超高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽毛发中利巴韦林及其代谢物

建立了一种测定畜禽毛发中利巴韦林及其代谢物1H-1,2,4-三氮唑-3-甲酰胺(TCONH2)残留的检测方法。1%十二烷基硫酸钠清洗毛发,2%甲酸-甲醇(2:98,V/V)溶液提取,13C-利巴韦林(13CRBV)内标法定量,乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)和十八烷基硅烷(C18)基质分散净化,Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱分离,电喷雾串联质谱多反应监测模式测定。利巴韦林和TCONH2在毛发中线性关系良好(R^2>0.99)在2,10,100μg/kg3个添加水平下利巴韦林和代谢物TCONH2的回收率分别为101.5%~108.5%和98.5%~101.5%相对标准偏差均小于7%,检出限和定量限分别为0.2μg/kg和0.5μg/kg。该方法适合于畜禽毛发中违禁抗病毒药物利巴韦林及其代谢物TCONH2的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法分析鸡蛋中利巴韦林及其代谢物残留

建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时快速测定鸡蛋中利巴韦林及其两种主要代谢物 TCONH2和RTCOOH 的分析检测方法。样品采用乙腈-水(9∶1, V/ V)提取,乙腈饱和正己烷除脂,C18结合 GCB 进行固相分散萃取除杂,Agilent ZORBAX SB-Aq 色谱柱(100 mm ×3.0 mm,1.8μm)分离,超高效液相色谱-串联质谱测定。结果表明：利巴韦林、TCONH2和 RTCOOH 分别在2.0~200μg/ L,0.5~200μg/ L,5.0~200μg/ L 浓度范围内,线性良好,相关系数 R2>0.99,检出限分别为0.54,0.09和1.54μg/ L,定量限分别为1.79,0.31和5.13μg/ L。在5.0,10.0和50.0μg/ L 加标水平下,利巴韦林和 RTCOOH 回收率分别为96.1%~99.6%和42.9%~58.3%;在0.5,2.0和5.0μg/ L 加标水平下,TCONH2的回收率为75.9%~106.7%,相对标准偏差均为4.2%~12.7%。实际样品测定结果表明,本方法操作简单、快速、准确,能够满足鸡蛋中利巴韦林及其两种主要代谢物的分析检测。     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定云南野生菌中甲拌磷及其代谢物

建立了云南野生菌中甲拌磷及其代谢物残留量的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱测定方法。野生菌样品经1%HAc-乙腈提取后,利用PSA填料净化,过滤膜后分析,正离子多反应监测模式检测,外标法定量。甲拌磷及其代谢物在0.05~5.0μg/L浓度范围内具有较好线性关系,检出限范围为0.008~0.08μg/kg,定量限范围为0.03~0.30μg/kg。在3个加标浓度下,平均回收率范围为73.3%~98.5%,相对标准偏差范围为4.4%~9.9%。该方法能够满足云南野生菌中甲拌磷及其代谢物残留分析的要求。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定茶叶和土壤中丁醚脲及其代谢物的残留

建立了超高效液相色谱-串联质谱同时快速测定茶叶和土壤中丁醚脲及其代谢物残留量的方法.样品采用乙腈提取,加入乙酸铵和NaCl进行液液分配,PSA结合GCB进行同相分散萃取除杂质,Waters AcquityUPLC BEH C18柱(100 mm× 2.1 mm×1.7 μm)分离,超高效液相色谱-串联质谱法测定.在2....     

