的线性相关系数均大于0.9990,Se(IV)、Se(VI)、SeMet、SeCys2、MeSeCys的定量限分别为5,10,10,5,5μg/kg,5种硒形态的加标回收率在80.1%～99.2%之间,可满足蔬菜中硒形态定量分析。     

气相色谱-质谱联用测定紫花苜蓿中的硒蛋氨酸

建立了气相色谱质谱联用(GC—MS)测定紫花苜蓿中硒蛋氨酸含量的方法。将紫花苜蓿中提取的叶蛋白样品在6 mol/L HCl溶液中,超声处理20 min。离心分离后,以丁醇及三氟乙酸酐为衍生化试剂对硒蛋氨酸进行衍生化,采用选择离子监测模式对衍生物进行GC—MS测定。硒蛋氨酸的回收率为97.6%~105.2%,相对标准偏差为1.7%~3.6%,检出限为0.3 mg/L。该法样品前处理简单,测定快速,结果准确,灵敏度高,可用于植物样品中硒蛋氨酸含量的测定。     

气相色谱-质谱法测定富硒酵母中的硒蛋氨酸

建立了气相色谱-质谱（GC-MS）测定富硒酵母中硒蛋氨酸含量的方法。比较了3种从样品中提取硒蛋氨酸方法的效果。样品在三羟甲基氨基甲烷（Tris）缓冲液中酶解24 h后,以丁醇及三氟乙酸酐为衍生化试剂对硒蛋氨酸进行衍生化,采用选择离子模式对衍生物进行GC-MS测定。硒蛋氨酸的回收率为98.5%~103.7%,相对标准偏差为0.9%~2.4%,检出限为0.5 mg/L（S/N=3）。对实际样品进行测定,得到样品中硒蛋氨酸的含量结果。该法简便快速,准确可靠,灵敏度高。     

溴化氰-气相色谱法测定硒蛋氨酸的研究（Ⅰ）

硒蛋氨酸是普遍存在于植物蛋白中的一种常见的硒氨基酸,它的测定对研究必需微量元素硒的营养以及硒与人体健康的关系有重要意义。 在蛋白质中,硒蛋氨酸总是与同系物蛋氨酸共存,其含量极微,在6mol/LHC1中水解7小时便完全分解,因此,氨基酸分析常用的酸水解—离子交换色谱分析法不适用于硒蛋氨酸的定量分析。Caldwell等     

液相色谱-双通道原子荧光检测联用法同时测定砷和硒的形态

建立了一种利用高效液相色谱-双通道原子荧光检测联用同时进行砷和硒形态分析的方法。以10 mmol/L NH4H2PO4溶液(pH 5.6)(添加2.5%(体积分数)的甲醇)为流动相,在12 min内同时分离了三价砷(As(III))、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、五价砷(As(V))、硒代胱氨酸(SeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet)和四价硒［Se(IV)］等化合物。As(III)、DMA、MMA、As(V)、SeCys、SeMet和Se(IV)的检出限分别为1,3,2,3,4,18和3 μg/L (进样量为200 μL),5次测定的相对标准偏差为1.9%～6.1%(As 100 μg/L, Se 300 μg/L)。应用该方法对人体尿样及硒酵母片中砷和硒的形态进行了分析,目标物在尿样中的加标回收率为83%～108%,在硒酵母片中的加标回收率为88%～105%。实验结果表明,该方法可用于尿样及药品中砷和硒形态的日常分析。该方法减少了样品的分析时间和试剂用量,降低了工作强度,提高了工作效率。     

离子色谱-电感耦合等离子体质谱法测定奶粉中的硒形态

采用离子色谱-电感耦合等离子体质谱法测定奶粉中的硒形态。奶粉样品经乙酸沉淀蛋白,流动相提取。选用Hamilton PRP X-100阴离子柱(250mm×4.6mm,5μm),以5mmol·L-1柠檬酸、10mmol·L-1乙酸铵和0.1%(体积分数)三氟乙酸为流动相(pH 5.2),8min内实现了硒酸盐[Se(Ⅵ)]、亚硒酸盐[Se(Ⅳ)]、硒代蛋氨酸(SeMet)和硒代胱氨酸[(SeCys)2]等4种硒形态的基线分离。方法的检出限在0.03~0.10μg·L-1之间。加标回收率在25.0%~105%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.8%~7.8%之间。     

