偶氮氯膦mA-铌与牛血清白蛋白结合反应及其应用

用分光光度法研究了偶氮氯膦-mA-铌配合物与牛血清白蛋白(BSA)结合反应体系.在pH3.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液(Mcllvaine)中,随着BSA量的增加,偶氮氯膦mA-铌配合物在542 nm波长处吸收峰也随着减小.据此建立了以偶氮氯膦mA-铌配合物为光谱探针,光度法测定蛋白质的新方法.牛血清白蛋白量在0～60 mg/L范围内与体系的褪色程度呈良好的线性关系,其相关系数为r=0.9996,摩尔吸光系数为ε542=3.3×105 L·mol-1·cm-1.方法应用于人血清蛋白的测定.     

偶氮氯膦Ⅲ-铌(Ⅴ)配合物光谱探针测定血清蛋白质

研究了偶氮氯膦Ⅲ-铌（Ⅴ）配合物与牛血清白蛋白（BSA）的反应体系。实验表明,在pH 4.4的HAc-NaAc缓冲溶液中,随着BSA量的增加,偶氮氯膦Ⅲ-铌（Ⅴ）配合物在572 nm波长处吸收峰也随着减小。据此建立了以偶氮氯膦Ⅲ-铌（Ⅴ）配合物为光谱探针,分光光度测定蛋白质的新方法。牛血清白蛋白在0-38 mg/L范围内与体系的褪色程度呈良好的线性关系,其相关系数为r=0.9992,摩尔吸光系数为5ε72=3.40×10^5L.mol^-1.cm^-1。方法已用于人血清蛋白中蛋白质的测定。     

牛血清白蛋白与铬天青S作用机理的研究

用三种不同方法相互对照,求出了铬天青S与牛血清白蛋白的结合常数和结合个数,提出了蛋白质等电点前后或不同铬天青S浓度下,两者存在不同的结合模式。利用Forster非辐射能量转移理论确定了铬天青S在牛血清白蛋白上的结合位置,利用铬天青S对BSA的荧光猝灭,对两者的作用机理作了初步探讨。     

AlF_6~(3-)与BSA相互作用的光谱特性及分析应用

研究了AlF_6~(3-)与牛血清白蛋白(BSA)之间相互作用的光谱特性,考察了各种影响因素和适宜的反应条件,确定了体系的荧光光谱强度与牛血清白蛋白浓度之间的关系,建立了测定蛋白质含量的新方法。研究结果表明,在pH 4.0的三羟甲基氨基甲烷-HCl(Tris-HCl)缓冲介质中,以280 nm光激发,在静电引力和疏水力的作用下,AlF_6~(3-)与BSA之间形成的离子缔合物在330 nm处产生1个较强的荧光峰。当BSA的质量浓度在0.10~30.0μg/m L范围内时,体系的荧光强度变化值ΔF与牛血清白蛋白浓度之间有良好的线性关系,其检出限为5.11 ng/m L。方法可直接用于测定人血清中蛋白质的含量,回收率为103.1%~116.5%。     

藻红-Cu(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白作用的共振光散射研究及其应用

研究了藻红-Cu(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的共振光散射光谱(RLS)和电子吸收光谱的特征,建立了利用金属配合物作为探针测定痕量蛋白质的分析方法.藻红与Cu(Ⅱ)形成的配合物导致RLS强度增大,同时引起电子吸收光谱强度减小.在pH 3.78的酸度条件下,藻红-Cu(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白(BSA)体系...     

铬天青S-Cu(Ⅱ)配合物探针吸光光度法测定蛋白质的研究

在pH 5.0 B-R缓冲介质中,蛋白质与铬天青S-Cu（Ⅱ）配合物发生结合反应形成超分子复合物,使体系的最大吸收波长红移了30 nm,由此提出了普通光度法测定蛋白质（BSA）的新方法。最佳条件下,该复合物的最大吸收波长位于620 nm处,表观摩尔吸光系数ε=6.13×105L.mol-1.cm-1,蛋白质（BSA）量在10-60μg/mL范围内遵循比耳定律。方法可直接用于蛋清中蛋白质的测定,回收率为100%-105%。     

借对乙酰基偶氮羧p-铕(Ⅲ)络合物作光度探针测定生物样品中蛋白质

在pH 3.0的Britton-Robinson缓冲介质中,蛋白质能与铕(Ⅲ)-对乙酰基偶氮羧p形成复合物,最大吸收峰波长为695 nm,比络合物探针本身红移145 nm。可用于生物样品中蛋白质的测定,牛血清白蛋白(BSA)的线性范围为0.010~0.030 g.L-1,相关系数为0.995 4;人血清白蛋白(HAS)的线性范围为0.005~0.025 g.L-1,相关系数为0.994 7,应用于测定生物试样中的总蛋白质,RSD小于6.5%,回收率在98.4%~103.7%。     