超声提取-超高效液相色谱-串联质谱法测定毛发中常见毒品及代谢物的含量

建立了超声提取-超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定毛发中常见毒品及代谢物含量的方法。称取洗涤（水、二氯甲烷、丙酮依次振荡洗涤各1次）并晾干后的毛发样品40～60 mg,将其剪成约1 mm小段,加入3.2 mm的破碎珠6颗,冷冻破碎5 min;再称取破碎后的毛发样品20 mg,加入1 mL甲醇,于0℃冰水浴中超声提取20 min,上清液用0.25μm有机滤膜过滤,滤液供UHPLC-MS/MS测定。结果显示：O⁶-单乙酰吗啡（6-AM）、吗啡（MOR）、氯胺酮（K粉）、甲基苯丙胺（MAMP）、苯丙胺（AMP）、可卡因（COC）、苯甲酰爱康宁（BZE）、3,4-亚甲双氧甲基苯丙胺（MDMA）、3,4-亚甲双氧苯丙胺（MDA）、3,4-亚甲双氧乙基苯丙胺（MDEA）、可待因（COD）、去甲氯胺酮（NK）、Δ⁹-四氢大麻酚（THC）、大麻二酚（CBD）、大麻酚（CBN）等15种目标物的质量分数在一定范围内与其对应的峰面积呈线性关系,BZE、THC、CBD、COC、CBN的检出限（3S/N）均为0.001 ng·mg^-1<...     

超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼虾中5种硝基咪唑类药物及其代谢物

建立超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼虾中5种硝基咪唑类药物及其代谢物的分析方法。样品中的目标物经乙酸乙酯提取,正己烷去脂,PCX固相萃取柱净化,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱分离,采用电喷雾正离子模式,多反应监测（MRM）采集数据进行定性与定量分析,外标法定量。5种硝基咪唑类药物及其代谢物在0.5～20 ng/mL质量浓度范围内有良好线性,相关系数均大于0.99,方法定量限为0.2～0.5μg/kg,不同鱼虾样品中三个加标水平的平均回收率为76.5%～106%,相对标准偏差为1.97%～13.4%(n=6)。该方法具有灵敏度高、重现性佳、回收率高、基质干扰少、高效等优点,满足鱼虾中5种硝基咪唑类药物及其代谢物的定性定量检测要求。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定小鼠纹状体中多巴胺及其代谢物的含量

提出了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小鼠纹状体中多巴胺(DA)及其代谢物高原儿茶酸(DOPAC)与高香草酸(HVA)含量的方法。取小鼠纹状体约10 mg,用200μL 2%(体积分数)甲酸溶液提取、离心。取上清液80μL,加入40μg·L^-1异丙肾上腺素(内标)溶液10μL和含0.1%(体积分数,下同)乙酸的甲醇溶液10μL,涡旋混匀,再加入100μL甲醇,涡旋、离心。上清液中DA及其代谢物在Gemini NX-C₁₈色谱柱上分离,以不同体积比的0.1%乙酸溶液和含0.1%乙酸的甲醇溶液混合液为流动相进行梯度洗脱,质谱分析采用电喷雾离子源正、负离子模式,选择反应监测(SRM)模式扫描。结果表明,3种目标物在7.00 min内能完成测定。DA、DOPAC和HVA标准曲线的线性范围分别为0.05～100,0.5～1 000,0.25～500μg·L^-1,检出限分别为0.015,0.150,0.075μg·L^-1。按照标准加入法进行回收试验,回收率为84.4%～117%,日内精密度和日间精密度试验所得...     

高效液相色谱-串联质谱法测定蜂蜜中的红霉素及其代谢物

建立了高效液相色谱-串联质谱法检测蜂蜜中红霉素及其代谢物红霉素A烯醇醚和脱水红霉素A的测定方法。以pH 7.0的磷酸盐缓冲液为提取剂,经HLB小柱净化富集后,采用高效液相色谱串联质谱法测定蜂蜜中红霉素及其代谢物的含量。该方法前处理简单,采用内标法定量,方法的线性范围为2.0~100.0μg/L,相关系数大于0.996,红霉素及其两种主要代谢物的检出限和定量下限分别为0.5μg/kg和2.0μg/kg,回收率范围为70.5%~109.2%,RSD小于10%。方法的回收率稳定且重现性较好,可用于蜂蜜中红霉素及其代谢物的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法快速测定牛奶中螺虫乙酯及其代谢物残留

