冷冻保存对人类附睾精子功能的影响

目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后,每例冷冻标本均见活动精子,但精子活动率显著降低,精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降,头膜损伤－ 尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子） 显著升高,精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本,采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１） 冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响,造成精子功能减弱;（２） 冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选,有可能拾取到的是尾膜完整,但头膜损伤的精子;（３） 建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。     

冷冻保存对精子运动的影响

目的：观察精子运动状态,其中包括精子折断现象与冷冻损伤的关系。方法：对精液标本进行一步冷冻保存和分步冷冻保存,并用鉴别精子形态湿片法对冷冻前后精子运动状态及折断率进行评价。结果：冷冻保存复温后的精子活动率与冷冻前的精了活动率比较明显下降（P＜0．01）;含冷冻保护剂的实验组与不含冷冻保护剂的对照组比较,精子率呈显著性差异（P＜0．01）,精子折断率无显著性差异（P＞0．05）;一步冷冻和分步冷冻保存的精子之间活动率及折断率相比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论：冷冻保存易造成精子活动率下降、运动形态异常,但不能显著地导致精子折断发生率增加。     

冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响

探讨了冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响,应用明胶薄层法检测,冷冻保存后精子顶体蛋白酶反应率和成环直径显著减少（ｎ＝３０,Ｐ＜０．０１）．透射电镜观察到冷冻保存后精子（ｎ＝３）头部结构完整性显著降低,提示浆膜、顶体膜超微结构的冷冻损伤与冷冻精子顶体蛋白酶活性丢失和降低有关．冷冻精子穿卵率与顶体蛋白酶反应率不呈相关性（ｎ＝２１,ｒ＝０．３４,Ｐ＞０．０５）,提示两项检测反映的是精子功能的不同方面．     

公鸭、公鸡精子对在液氮中低温冷冻保存耐受力的比较研究

比较公鸭和公鸡精子经低温冷冻保存后存活率、顶体完整率方面的差异.结果表明,公鸭冷冻精液解冻后的精子存活率和顶体完整率都不同程度地高于相同类型的公鸡冷冻精液,但差异均未达到显著水准（P＞0.05）.     

真鲷精液和精巢超低温冷冻保存

以精子的活率和游动时间为指标，研究了福建南部沿海秋冬季真鲷生殖群体精液和精巢超低温冷冻保存的方法和鲜精在不同盐度或酸碱度条件下的生理特性．结果表明，以０．８％的ＮａＣｌ和０．０５％的ＫＣｌ配制的稀释液适合于真鲷精液的冷冻保存．Ｋ＋有助于提高精子的活率．添加甘氨酸可延长精子的游动时间．甘油、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）和甲醇均可作为真鲷精液的抗冻保护剂，但以甘油和ＤＭＳＯ混合使用时的抗冻效果较好．冷冻精液的效果优于冷冻精巢．鲜精在弱碱环境和盐度为３０时平均活率最高，游动时间最长．     

洪山公鸡精液冷冻保存方法及效果的研究

研究比较了两种不同类型的冷冻精液在解冻后精子活率、顶体完整率以及受精率方面的差异。实验结果表明,细管型冷冻精液解冻后的活率显著高于颗粒型(n=20,p<0.01)。细管型冷冻精液解冻后的顶体完整率显著高于颗粒型(n=20,p<0.05)。受精实验结果表明,两种类型的冷冻精液的受精率都显著低于以新鲜精液输精的对照组(p<0.01),颗粒型冷冻精液的受精率显著高于细管型冷冻精液(p<0.01)。     

青虾无公害养殖技术

台州市路桥康顺淡水养殖有限公司,位于路桥区桐屿街道盐岙村。2001年引进青虾养殖面积14公顷,在区渔业总站的指导下,开展青虾养殖适应性的技术,通过几年的研究试验,目前得出一套适应该地的青虾无公害养殖技术。     

稻田养殖青虾技术

稻田选择及田间工程区设选择土壤肥沃、保水性能强、进排水方便的田块。选用茎杆坚硬、耐肥抗倒、抗病虫力强的水稻品种。沿田埂内侧距埂2～3m处挖宽4～6m、深0．8～1m的环形虾沟，并利用其中一段虾沟加宽加深，挖成宽9m、深1．5m的暂养池。虾沟、暂养地占稻田总面积15％～20％，同时建好过排水系，进水口用密跟网封好，严防进水时把敌害生物带入，排水口基部要夯实。放养前20天，用生石灰对虾沟消毒。每亩施畜粪肥800～1000kg，培肥水质。苗种放养苗种可专池培育，也可直接在稻田中就地培育。就地培育的方法是：利用一段虾沟或暂养地，用密…     