液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱法测定富硒酵母中硒的形态

建立了富硒酵母中硒酸Se(Ⅵ)、亚硒酸Se(Ⅵ)、硒代蛋氨酸(SeMet)和硒甲基硒代半胱氨酸(SeMeCys)4种硒形态的高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱(HPLC-HG-AFS)分析方法。样品采用蛋白酶和胰蛋白酶酶解提取,20 mmol/L(NH4)2HPO4为流动相,经PRP-X100阴离子交换色谱柱分离后HG-AFS测定。结果显示,4种硒形态标准曲线的线性关系良好(R2≥0.9995),方法检出限为0.5~5.0μg/kg,平均回收率为82.5%~101.2%,日内相对标准偏差≤8.6%,日间相对标准偏差≤14.5%。本方法前处理简单、灵敏度高、设备便宜、运行费用低廉,适用于富硒饲料产品中硒的形态分析。     

气相色谱串联四极杆质谱法对富硒包菜汁中硒甲基硒半胱氨酸与硒蛋氨酸的测定

建立了一种快速分析富硒包菜汁中硒甲基硒半胱氨酸和硒蛋氨酸含量的方法。以氯甲酸乙酯作衍生化试剂,利用串联质谱技术在多离子监测模式下对衍生物进行GC-MS/MS测定。方法的线性范围为0.01～25 mg/L,线性相关系数r≥0.9988;方法检出限分别为硒甲基硒半胱氨酸（met-Se-cys）4μg/L、硒蛋氨酸（Se-met）2μg/L;met-Se-cys的方法回收率为82%～97%,RSD小于6.3%,Se-met的方法回收率为100%～109%,RSD小于7.5%。结果表明该方法简单、快速、准确,并能有效排除基质的干扰,适合于食品中硒甲基硒半胱氨酸和硒蛋氨酸的定性定量分析。     

蛋氨酸硒络合反应条件的响应曲面法优化

以蛋氨酸和亚硒酸钠为原料合成了蛋氨酸硒;采用基于3因素5水平的中心组合设计实验的响应曲面法,分析了温度(30℃~80℃)、酸度(pH 4~9)、时间以及它们之间的交互作用对蛋氨酸硒产率的影响,确定了合成蛋氨酸硒的最佳工艺条件.通过典型分析确定优化的络合反应条件为:温度50℃,pH 6.93,时间90 min;相应的蛋氨酸硒的产率为51.58%.相关研究结果表明,采用响应曲面法优化确定的蛋氨酸硒合成工艺合理有效、切实可行.     

甾体激素类药物中微量硒的测定

以氧瓶燃烧法将硒(Se(VI))转化为硒的氧化物。在碱性溶液中,以水合肼为还原剂,将Se(VI)还原为Se2-,然后与Cd2+在水浴中回流反应,合成具有优良荧光特性的Cd Se量子点。依据硒的浓度与体系荧光强度的线性关系,建立了测定微量硒的新方法。研究了酸度、反应温度、反应时间、还原剂用量等因素对硒的测定的影响,确定了最佳实验条件。在最佳条件下,硒酸盐浓度在1.0×10-8~3×10-6mol/L范围与体系的荧光强度呈良好线性关系,线性方程为I=78.67+6.325×107c,线性相关系数为0.9955。方法可用于甾体激素药物中硒的测定。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法同时测定食品中7种硒形态

采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)联用技术同时测定食品中7种硒形态。样品均质后先用水超声萃取2 h,离心分离后,采用ZORBAX SB-Aq C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以20 mmol/L柠檬酸+5 mmol/L已烷磺酸钠(pH=4.4)为流动相等度洗脱,Se(Ⅳ)、Se(Ⅵ)、硒代胱氨酸(SeCys2)、甲基硒代半胱氨酸(SeMeCys)、硒脲(SeUr)、硒代蛋氨酸(SeMet)、硒代乙硫氨酸(SeEt)7种硒形态在10 min内达到完全分离。7种硒形态化合物的质量浓度在2.5～100.0μg/L范围内与峰面积呈线性关系,检测限(S/N=3)为0.005 mg/kg。加标回收率在71.9%～116.7%之间,相对标准偏差(n=6)在1.62%～18.48%之间。该方法精密度及准确度高,重现性好,适用于食品中上述7种硒形态化合物的同时快速测定。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定人尿中硒形态