建立了超高效液相色谱-串联质谱快速测定牛奶中螺虫乙酯及其代谢物残留的分析方法。牛奶经乙腈沉淀蛋白质,正己烷脱脂后,采用ESI源,在MRM模式下测定螺虫乙酯及其代谢物。结果表明,在0.5~50μg/L范围内,待测物色谱峰面积与其质量浓度间的线性关系良好(相关系数均大于0.998),检出限(LODs,S/N=3)和定量限(LOQs,S/N=10)分别为0.05~0.30μg/L和0.17~1.00μg/L。当添加水平为1.0、2.0和10μg/L时,方法的加标回收率为80.0%~108.8%,相对标准偏差(RSD)为4.8%~15.2%(n=6)。该法快速,灵敏,准确,能够满足牛奶中螺虫乙酯及其代谢物残留限量的检测要求。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定畜禽毛发中4种违禁氟喹诺酮类兽药

采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,通过优化在畜禽毛发中药物的提取、水解、净化等前处理过程,建立了一种测定畜禽毛发中4种违禁氟喹诺酮类药物含量的分析方法。毛发样品经1%十二烷基硫酸钠溶液清洗,乙腈-1%HAc溶液提取,PSA/C18净化管净化,通过C_(18)色谱柱分离,电喷雾串联质谱多反应监测模式测定。结果表明,培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星在0.2～20μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.993,方法回收率在87.09%～114.95%范围内,相对标准偏差为0.13%～4.92%。培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星的检出限分别为0.08、0.05、0.05、0.08μg/kg,定量限分别为0.2、0.1、0.1、0.2μg/kg。该方法样品前处理简单、耗时短、选择性强、灵敏度高,适用于畜禽毛发中上述4种违禁氟喹诺酮类药物的定性定量分析。     

柱前衍生化结合LC-MS~n分析人尿中茶碱及其代谢物

采用固相萃取结合化学衍生化的样品柱前预处理方法,利用液相色谱-电喷雾/多级质谱联用技术(LC-ESI/MSn),对人经口服给药后尿液中的茶碱及其代谢产物进行分析,探讨了茶碱、代谢物及相关衍生物的质谱裂解行为,推测茶碱在人体内的代谢途径。尿样经Bond Elute C18小柱固相萃取,收集甲醇洗脱部分在50℃下氮气吹干,以N,N-二甲氨基氯乙烷为衍生试剂进行衍生化。以Shimpack C18为色谱柱、甲醇-水-甲酸(体积比20∶80∶1)为流动相,在正离子模式下对尿样中茶碱、代谢物及其衍生化产物进行LC-ESI/MSn分析。采用上述方法,共分析鉴定了人尿中的茶碱和4种代谢物(1-甲基尿酸、1,3-二甲基尿酸、1-甲基-N-乙酰化物、3-甲基黄嘌呤),其中1种代谢物未见文献报道。在正离子模式下,茶碱及代谢物的二级质谱大多丢失18 u,28 u或57 u片段生成一系列碎片离子,而衍生化产物的二级质谱均有规律地丢失45 u片段生成一系列碎片离子。通过与未经衍生化的尿样比较发现,衍生化可明显增强茶碱、1-甲基尿酸和3-甲基黄嘌呤的质谱检测灵敏度。本研究补充了茶碱在人体内的代谢轮廓,可为灵敏检测生物样本中茶碱、代谢物及其结构类似物提供借鉴。     

超高效液相色谱-串联质谱联用法对水产品中亚甲基蓝及其代谢物残留的检测

建立了超高效液相色谱-串联质谱同时检测水产品中亚甲基蓝及其代谢物天青A、天青B、天青C残留的方法.试样中的残留药物采用离子对试剂提取,正己烷脱脂净化,超高效液相色谱-串联质谱法测定.对前处理及液相色谱分离条件进行了探讨与优化.4种分析物在0.25 ～50 μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,方法定量下限可达0.5 μg/kg.在0.5、1.0、5.0 μg/kg范围内,平均加标回收率为80% ～91%;相对标准偏差为6.38% ～9.41%.方法灵敏、稳定,可满足水产品中亚甲基蓝及其代谢物残留的检测与确证及对药物动力学研究的需要.     

