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乙型肝炎病毒表面抗原preS基因在痘苗病毒系统中的分泌型表达 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对带preS2的乙肝病毒表面抗原基因以及带preS1和preS2的乙肝表面抗原全基因的重组痘苗病毒vTMS-1和vTLS-1的表达和分泌进行了研究。在人TK-143细胞中它们能表达各自所编码的蛋白——乙肝表面抗原中分子蛋白和大分子蛋白。产物是可分泌的,并能形成22nm颗粒。分泌在培液中的表达产物能分别与抗preS2和抗preS1的单抗反应,并保持了天然表面抗原大分子和中分子蛋白所具有的多聚人血清白蛋白的受体活力。它们的表达产物中都还合有乙肝表面抗原主蛋白的成分。 相似文献
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以HIV-1 p24gag 与hIL-6 基因在重组痘苗病毒中的共表达研究为目的,将痘苗病毒复制非必需区血凝素(HA) 基因作为侧翼,把编码人白细胞介素6(hIL-6)的基因片段克隆到真核表达质粒p16QF1 -24 的下游,构建成含有HIV- 1p24gag 和hIL-6 两种外源基因的重组表达质粒p16QF24 -IL6 ,经同源重组和血凝素阴性空斑筛选,获得了重组痘苗病毒v16QF24 -IL6.经间接免疫荧光试验、Dot- ELISA 和Western bolt 等检测证明,重组病毒能同时表达p24gag 蛋白和IL-6 蛋白,表达产物的相对分子质量分别为2-4×104 ,2-6×104 .此种方式表达的外源蛋白持续释放,可产生更强的免疫效果,可望用于HIV疫苗的研究. 相似文献
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我们从天坛株痘苗病毒的基因组中,分离编码11K及25K蛋白的双向转录启动子,以胸苦激酶(TK)基因为旁侧序列,插入到质粒pAT153中,构建成可以同时表达两个外源基因的载体质粒,并将乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因及大肠杆菌的β-半乳糖苦酶(LacZ)基因,插入该载体质粒,使它们分别在11K及25K启动子钠控制下,构建成共表达质粒。用钙沉淀法将此质粒DNA同天坛株痘苗病毒在细胞内进行同源重组,在含X-gal的培养基挑蓝色蚀斑,简便、准确地选出重组痘苗病毒。所选到的重组痘苗病毒高效表达了HBsAg。我们还把上述重组痘苗病毒接种动物,观察了它们的毒力及免疫原性。 相似文献
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痘苗病毒的装配与中间纤维的关系 总被引:3,自引:0,他引:3
本文用选择性抽提方法,结合非树脂包埋-去包埋剂电子显微镜技术(embedmentfree EM)与整装细胞(whole mount cell)制备方法能清楚地显示中间纤维-Lamina-核骨架体系(IF-Lamina-Nm System)。首次证明痘苗病毒工厂内有一个精细的中间纤维网架系统,它是胞质内中间纤维网络的组成部分。痘苗病毒的装配原料与亚结构均牢固地结合在中间纤维丝上。装配好的痘苗病毒与正在装配的病毒均固定在中间纤维的网络中,并可以观察到病毒结构与中间纤维的直接连接。根据上述事实,认为痘苗病毒的装配过程要依赖中间纤维为支架。 相似文献
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乙型肝炎表面抗原的激光光声酶联免疫测定刘风华,邓延倬,曾云鹗(武汉大学化学系,武汉大学分析测试科学系,武汉,430072)关键词激光光声谱,酶联免疫吸附分析,聚偏二氟乙烯,乙型肝炎表面抗原激光光声谱是微量和痕量分析的一种新技术,可检测10-6~10-... 相似文献
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To expose the statistical properties of the degenerated spectrum, with the aid of the random matrix theory,a possible form of the NNS distribution function of the degenerate spectrum was proposed by providing a solution in terms of the same-degeneracy case. The results indicate that the target spectrum is transformed into two sub-spectra: a random one and a regular one, and that the repulsion level of the regular spectrum is also decreased. 相似文献