二甲酚橙-锆(Ⅳ)配合物光度法测定蛋白质

在酸性溶液中,蛋白质与二甲酚橙-锆(Ⅳ)配合物能够相互作用形成超分子复合物,其最大吸收波长较二甲酚橙-锆(Ⅳ)配合物红移了50 nm。在实验选定最佳条件下,600 nm波长处的吸光度与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HAS)均在0.2~16μg/mL范围内呈线性关系,相对标准偏差为0.83%(n=7),检出限为0.1 mg/L。该法灵敏度高,选择性好,用于人血清总蛋白含量的测定,结果满意。     

蛋白质的偶氮胂Ⅲ-钡(Ⅱ)配合物光谱探针测定

研究了偶氮胂Ⅲ-Ba(Ⅱ)配合物与牛血清白蛋白(BSA)三体系复合物的吸收光谱,建立了一种新的蛋白质定量分析方法。研究发现,在表面活性剂阿拉伯树胶(gum arobic)存在下的酸性溶液中,偶氮胂Ⅲ-Ba(Ⅱ)配合物与BSA发生反应形成三元复合物,引起吸收光谱发生红移,吸收峰明显增高。摩尔吸光系数为ε611=1.01×106L.mol-1.cm-1,BSA的质量浓度在0~67 mg/L范围内服从比尔定律。用摩尔比法研究了此配合物与BSA的最大结合数为51。该法灵敏度高,选择性好,用于实际血清样品总蛋白的测定,与双缩脲法相关性良好。     

Cr(Ⅵ)与牛血清白蛋白的相互作用

采用荧光光谱、紫外光谱、CD光谱法研究了K2Cr2O7与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。实验结果表明,铬(Ⅵ)使BSA的紫外吸收降低,峰位红移,表明铬(Ⅵ)与BSA发生较强的相互作用;铬(Ⅵ)酸根离子与BSA形成基态复合物导致BSA内源荧光猝灭,猝灭机理主要为静态猝灭。测定了不同温度下该反应的热力学参数,ΔGθ0,ΔHθ和ΔSθ分别为-12.60kJ/mol和56.60J/(mol.k),表明上述作用过程是一个熵增加、自由能降低的自发分子间作用过程,铬(Ⅵ)酸根离子与BSA之间以静电作用力为主;非辐射能量转移机理确定了铬(Ⅵ)与牛血清白蛋白中色氨酸残基之间的距离r=2.85nm;同步荧光和CD光谱研究表明,铬(Ⅵ)使BSA的二级结构发生改变,α-螺旋含量降低,色氨酸残基所处微环境的极性减小。     

培氟沙星-铽(Ⅲ)-牛血清白蛋白体系的荧光光谱及其应用

在pH 8.2的Tris-HCl缓冲溶液中, Tb3+与培氟沙星(PEFX)形成的配合物受290 nm紫外光激发发出Tb3+的特征荧光峰, 加入牛血清白蛋白(BSA)能大大增强体系的荧光强度, 由此建立了PEFX-Tb3+ 配合物探针测定BSA的方法. 与PEFX-Tb3+二元配合物相比, PEFX-Tb3+-BSA三元体系荧光强度显著增强. 研究了反应的最佳条件, 并对PEFX-Tb3+-BSA荧光增强作用的机理进行了探讨.     

吡蚜酮与牛血清白蛋白的相互作用

利用紫外吸收、荧光、同步荧光光谱及圆二色谱研究了吡蚜酮与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用. 结果发现, 吡蚜酮使BSA的紫外吸收峰强度降低, 峰位红移; BSA的特征荧光峰猝灭, 荧光猝灭常数KSV随着温度的升高而降低, 表明吡蚜酮与BSA发生了较强的相互作用, 且吡蚜酮对BSA的荧光猝灭机制属于静态猝灭. 计算了不同温度下的结合常数和结合位点数; 由van′t Hoff方程计算出体系的ΔH和ΔS值, 得出二者之间的作用力主要为氢键和范德华力; 根据非辐射能量转移理论确定了给体-受体间的结合距离r=2.4 nm. 采用同步荧光光谱和圆二色谱考察了吡蚜酮对牛血清白蛋白构象的影响.     

邻菲咯啉合铜配合物与牛血清白蛋白的相互作用

利用荧光光谱法研究了两种配合物,[Cu（phen）（L-Phe）（H2O）]ClO4（1）（L-Phe为L-苯丙氨酸根）和[Cu（phen）（Gly）（H2O）]ClO4·2．5H2O（2）（Cly为甘氨酸根）,与牛血清白蛋白（BSA）的相互作用。结果表明,牛血清白蛋白的荧光强度随着配合物浓度的增大而逐渐降低,配合物（2）与BSA的结合常数大于配合物（1）与BSA的结合常数,牛血清白蛋白对配合物的结合位点数为1,荧光猝灭作用机理为静态猝灭．     