采用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法(HPLC-ICP/MS)测定人尿中硒代胱氨酸(SeCys_2)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)、亚硒酸盐[Se(Ⅳ)]、硒代蛋氨酸(SeMet)、硒酸盐[Se(Ⅵ)]5种硒形态。样品经超纯水稀释后,采用Hamilton PRP-X100色谱柱(250 mm×4 mm,10μm)分离,以40 mmol/L磷酸氢二铵(含1%甲醇,pH 5)为流动相进行等度洗脱,13 min内可将5种硒形态分离。5种硒形态的线性范围为0～300.0μg/L,相关系数(r)均大于0.999,检出限为0.2～0.5μg/L。除SeCys_2的加标回收率为37.7%～70.4%外,MeSeCys、Se(Ⅳ)、SeMet、Se(Ⅵ)的加标回收率为80.0%～123%;5种硒形态的相对标准偏差(RSD)均不大于7.8%。应用该方法测定实际样品,结果显示人尿中硒形态主要以SeCys_2为主,同时含有少量MeSeCys、SeMet、无机硒及未知含硒化合物。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法测定富硒碎米荠中的硒形态

建立了富硒碎米荠中Se(Ⅵ)、Se(Ⅳ)、硒代胱氨酸(SeCys_2)、甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys)、硒代蛋氨酸(SeMet) 5种硒形态的高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)分析方法。通过风味蛋白酶和蛋白酶E两种酶先后添加的顺序提取不同形态硒化合物,经两次酶解提取后,稀释到合适浓度。选取Thermo Scientific Hypersil GOLD C8色谱柱(250 mm×4.6 mm×5μm),以含0.05%七氟丁酸与3%甲醇的20 mmol/L KH_2PO_4作为流动相进行等度洗脱,可在6 min内将5种硒形态完全分离。5种硒形态在线性范围内相关系数(r~2)均大于0.999;加标回收率均在85.8%～106.3%之间;变异数小于5%;方法的检出限为0.08～0.25μgSe/L;定量限为0.25～0.54μgSe/L。应用该方法测定实际样品,发现不同碎米荠中有机硒形态占总硒的71.2%～87.9%,其中以SeCys_2和SeMet两种硒形态为主,同时还含有少量无机硒和未知形态硒。     

纳米TiO2微柱分离富集测定环境样品中的微量硒

以处理过的纳米TiO2为微柱吸附材料,采用流动注射技术进行微量硒的分离富集,考察了纳米TiO2微柱对Se(IV)的吸附性能,探讨了溶液的pH值、试样流速、试样体积、洗脱液浓度和用量以及干扰离子等因素的影响。实验结果表明,pH在1～6范围内,试样流速为0.5 mL/min,纳米TiO2对Se(IV)具有良好的吸附性能,吸附率可达97%,动态饱和吸附容量为7.92 mg/g;选用1 mL 0.1 mol/L NaOH溶液可将吸附的Se(IV)完全洗脱,富集倍数为40。本法的检出限(3σ)为0.13 mg/L,相对标准偏差为1.56 %。将本法应用于国家标准样品GBW07280的分析,测定值与参考值一致。     

75Se-蛋氨酸的薄层色谱和纸色谱行为

L型~(75)Se-蛋氨酸或DL型~(75)Se-蛋氨酸的无菌溶液,用于肝、胰和甲状旁腺的扫描,进行其病变包括肿瘤的诊断,还可以用来测定动物或人体中蛋白质的转化。~(75)Se蛋氨酸中的主要放化杂质是亚硒酸、砜和亚砜。本工作利用国产滤纸型硅胶薄层片(G)和WhatmanNO.1色层纸(上行、下行以及小型)对~(75)Se-蛋氨酸、亚硒酸、亚砜和砜的薄层色谱和纸色谱行为进行了观察,以期寻找快速、理想的分离方法。     