皱纹盘鲍精子的激活及超低温保存研究

用不同浓度的氨海水激活解剖获得的皱纹盘鲍精子并进行激活率和受精率的测定.以自然海水作基础溶液,以二甲基亚砜(DMSO)和甘油(Gly)做保护剂,在不同降温程序下,将解剖获得和经诱导自然排放的皱纹盘鲍精子置于液氮罐中保存24 h,解冻后检测精子的成活率.结果表明,加入自然海水后有64.27%的解剖精子被激活,但不能受精,经氨海水处理后的精子在0.02‰浓度条件下激活率和受精率最高,分别为85.60%、67.42%.自然排放和解剖获得的精子在14%DMSO、4℃平衡15 min,-20℃时平衡5min,-80℃时平衡5 min条件下精子存活率最高,分别为48.15%和64.01%.     

池塘养殖青虾示范技术

池塘养殖青虾技术，主要包括以下三种养殖模式，一是池塘主养青虾，在池塘中适量混养夏花鱼种，可亩产青虾75kg，亩效益在2000元左右；二是成鱼池混养青虾，亩产500kg的成鱼油混养适量青虾在基本不增加饲料的情况下，可产青虾15kg左右，亩效益约600元；三是鱼种油混养青虾，在亩产o000tg的鱼种油中，可产青虾25kg左右，亩效益约1000元左右。l池塘条件和放养前的准备池塘条件一般成鱼池和鱼种地均可养虾，尤以面积5一匕亩、水深1．5－Zm、池埂不渗漏的长方形池塘为好。要有水量充足、水质良好的水源。池塘清整冬季干塘后，进行鱼池改造，挖…     

青虾与鱼混养技术

青虾是我国最重要的淡水经济虾类,也是深受人们喜爱的淡水珍品.随着人民生活水平的提高,市场上对青虾的需求大量增加,导致青虾养殖业的迅猛发展.近年来,我国各地利用天然湖泊、河流以及池塘养殖青虾,促进了地方经济的发展.然而不少地方只是单养青虾,以致对水体空间的利用率不高,生态效益未能发挥,因而经济效益也比较低.淡水鱼虾混养就是一个提高水体资源利用率的有效方法.鱼类的活动能力较强,在水体中有较大的活动范围;青虾为底栖甲壳动物,游泳能力较     

早期胚胎玻璃化冷冻保存技术研究进展

胚胎冷冻技术是胚胎移植真正走向商业化应用的关键环节,并受到广泛的关注,而玻璃化冷冻不仅具有操作时缩短、而且方法简易、不需要昂贵的设备,容易在生产中推广使用,因而日益受到人们的重视。本综述阐明了胚胎玻璃化冷冻原理,讨论了抗冻保护剂及其选择原则,比较了玻璃化冷冻技术各种方法及其优缺点,分析胚胎玻璃化冷冻的影响因素,展望了玻璃化冷冻技术的应用前景。     

小黄鱼精液超低温冷冻保存技术的试验研究

为了研究小黄鱼精液超低温冷冻保存技术,分别比较了3种抗冻剂、3种降温方法和2种复温温度对冷冻精液的影响。结果表明:采用Riger’s液作为稀释液、10%DMSO为抗冻剂,冷冻精液的激活率和受精率最高,与其他两个实验组差异显著(P0.05),分别为92.36%和81.36%;以10℃/min的降温速率将精液降至-80℃后液氮保存,40℃水浴解冻比室温解冻可以获得更好的受精效果,受精率和孵化率分别为78.47%和75.47%。     

人卵冷冻保存技术的进展(综述)

冷冻保存（Cryop～rvahon）是当前人类生殖工程中可以实施的技术之一。应用冷冻保存技术，人的早期胚胎解冻后又可以获得较好的存活率和妊娠率。但是，冻存的胚胎有时会因为其“父母”已成功怀孕而变为多余，如何处置这些已有“生命”的胚胎等问题常常引致一些道理伦理及法律的争议。如果直接冷冻保存卵子则可以避免这些问题。而且，卵子的冷冻保存还能够使那些在生育年龄前卵巢功能遭受损伤的病人有生育的机会。许多学者曾对卵子的冷冻保存进行过探索，所采用的冻存技术多从成功的胚胎冻存技术改良而来。然而，与胚胎冷冻保存的成功率相比…     

