梯度液相色谱保留时间公式在梯形梯度洗脱研究中的应用

根据前期得到的梯度液相色谱保留时间计算公式,在不指定溶剂强度模型形式的前提下,探讨了梯形梯度洗脱的一些特点。对于溶质在梯形梯度坡度上流出时的情形,推导得到溶质流出色谱柱所对应的流动相组成(φ_R)随梯度斜率(B)变化的表达式。该公式表明,在该情形中φ_R将会随着B值的增加而增加。对于溶质在梯形梯度最后一个等度区间流出时的情形,如果初始和终止流动相组成保持不变而仅有梯度的斜率发生变化时,从理论上证明了溶质保留时间(t_R)与梯度斜率的倒数(1/B)之间呈线性关系。实验中以C18色谱柱为固定相,甲醇-水为流动相,联苯为样品,测定了不同流动相组成以及梯形梯度条件下的保留时间,所得到的实验值与理论值吻合,从而验证了理论方法的正确性。     

高效液相色谱中用于梯度洗脱的有机溶剂的纯度测试

在反相高效液相色谱中,空白梯度基线的漂移和杂质峰,可能由含水溶剂和有机溶剂中杂质所引起的。当含水溶剂通过预柱在线净化后,根据空白梯度色谱图可测试有机溶剂的纯度。按照此法,对国产不同等级的乙腈和甲醇进行了测试,指明这些试剂用于梯度洗脱的可能性。     

高效液相色谱梯度洗脱中弱溶剂的在线净化

利用一个在线净化预柱减少了高压梯度洗脱中由于试剂纯度不够造成的基线噪音。预柱的位置在溶剂泵Ａ和流动相混合器之间,由一个六通阀来控制。在线净化结果良好,有效地除去了空白梯度色谱图中的杂质峰,提高了梯度洗脱的分离重现性。该方法对开展梯度洗脱有实用价值。     

计算机预测液相色谱梯度洗脱程序

用高效液相色谱法分析复杂样品时,往往会遇到样品中各物质的保留时间分布很宽的问题。溶剂梯度洗脱技术为解决这一问题开辟了一条有效的途径。但此技术在应用过程中,由于大多凭借经验设定溶剂梯度洗脱程序,所以,建立起一个比较好的程序就需要摸索较长的时间。近年来,国内外某些色谱工作者试图用计算机预测溶剂梯度洗脱程序,但有关详细情况迄今尚未见报道。     

高效液相色谱梯度洗脱同时测定化妆品中防腐剂、抗氧化剂和杀菌剂

建立了一种灵敏、快速的高效液相色谱梯度洗脱同时测定化妆品中防腐剂、抗氧化剂和杀菌剂的方法。采用C8柱,以甲醇和水为流动相梯度洗脱。在检测波长273nm用二极管阵列检测器,17min内可将4种防腐剂、2种抗氧化剂和2种杀菌剂分离测定。方法快速准确,用于实际样品的测定。     

反相高效液相色谱双梯度洗脱分离肽混合物及质谱分析

复杂肽段混合物的有效分离是高覆盖率地鉴定蛋白质混合物的前提。“鸟枪法”(Shotgun)蛋白质组学研究策略通常采用蛋白酶切、二维液相色谱-串联质谱分析肽段混合物从而鉴定蛋白质,其中高效率地分离肽段混合物是关键步骤之一。本文通过pH梯度结合有机溶剂梯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)进行一维液相色谱分离,按等时间间隔收集馏分并将一个梯度的前段的一个馏分与后段一个馏分混合,然后进行纳升级液相色谱-质谱联用(nanoRPLC-MS/MS)分析。将该方法应用于酵母蛋白质的分离和鉴定,实验结果为: 与常规的强阳离子色谱-反相液相色谱-质谱分离鉴定方法相比,采用pH梯度结合有机相梯度的RP-HPLC-RPLC-MS分离鉴定方法多鉴定到567个酵母蛋白质(簇,含有3035个唯一肽段);其中鉴定到肽段的pI分布范围为3.42～12.01,相对分子质量范围为587.67～3499.79;蛋白质的pI分布范围为3.82～12.19,相对分子质量范围为3446.55～432905。该结果表明这种方法在复杂体系蛋白质组分离鉴定中具有明显的优势,在蛋白质组学研究中有较好的应用前景。     

色谱保留值方程的统一形式

本文采用点阵模型,运用统计热力学方法推导出色谱保留值方程的统一形式。根据不同的条件从此统一形式可获得描述气-固色谱、气-液色谱、液-固色谱、液-液色谱以及超临界流体色谱保留值规律的方程。上述方程均采用实验数据予以验证。     

高效液相色谱中同系物保留值收敛现象的研究

在讨论影响溶质保留行为因素的基础上，建立了描述同系物保留值收敛现象的一般模型，对12种同系物（共38组数据）在6种不同组成的二元流动相和8种固定相中的保留值进行了回归分析，相关系数r≥0．974，标准偏差SD≤0．05．绘制了这些同系物的三维保留图形及投影图，并据此对同系物收敛现象及其物理意义进行了讨论，建立了计算收敛点坐标的简便方法．     

梯度洗脱高效液相色谱法快速检测厌氧菌代谢物中的有机酸

提出了一种快速分析厌氧细菌代谢物中5种有机酸的高效液相色谱方法。该方法采用乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液(pH 2.8)作为流动相,流速和流动相中两种组分的比例均采用四元泵程序梯度洗脱方法控制,检测波长为215 nm,柱温30℃时,能够快速、准确地分离和测定细菌培养基中的甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸和丙酸等5种有机酸,总分析时间只需4 m in。方法的相对标准偏差为0.26%~1.26%,回收率95.0%~100.8%,各种有机酸的线性相关系数r≥0.99981,具有较高的精密度和准确度,可以用于细菌代谢物中有机酸的分析。     