离子交换色谱-氢化物发生原子荧光法测定水产品中硒的形态

建立了利用离子交换色谱-原子荧光联用技术同时测定水产品中3种硒形态的方法,研究了仪器的工作条件、载流、KBH4浓度对硒荧光信号值的影响。采用Hamilton PRP X-100色谱柱(250×4.1 mm,10μm),以30 mmol/L NH4H2PO4为流动相,可以在10 min内同时分离、检测了硒代胱氨酸SeCys、硒代蛋氨酸SeMet和Se(Ⅳ)。当3种形态的质量浓度范围为0~80μg/L时,各形态均得到良好的线性关系,线性相关系数均大于0.9990,各形态的检出限分别为SeCys 1.66μg/L,SeMet 0.91μg/L,Se(Ⅳ)1.10μg/L,相对标准偏差RSD均小于5%(n=11)。在最佳条件下,应用该方法测定了水产品中的硒形态,3种硒形态化合物加标回收率在87.3%~102.6%之间。方法可满足水产品中硒形态的定量分析。     

催化动力学光度法测定富硒茶叶中痕量硒

本文研究了Se催化过氧化氢氧化甲基橙反应体系测定痕量Se的方法。硒浓度在0～65．7μg／L范围内与褪色反应率lg(A0／A)呈线性关系。方法检出限为0．76μg／L。用于茶叶中硒的测定，结果较满意。     

硫氰酸铵比浊法测定微量硒

在2.4 mol/L HCl介质中, Se(Ⅳ)与过量的硫氰酸铵反应析出单质硒, 并形成稳定的悬浊液, 据此建立了比浊法测定硒的新方法. 实验了酸度、还原剂用量、温度和时间的影响, 确定了最佳测定条件. 选择测定波长为320 nm, 线性范围为0～0.25 μg/mL, 检出限为0.0294 μg/mL. 方法用于测定硒强化营养盐和健康平衡盐中硒含量, 结果与荧光法一致, 相对标准偏差小于1.6% (n=5), 平均回收率为100.0%～101.4%.     

高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法测定富硒食品中5种形态硒的含量

提出了将高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法应用于富硒食品中硒的形态分析。选择木瓜蛋白酶(PP)作为提取剂,在如下优化条件下对样品中5种形态硒进行提取:(1)料液比1g/40mL;(2)50.0g·L~(-1) PP溶液加入量20mL;(3)于60℃水浴中振荡提取8h。提取液冷却并离心后取其上清液,用Hamilton PRP-X100离子交换色谱柱作为固定相,35mmol·L~(-1)磷酸氢二铵溶液(pH 6.0)作为流动相进行高效液相色谱的分离,5种形态硒[Se(Ⅵ)、Se(Ⅳ)、硒代胱氨酸(SeCys_2)、甲基-硒代半胱氨酸(MeSeCys)和硒代蛋氨酸(SeMet)]在16 min内完全分离。将分离所得分别含有5种形态硒的溶液先后引入仪器进行氢化物发生-原子荧光光谱法测定。结果表明:5种形态硒的质量浓度均在5~100μg·L~(-1)内与其对应的峰面积呈线性关系,5种形态硒的检出限(3S/N)为0.39~1.18μg·L~(-1)。按所提出方法对富硒大米样品进行加标回收和精密度试验,测得回收率为80.2%~118%,测定值的相对标准偏差(n=6)为2.1%~8.2%。     

HPLC-ICP-MS或HPLC-FAAS法分离测定硒化合物（英文）

提出了一种用高效液相色谱（HPLC）分离和用电感偶合等离子体质谱仪（ICP－MS）或火焰原子吸收光谱仪（FAAS）作元素专一检测器在线测定硒的化学形态的方法。在优化的HPLC条件下,用ESAⅢ阴离子色谱柱（250mm×4．6mm）,以柠檬酸铵为流动相（5．5mmol／L,pH5．5,流速1．5mL／min）,进样量100μL,分离和测定三甲基硒离子、硒代蛋氨酸、亚硒酸和硒酸盐只需8min。HPLC－FAAS在线分析4种硒化合物的检测限为p（Se）=1mg／L。用超声雾化器作ICP－MS的接口,HPLC－ICP－MS在线分析4种硒化合物的检测限分别为P（Se）=0．34μg／L（亚硒酸）,0．18μg／L（硒代蛋氨酸）,0．08μg／L（三甲基硒离子）和0．07μg／L（硒酸盐）。与气动雾化器接口相比,信号强度增加7至31倍。