小鼠巨细胞病毒PCR 诊断方法的建立及其应用

摘要: 目的建立小鼠巨细胞病毒( MCMV) PCR 检测方法,并进行初步应用。方法根据NCBI 公布的巨细胞病毒设计引物,进行PCR 体系优化、敏感性、特异性测试; 运用优化后的方法,对87 份小鼠血清进行检测,对阳性样本进行测序分析。结果建立的小鼠巨细胞病毒PCR 方法灵敏度高,特异性好,初步检测4 个屏障设施的87 份小鼠血清, 13 份为阳性,通过测序证实为小鼠巨细胞病毒,验证了此方法的可行性。结论为小鼠巨细胞病毒的快速检测提供了方法。     

手性β-氨基醇的合成及其在不对称催化中的应用进展

在不对称有机催化反应中,具有光学活性的手性β-氨基醇由于催化效率高和应用范围广而成为广泛使用的手性配体或手性助剂,其本身在药物应用或生物学上也发挥着重要的作用.对近年来手性β-氨基醇的合成方法及其在不对称催化中的应用进展进行了综述.     

L-脯氨酰胺衍生物的合成及在不对称催化反应中的应用

以L-脯氨酸为原料,与不同的手性胺基醇及脂肪胺反应合成了6个手性酰胺化合物,并考查了它们在醛的不对称烷基化反应及炔酯与三甲基铝的不对称偶联反应中的催化性能,结果表明6个化合物均有一定的催化效果.所有目标化合物均通过熔点测定和核磁共振氢谱及碳谱分析对其结构进行确证.     

新型相转移催化剂的合成及其在不对称合成中的应用

烷基化反应被认为是最有用的碳-碳键形成的反应之一．作者以光学纯的联二萘酚为原料经过与三氟甲烷磺酸酐成酯反应，与甲基格氏试剂发生偶联反应，经甲基保护酚羟基后溴代，最后与生物碱反应制备手性相转移催化剂．在二苯甲酮亚胺甘氨酸叔丁酯的不对称烷基化反应中，2mol％催化剂用量，获得较高的产率和27％的对映选择性．     

新型樟脑衍生的硒叶立德的合成及其在不对称环丙烷合成中的应用

以天然樟脑为手性源,在强碱作用下与甲基硒溴顺利反应得到exo型为主的硒醚产物,再经还原及与不饱和的烯丙基溴反应合成了新型结构的手性硒盐,该手性硒盐在强碱作用下能够形成硒叶立德,将其应用于手性环丙的不对称合成研究,实验结果表明具有很好的非对映选择性和对映选择性.     

Sugeno型模糊复值积分及其在分类器融合中的应用

给出的模糊复值积分、Sugeno型模糊复值积分概念,研究了其基本性质;将其作为一种新的算法应用于分类问题中,对应用中的细节问题进行研究,并用1个实例对其算法进行验证,结果显示该方法具有良好的分类效果。     

(S)-N-(2-氨基苯基)四氢吡咯-2-甲酰胺的合成及其在直接不对称Aldol反应中的应用

以(S)-Pro1ine为原料三步合成(S)-N-(2-氨基苯基)四氢吡咯-2甲酰胺1，总产率64．25％．并用于催化直接不对称Aldol反应，产率65％～84％，ee值26．5％～40．7％．     

质量保证型服务界值研究及其在HALM中的应用

研究质量保证型服务和分层应用级组播的性能界值是很有意义的新课题。基于计算机网络的建模理论——网络演算（Network Calculus）,研究了质量保证型服务单网络节点和多网络节点级联系统的性能界值;接着提出了服务隧道的概念,并应用服务隧道对分层应用级组播进行了QoS优化;最后应用质量保证型服务的性能界值进行了系统性能评价。     

新型手性Brnsted酸的合成及其在直接不对称Mannich反应中的应用

由(R)-BINOL(1,1-联二萘酚)出发,经3步反应合成了一种新型的手性Brnsted酸,(R)-3,3′-双(二苯次膦酰基)-BINOL衍生的手性磷酸(3).其结构经1 H NMR,31P NMR,MS表征.以甲苯为溶剂,3为催化剂,于0℃反应36h的最佳反应条件下,催化直接不对称Mannich反应所得产率为87%,38%ee和69/31 dr.     

手性BINOLC-Ti自组装催化剂的合成及其在不对称催化硫醚氧化中的应用

利用多齿手性1,1'-联二萘酚(BINOL)与Ti(OiPr)4在溶剂中通过自组装方式形成一种不溶性高聚物,然后将其用于不对称催化氧化硫醚成亚砜的反应.研究表明制备的自组装Ti-BI-NOL催化剂均有较好的催化性能,ee值高达98%;配体的连接桥和反应溶剂对催化剂催化性能均有较大的影响.     

D - 甘露醇衍生的新型手性配体的合成及其在不对称催化环氧化反应中的应用

合成了手性配体1,2,5,6-O-二异丙基-D-甘露醇(III)以及1,3,4,6-O-二亚苄基-D-甘露醇(IV)及其衍生物并对起结构进行了表征,其中1,3,4,6-O-对氯二亚苄基-D-甘露醇(V),1,3,4,6-O-对甲基二亚苄基-D-甘露醇(VI)属于新化合物未见有文献报道.4种新型的手性二醇应用于查尔酮的不对称环氧化均显示了较高的催化活性(97.4%-100%conv.)和中等或偏低的对映选择性(14%-31.7?).     

牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)荧光定量PCR检测方法的建立及应用

目的 建立牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)实时荧光定量PCR检测方法,用于牛源性样本中BHV-1的快速检测。方法 根据已发表的BHV-1 gB基因设计特异引物和TaqMan探针,建立BHV-1实时荧光定量PCR方法。并对方法的特异性、敏感性、重复性稳定性等进行测定。用建立的方法对181份牛源性样本进行检测。结果 建立的BHV-1荧光定量PCR检测方法与牛副流感病毒Ⅲ型(BPIV3)、牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV1)、猪伪狂犬病毒(PRV)、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)、猫疱疹病毒1型(FHV-1)均无交叉反应;检测灵敏度可达到1×101copies/μL;批内变异系数均小于5%。应用建立的方法检测181份牛源性样本,有6份样本BHV-1核酸为阳性。结论 建立的BHV-1荧光定量PCR检测方法具有快速、特异、敏感及稳定的特点,可用于牛源性样本中BHV-1污染的检测。     

鼠痘病毒PCR检测方法的建立及在鼠源性生物制品检定中的应用

目的建立小鼠鼠痘病毒PCR检测方法,并应用于鼠源性生物制品的检测。方法根据鼠痘病毒基因组序列中保守的crmD片段设计一对引物,建立鼠痘病毒PCR检测方法;人工感染20只小鼠,对其肝、脾、肾、脚掌及血液采用该方法进行检测;提取鼠源性生物制品中DNA,采用该方法检测其是否存在鼠痘病毒。结果该方法可以检测到稀释至10-5感染鼠痘病毒的细胞,在BHK21细胞和牛痘病毒中均未扩增出相应片段;该方法可检测出人工感染小鼠不同组织中病毒DNA;在鼠源性生物制品中未检测出鼠痘病毒DNA。结论该方法具有良好的特异性和敏感性,可以应用于染病动物组织及鼠源性生物制品中鼠痘病毒的检测。     

新型手性Br(o)nsted酸的合成及其在直接不对称Mannich反应中的应用

由(R)-BINOL(1,1-联二萘酚)出发,经3步反应合成了一种新型的手性Br(o)nsted酸,(R)-3,3’-双(二苯次膦酰基)- BINOL衍生的手性磷酸(3).其结构经1 H NMR,31P NMR,MS表征.以甲苯为溶剂,3为催化剂,于0℃反应36 h的最佳反应条件下,催化直接不对称Mannich反应所得产率为87％,38％ ee和69/31 dr.     

α-蒎烯类手性硼作用下的不对称硼氢化反应在有机合成中的应用

本文对近年来 α-蒎烯类手性硼作用下的不对称硼氢化反应作一综述 ,介绍了包括手性醇、手性硼酯和手性烃基硼酯、α-手性烯、α-手性炔、α-手性醛酮及手性胺在内的六类化合物的合成新进展。     

多值随机微分方程中的耦合方法及其在Harnack不等式中的应用

 通过鞅方法构造耦合算子，研究了多值随机微分方程中的耦合方法。同时应用耦合方法结合Girsanov定理证明了多值随机微分方程解的Harnack不等式。     

手性二茂铁基β-氨基醇的合成及其在催化硼氢化钠／碘对潜手性酮的不对称还原反应中的应用

从二茂铁和廉价易得的L-缬氨酸、苯丙氨酸出发,合成了4个手性氨基醇衍生的二茂铁基β-氨基醇. 研究了它们在催化硼氢化钠/碘对苯乙酮的不对称还原反应的对映选择性. 结果表明:二茂铁基氨基醇4、5和6都能诱导得到优势加成产物R-1-苯基-1-乙醇. 其中4b以最好89%的产率和65% e.e.值得到产物,而用与4b对应的α-胺基膦氧化物5和6催化时,化学产率和e.e.值分别为81%和38%, 82% 和32%.     

基于两种不确定的稳健设计方法及其在车身轻量化设计中的应用

针对传统基于近似模型的稳健设计方法中近似模型预测误差易导致优化解约束失效的问题,综合考虑参数不确定和近似模型预测不确定的影响,建立基于2种不确定因素的稳健设计方法,并通过数学测试案例验证所提方法的优化效果.同时,针对车身轻量化问题进行应用研究,选取非线性程度高、近似模型不确定影响大的耐撞性指标作为稳健约束.结果表明,基于2种不确定因素的稳健方法可以有效保证高维、强非线性问题优化解的可靠性,并在满足碰撞性能指标的前提下,达到车身减重11.06%的轻量化效果,从而验证了所提方法的可行性.     

血清hK2 ELISA方法的建立及在前列腺癌诊断中的应用

目的通过建立血清hK2 ELISA检测方法,探讨血清hK2水平对前列腺癌的诊断意义,为临床鉴别前列腺癌与前列腺增生提供一种特异、敏感、实用的方法.方法利用hK2单克隆抗体建立检测血清hK2水平的ELISA方法,并利用本实验建立的方法对30例前列腺癌患者,26例前列腺增生患者,30例正常对照的血清进行hK2水平的检测.结果 1)血清hK2水平测定值(A450nm)分别为:a.前列腺癌组(0.701±0.113);b.前列腺增生组(0.212±0.145);c.正常对照组(0.198±0.015).前列腺癌组血清hK2水平与前列腺增生、正常对照组相比较有显著差异(P<0.01).2)本研究建立的检测血清hK2水平的ELISA方法的敏感度为83.3%,特异度为94.6%,准确度为87.2%.结论 1)前列腺癌患者血清hK2水平与前列腺增生患者及正常人血清hK2水平差异显著,不存在重叠.血清hK2水平能够对前列腺癌、前列腺增生进行鉴别诊断.2)在鉴别前列腺癌和前列腺增生方面,本研究建立的检测血清hK2水平的ELISA方法,与临床上应用的病理学诊断方法符合率高,具有临床实用价值.