梯度洗脱高效液相色谱法测定红花玉兰中4种植物激素

建立了梯度洗脱高效液相色谱法测定红花玉兰中赤霉素(GA3)、生长素(IAA)、脱落酸(ABA)和玉米素(ZT)等4种植物激素的方法。采用Agilent ZORBAX SB-C18柱和紫外检测器,以甲醇和0.1 mol/L乙酸作为流动相进行梯度洗脱,流速1 mL/min,进样量10μL。GA3,IAA和ABA的检测波长为254 nm,柱温35℃;ZT的检测波长为270 nm,柱温40℃。采用外标法进行定量测定,4种植物激素的相关系数均大于0.9990。4种激素的回收率为98.1%~125.2%,相对标准偏差为0.31%~0.92%,日内和日间精密度RSD均<10%。方法可适用于红花玉兰多种组织的植物激素测定,为红花玉兰生长发育特性的研究奠定了基础。     

反相高效液相色谱梯度洗脱同时测定复方茶碱片中7组分的含量

建立了一种灵敏、快速的反相高效液相色谱梯度洗脱方法，用于同时测定复方茶碱片中7组分的含量。采用YWG C18柱，以甲醇-磷酸二氢钠为流动相，用二极管阵列检测器，检测波长为214nm,15min即可将7种组分分离测定。该方法快速淮确，线性范围广，用于实际样品的测定，结果满意。     

从分子微观参数预测反相色谱保留值方程系数

在考虑氢键作用能随流动相组成改变的情况下,重新推导了液相色谱保留值方程,进而得到液相色谱保留值方程系数与分子微观参数之间的关系。在分子母体结构相同条件下,提出采用五个系数预测反相色谱保留值的方法,并用文献数据给予验证。     

计算机辅助高效液相色谱梯度洗脱的优化

本文介绍了计算机辅助反相高效液相色谱梯度洗脱优化分离的方法。首先采用混合设计法，通过９个预试验建立目标函数，然后运用双因素（初始流动相组成Ｃ和梯度时间Ｔ）扫描技术，由计算机给出优化分离条件，实验结果和预示完全一致。     

反相液相色谱三元流动相组成保留值方程的考察

]本文在反相三元冲洗剂条件下,验证了保留值方程lnk'=a+b1lncB1+b2lncB2+C1CB1+C2CB2,详细讨论了其中的参数,并提出了计算这些参数的方法。     

梯度洗脱

当前国内分析测试实验室已普遍配置高效液相色谱仪.为了充分发挥该仪器的作用,简要介绍了梯度洗脱的特点、基础理论、方法的建立、问题的排除和仪器性能测试,着重于梯度洗脱的实际运用,供色谱工作者参考.     

反相液相色谱保留值的预测模式

液相色谱保留值的预测一直是色谱领域里研究最为活跃的领域之一,寻找一种以最少系数求算和预测色谱保留值是色谱工作者的长期研究的目标,但目前,仍没有真正的预测方法。我们在液相色谱保留值基本方程的基础上,曾对不同C_(18)的担体上的保留规律进行过研究,并从中引入了溶质lnk′=A C·C_B BlnC_B (1)作用指数的概念,作用指数即为方程(1)中的参数C(参数B在反相色谱中忽略),CB为二元冲洗剂中强冲洗组分的浓度。本文从溶质的作用指数出发来探讨反相液相色谱保留值的预测模式。     

液相色谱梯度洗脱中的谱带压缩效应

谱带压缩效应是梯度洗脱区别于等度洗脱的重要特征。经典的范德姆特(van Deemter)理论塔板高度方程基于等度洗脱推导得到,因此不能对谱带压缩效应进行描述。在梯度洗脱中,保留因子(k)会随流动相组成(φ)的改变而发生变化,这就使得对梯度洗脱机理的研究要比等度洗脱复杂许多。该文对近10年来谱带压缩效应的研究进展,特别是溶剂强度模型(即描述ln k与φ关系的数学表达式)的非线性特征对谱带压缩因子(G)的影响进行了述评,指出为了更好地认识谱带压缩效应需要将这种非线性因素考虑在内。     

气相色谱与液相色谱保留值的换算方法

根据色谱热力学理论,在色谱保留值公式统一形式的基础上导出了气相色谱保留系数（I）与反相液相色谱保留公式参数a,c之间的关系式,证明结构类似化合物的a,c值与保留指数呈线性关系,同时存在氢键作用能、偶极矩作用的影响,从而提出了色相色谱与反相液相色谱保留值换算的方法;该理论为氯代芳烃的文献数据所证实。     

关于液相色谱保留值公式的补充

本文介绍了液相色谱保留值公式研究的历史,根据色谱保留值公式的统一形式运用液相吸附公式得到ｌｎｋ＇＝Ａ＋Ｂｌｎ（Ｃ＿（Ｂ＿１）／θ＿（Ｂ＿１））＋ＣＣ＿（Ｂ＿１）。当强溶剂浓度Ｃ＿（Ｂ＿１）不至太低时有ｌｎｋ＇≈Ａ＋ＢｌｎＣ＿（Ｂ＿１）＋ＣＣ＿（Ｂ＿１）：作者证明了当强溶剂浓度Ｃ＿（Ｂ＿１）→０时,ｋ＇→常数,从而纠正了长期存在于色谱热力学理论中Ｃ＿（Ｂ＿１）→０,ｋ＇→∞的谬误。