分光光度法测定片剂中的盐酸氯丙嗪

在pH为5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中,盐酸氯丙嗪与铁(Ⅲ)、铬天青S反应生成蓝色三元配合物,其最大吸收波长为660nm。当铁(Ⅲ)和铬天青S的含量固定时,盐酸氯丙嗪的质量浓度在0.20~20mg·L-1范围内与吸光度呈线性关系,检出限(3s/k)为0.058mg·L-1。应用此方法测定片剂中盐酸氯丙嗪含量,加标回收率在97.8%~98.5%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在1.1%~1.5%之间。     

邻菲咯啉乳酸镍配合物的合成与表征及其与牛血清白蛋白相互作用的荧光分析

利用溶液法合成了配合物[Ni(Hlact)2(phen)]·2H2O(1),并对该配合物进行了元素分析、红外光谱和X-射线单晶衍射表征。通过荧光光谱法研究了不同温度下配合物1与牛血清白蛋白相互作用时的荧光强度的变化,计算了在不同温度下,配合物1与牛血清白蛋白(BSA)的结合常数、结合位点数以及热力学函数,并进一步讨论了配合物1与BSA相互作用时的作用力类型和两者之间的距离。结果表明,配合物1对牛血清白蛋白的荧光猝灭为静态猝灭过程,它与牛血清白蛋白的相互作用有一个位点,结合常数的平均值5.06×105L·mol-1,作用距离为2.35 nm,相互作用力表现为氢键和范德华力。     

微乳液增敏铬天青S分光光度法测定微量铁

研究十六烷基三甲基溴化铵 -正戊醇 -正庚烷 -水 (水包油型 )微乳液介质中Fe (Ⅲ )与铬天青S的显色反应。在pH =6 .0的乙酸 -乙酸铵缓冲溶液中 ,Fe(Ⅲ )与铬天青S形成配合物 ,配合物的最大吸收波长为 6 5 0nm ,表观摩尔吸光系数为 2 .5× 10 5L/ (mol·cm)。该体系较以水为介质的体系有显著的增敏作用。Fe (Ⅲ )含量在 0～ 0 .16 μg/mL范围内符合比耳定律。该法直接用于Fe2 O3 样品中铁的测定 ,测定结果的相对标准偏差为 1.8%～ 2 .2 % ,回收率为 99.2 %～ 10 2 .6 %。     

培氟沙星一铽（Ⅲ）-牛血清白蛋白体系的荧光光谱及其应用

在pH8.2的％Tris-HCl缓冲溶液中，Tb^3＋与培氟沙（PEFX）成的配合物受290nm紫外光激发发出Tb^3＋的特征荧光峰，加入牛血清白蛋白（BSA）能大大增强体系的荧光强度，由此建立了PEFX-Tb^3＋配合物探针测定BSA的方法。与PEFX-Tb^3＋二元配合物相比，PEFX-Tb^3＋-BSA三元体系荧光强度显著增强。研究了反应的最佳条件，并对PEFX-Tb^3＋-BSA荧光增强作用的机理进行了探讨。     

以固绿为试剂流动注射光度法测定血清蛋白质

在pH 1.52的Clark-Lubs缓冲介质中,固绿与血清白蛋白作用,在室温下能迅速结合形成复合物,其最大吸收波长为670 nm,以此反应为基础并结合流动注射技术,提出了血清蛋白质的光度测定法。牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HAS)质量浓度在5～110 mg·L~(-1)范围内与吸光度成正比,检出限(3S/N)分别为0.52 mg·L~(-1)和0.41 mg·L~(-1)。应用于尿液及人血清中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝G-250法相符。     

天青A-BSA共振散射光谱研究及分析应用

考察了天青A与牛血清白蛋白(BSA)混合体系的共振散射光谱,发现天青A的加入能引起BSA的共振散射光谱强度明显增强,通过优化实验条件建立了测定蛋白的新方法.在p H=3.78的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液中,固定天青A浓度为1.00×10-5mol/L,当牛血清白蛋白浓度在8.80×10-8~4.40×10-6mol/L范围内与体系的共振光散射强度值呈良好的线性关系,线性方程为IRLS=69.744c(mol/L)+59.359,相关系数r=0.992 8,检出限为3.28×10-8mol/L,方法应用于牛尿样品中白蛋白含量的测定,回收率在97%~106%之间,表明方法具有较高的准确度,结果令人满意.     

银纳米线与BSA相互作用的光谱学研究

主要研究了粒径为60 nm的银纳米线与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用.利用紫外可见吸收光谱法和荧光光谱法对反应体系进行了光谱学实验研究.实验结果表明,随着银纳米线溶液浓度的增加,反应体系的紫外吸收峰强度增大.但是,荧光强度却明显猝灭.由荧光结果可以得知银纳米线和BSA的相互作用过程是静态猝灭;同步荧光光谱结果表明,银纳米线对蛋白质周围的环境产生了影响.由变温荧光实验结果还可获得银纳米线与BSA相互作用的结合常数、结合位点数以及吉布斯自由能变.由热力学数据可知银纳米与牛血清白蛋白可以自发结合发生反应,且主要结合力为范德华力和氢键.