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通过环氧氯丙烷活化(1,4)-2-氨基-2-脱氧β-D-葡萄糖(壳聚糖)制备免疫吸附剂,详细讨论了环氧氯丙烷活化过程的影响因素,确定了活化的最佳条件,活化(1,4)-2-氨基-2-脱氧β-D-葡萄糖树脂对单克隆抗体的偶联率为17.6%,对含乙肝炎表面抗原阳性血清均吸附实验表明,制备的免疫吸附剂剂能使阳性转为阴性,吸附率为44%。 相似文献
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一种乙肝病毒表面抗原和其单克隆抗体相互作用的SERS研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用银纳米粒子的表面增强拉曼散射(SERS)效应,研究了乙肝病毒表面抗原 (HBsAg)和其鼠源单克隆抗体(单抗,Ab-HBsAg)的相互作用。SERS光谱结果表明 ,Ab-HBsAg分子主要通过位于非抗原结合部位的去质子化羧基(COO)^-实现与银 纳米粒子的结合。HBsAg与Ab-HBsAg相互作用形成免疫复合物后,HBsAg分子上的色 氨酸(Trp)残基特征振动完全消失,表明Trp残基位于HBsAg抗原分子的活性区,是 HBsAg与Ab-HBsAg相互作用的重要位点。 相似文献
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本文应用化学降解法测定了adr亚型乙型肝炎病毒pADR-1 DNA中包含表面抗原基因(s基因)的XhaI BamHI片段顺序,共1279碱基对。比较了adr亚型与已知的adw,adyw,ayw的s基因的核苷酸顺序及其编码的HBsAg氨基酸顺序的差异,发现了一些新的变异位点,差异集中分布在HBsAg的亲水区域。但在一些可能具有生物功能的位点,各亚型间并无变异,在遗传和进化中是相对保守的。比较s基因区和非s基因区的核苷酸变异情况表明,非s基因区的变异频率高一倍,s基因区是相对保守的。 相似文献
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一种带有吡唑啉侧链的低聚酰胺的合成 总被引:1,自引:0,他引:1
A oligoamide with pyrazoline segment was designed and synthesized.Its structure was identified by IR,MS and 1HNMR.Fluorescence property of the target compoud in solution(DMF) was studied.The results showed that the strongest emission peak was at 442nm and the half peak width was 64nm and the fluorescence quantum yield(Φ) was 73.9%,which enhanced 13% compared to the simple pyrazoline structural unit's Φ. 相似文献
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以乙型肝炎表面抗原和乙型肝炎表面抗体为模型免疫蛋白,对传染病的诊断技术进行了研究. 利用吸附在铂电极表面Nafion膜中负电性的磺酸基与乙型肝炎表面抗体(HBsAb)分子中的氨基阳离子之间的静电作用实现抗体的结合,同时通过纳米金(Au)增加抗体的固定量,以及聚乙烯醇缩丁醛(PVB)薄膜的笼效应把乙型肝炎表面抗体和纳米金固定在铂电极上,从而制得高灵敏、高稳定电位型免疫传感器(PVB/Au/HBsAb/Nafion/Pt). 通过循环伏安法和交流阻抗技术考察了电极表面的电化学特性,并对该免疫传感器的性能进行了详细的研究. 该免疫传感器具有制备简单、灵敏度高、线性范围宽、响应时间快(<3 min)、稳定性好、寿命长(>4个月)、选择性高等特点,将其用于病人的血清样品分析,其结果令人满意. 相似文献
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利用同源模建和分子动力学优化得到了一种乙肝表面抗原片段的三维结构.通过对活性部位的分析,设计了与抗原片段相结合的配体.讨论了Trp163,Trp165和Pro70对于紧密结合配体所起的重要作用,抗原片段与配体之间的氢键也决定了它们结合的相对位置.从复合物得到的结构信息将有助于揭示配体与乙肝抗原的作用机理,促进乙型肝炎病人诊断与治疗试剂的研制 相似文献
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