Lysophosphatidylcholine Biomarkers of Lung Cancer Detected by Ultra-performance Liquid Chromatography Coupled with Quadrupole Time-of-flight Mass Spectrometry

Centrifugal ultrafiltration after methanol extraction of whole plasma was used as an optimal condition for the preparation of blood plasma before metabonomic studies. The plasma samples from 102 lung cancer patients and 34 healthy volunteers were prepared with this approach. With ultra-performance liquid chromatography(UPLC) coupled with quadrupole time-of-flight mass spectrometry(Q-TOF MS) analysis, the samples were investigated in order to find potential disease biomarkers. After data acquisition, orthogonal signal correction partial least squares models were built to differentiate the healthy volunteers from lung cancer patients and to identify metabolites that showed significantly different expression between the two groups. Several metabolite ions were identified as potential biomarkers according to the variable importance in the project(VIP) value in both ion modes. Five lysophosphatidylcholines were further identified as specifically lysoPC 16:0, isomer of lysoPC 16:0, lysoPC 18:0, lysoPC 18:1 and lysoPC 18:2. These results suggest that UPLC coupled with Q-TOF MS is an effective technique for the analysis of plasma metabolites in metabonomic studies.     

液质联用检测人体血浆中的阿奇霉素

采用高效液相色谱串联质谱技术(HPLC-MS/MS)测定人体血浆中阿奇霉素的浓度. 选用Lichrospher CN 柱, 流动相为V(乙腈)∶V(水)=40∶60(水中含体积分数为0.1%的甲酸和质量分数为0.1%的醋酸铵), 电喷雾离子源正离子方式检测. 该方法在2.34~600 ng/mL范围内线性关系良好, 定量下限为2.34 ng/mL(S/N>10), 回收率94.13%~97.42%, 基质效应92.50%~107.87%, 日内和日间测定药物浓度的相对标准偏差(RSD)均小于10.0%. 用该方法测定了24名男性健康志愿者单剂量口服500 mg阿奇霉素试剂和参比制剂于192 h内的血药浓度, 并进行了生物等效性研究.     

液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用分析河豚毒素

应用C18反相色谱柱和HILIC亲水作用色谱柱,建立了河豚毒素(TTX)的液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用分析方法。应用反相色谱法,在选择离子监测(SIM)模式下,对TTX的分析具有良好的线性响应(r=0.9992),方法检出限(S/N=3)为120pg,相对标准偏差(RSD)低于10%;应用亲水色谱法,在SIM和选择反应监测(SRM)模式下同样具有良好的线性响应(r=0.9996和r=0.9998),检出限(S/N=3)分别为15pg和3.75pg,在SIM模式下RSD低于10%,在SRM模式下RSD处于10%~20%之间。亲水作用色谱柱大大提高了方法的灵敏度,由于SIM模式具有较高的精密度,建议应用HILIC色谱柱的SIM模式定量分析TTX。     

Ultra-Performance Liquid Chromatography Coupled with Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry for Rapid Determination of the Metabolites of Baicalin Produced by Human Intestinal Bacteria

Baicalin, mainly isolated from Scutllaria baicalensis, has been reported to possess a wide range of biological activities. However, the information about the metabolic route and metabolites of baicalin was limited to the role of the human intestinal bacterial mixture. In this paper, four strains of bacteria including Bacteroides sp. 33 and 56, and Veillonella sp. 23 and 71 were isolated from human intestinal bacterial mixture and studied for their abilities to convert baicalin to different metabolites. A highly sensitive and specific ultraperformance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight mass spectrometry (UPLC-Q-TOF/MS) method combined with mass defect filtering (MDF) provides high throughput capabilities for drug metabolism study. The chromatographic separation was performed on a 1.7 µm particle size C 18 column using gradient elution system. The components in the extract were identified and confirmed according to the mass spectrometric fragmentation mechanisms, MS/MS fragment ions and relevant literature by means of electrospray ionization mass spectrometry in negative ion mode. With this method, a total of 4 metabolites were identified based on MS and MS/MS data. The results indicated that hydrogenation, methylation, and deglycosylation were the major metabolic pathways of baicalin in vitro. The present study provides important information about the metabolism of baicalin which will be helpful for fully understanding the impact of the intestinal bacteria on this active component. Furthermore, this work demonstrated the potential of the ultraperformance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight mass spectrometry approach for a rapid, simple, reliable, and automated identification of metabolites of natural products.     