山羊胚胎的体外发育及冷冻保存研究

采用体外培养的方法，对山羊２～８细胞胚进行培养以后将体外发育至囊胚的胚胎进行冷冻保存，以便探讨山羊早期胚的体外培养方法和冷冻方法对体外发育胚冷冻效果的影响。将胚胎分别放入Ｍ１９９、Ｍ１９９＋输卵管上皮细胞和Ｍ１９９＋输卵管上皮细胞＋ＥＧＦ的培养液中进行培养，选取发育至囊胚期的胚胎分别以甘油和乙二醇为冷冻保护剂进行冷冻保存。结果体外培养胚的囊胚发育率在三个处理组中分别为１２．５％、７０．６％和７６．９％。使用Ｍ１９９处理组与添加输卵管上皮细胞、添加输卵管上皮细胞和ＥＧＦ的处理组之间具有极显著性差异（Ｐ＜０．０１）。冷冻解冻胚的形态正常率和发育率在以甘油和乙二醇为防冻剂的处理组中分别为６８．７、５８．３％和７８．６％、７２．８％。两组之间无明显差异，结果表明，采用与输卵管上皮细胞共同培养的方法能够提高山羊胚胎体外培养的发育率，以甘油和乙二醇为冷冻防冻剂均适合于山羊体外发育胚的冷冻保存，两者相比乙二醇的效果略优于甘油。     

牛体外受精卵的冷冻保存研究

将胚胎分别以PBS 20?S 10%乙二醇和PBS 20?S 10%甘油为冷冻保护液,或者在PBS 20?S 10%乙二醇中添加或不加蔗糖为保护液,用常规冷冻方法进行冷冻处理.胚胎保存1～18天后将其解冻,并在发育用培养液TCM199 10%OCS(发情母牛血清) 丙酮酸钠中培养48小时.结果表明解冻胚的形态正常率和培养后的发育率在乙二醇处理组和甘油处理组中分别为81.2%(13/19)、56.2%(9/16)和84.6%(11/13)、46.2%(6/13),两组之间无量著差异.在添加蔗糖和不加蔗糖的处理组中,胚胎解冻后的形态正常率和培养后的发育率分别为75.0%(15/20)、55.0%(11/20)和83.3%(15/18)、61.1%(11/18),两组之间也无明曼差异.试验结果证明,用乙二醇为防冻剂对牛体外受精胚胎进行冷冻保存,其效果相当于或略优于甘油,在乙二醇处理组中,添加蔗糖与否并不影响其冷冻效果.     

青虾的繁殖与仿生

青虾是我国最主要的淡水经济虾类，民间俗称为河虾。它不仅因为肉味鲜美深得百姓喜欢，而且因为其独特的繁殖方式，得到了科学家们的青睐。在繁殖季节，青虾独特的求偶与交配方式，使行为学家们从中得到了许多启迪。特别是雌虾向体外释放的雌激素以及雄虾用于接收雌激素的感受器官——小触角，在仿生学中具有广阔的应用前景。那么，青虾究竟是如何求偶交配，其中又有哪些行为引起科学家们的浓厚兴趣呢？让我们首先来看看青虾从求偶到交配成功的全过程。据学者们最近观察，从雄虾的求偶直至雌雄交配成功，其行为过程可分为６个连续的阶段，即…     

小鼠胎儿成纤维细胞的冷冻保存研究

为了摸索小鼠胎儿成纤维细胞冷冻保存的简易方法,采用常规冷冻和玻璃化冷冻2种模式,探讨了不同的冷冻方法、不同的冷冻前平衡时间、不同的冷冻保护液的配比等因素对成纤维细胞冷冻效果的影响。实验结果表明:常规冷冻采用含10%(体积分数)甘油的DMEM液作保护剂,可将0~5℃下平衡时间缩短至45~60 min,细胞活力可达0.87。玻璃化冷冻采用10%(体积分数)NBS+1.8 mol/L乙二醇+0.1 mol/L蔗糖的PBS冷冻小鼠胎儿成纤维细胞效果好于其他组合,细胞活力可达到0.86。玻璃化冷冻法与常规冷冻法的冷冻效果差异不显著。