反相高效液相色谱/电喷雾质谱法测定血浆中盐酸舍曲林

采用反相高效液相色谱-电喷雾质谱法(LC-ESI/MS)测定人体血浆中盐酸舍曲林。以盐酸丙咪嗪为内标,按内标法定量。血浆样品经pH 10.00碳酸钠溶液碱化,加入甲基叔丁基醚萃取,离心分离,取上清液吹干,用流动相溶解进样。色谱柱:RP-Extend-C18(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温:40℃;流动相:pH 3.00的三氟乙酸溶液-甲醇(40∶60,V/V),流速0.6 mL/m in。质谱采用选择离子监控模式,检测离子的核质比(m/z)分别是281(丙咪嗪)和159(舍曲林)。舍曲林和丙咪嗪的保留时间分别是5.4 m in和3.8 m in;舍曲林标准曲线线性范围为1~80μg/L;检出限为1.0μg/L(S/N>10);日间、日内相对标准差均小于6.0%,相对回收率为90%~106%;提取回收率在75%~93%范围内。此法适合人体药代动力学的血浆样品的分析,结果准确、可靠。     

液相色谱/串联质谱法测定芹菜中甲拌磷及其代谢物残留

建立了芹菜中甲拌磷及其代谢物(甲拌磷亚砜和甲拌磷砜)残留的液相色谱/串联质谱检测方法。样品以乙腈提取,采用电喷雾正离子源(ESI+)和多重反应监测(MRM)模式测定,基质匹配标准曲线定量。结果表明:芹菜基质中甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜在0.01~0.1mg/L范围内线性关系均较好(r0.995),方法检出限和定量限分别为0.42~1.10μg/kg和1.4~3.6μg/kg;在5、50和100μg/kg三个添加水平下,甲拌磷、甲拌磷亚砜和甲拌磷砜的回收率为71.9%~90.2%,相对标准偏差为5.8%~9.9%。该法简单、准确、快速、灵敏,符合法规残留限量监测要求。     

Determination of Fluoxetine in Human Plasma by Liquid Chromatography–Mass Spectrometry and Its Application

Abstract

A rapid, simple, and specific liquid chromatography–electrospray ionization–mass spectrometric method has been developed and validated for the determination of fluoxetine in human plasma. The method was validated with a linear range of 0.5–100 ng mL^?1, and the lowest limits of quantification were 0.5 ng mL^?1 for fluoxetine. The extraction efficiencies were about 65% and recoveries of method were in the range of 94.0–97.5%. The intraday relative standard deviation (RSD) was less than 11% and interday RSD was within 12%. The method has been successfully applied to the evaluation of pharmacokinetics and bioequivalence of fluoxetine.     

尿液中1,3-丁二烯代谢产物的液相色谱-串联质谱法检测

建立了人体尿液中1,3-丁二烯的代谢产物--丁烯醇巯基尿酸(MHBMA)和丁烯二醇巯基尿酸(DHBMA)的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测方法.以DHBMA-D7、MHBMA-D6作内标,尿液酸化离心后采用反相固相萃取柱Isolute ENV+净化和富集.分析样品以无水甲醇和pH 2.5的0.1%甲酸水溶液为流动相,经Agilent Extend C18柱梯度洗脱,流速1 mL/min,柱后以三通分流,分流比约为3:1,柱温40 ℃.在多离子监测模式下进行定性和定量分析,采用负离子扫描模式.2种代谢物的精密度为1.02% ～7.79%,回收率为97% ～112%.用该方法同时测定了吸烟者和非吸烟者尿液中2种代谢物的平均质量浓度,结果表明,对于抽吸相同品牌相同支数的卷烟的吸烟者,由于吸烟行为和代谢途径不同,其尿中DHBMA和MHBMA的质量浓度存在着较大差异,而对于吸烟者尿液,其DHBMA、MHBMA的质量浓度分别是非吸烟者的5.1倍和9.1倍.因此,DHBMA和MHBMA有可能作为人体尿液中鉴别吸烟者和非吸烟者的生物标记物.