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壳聚糖-精氨酸树脂固定化胰凝乳蛋白酶及其性质 总被引:1,自引:0,他引:1
以具柔性亲水手臂的壳聚糖-精氨酸树脂为载体,用戊二醛交联胰凝乳蛋白酶,获得壳聚糖-精氨酸树脂固定化胰凝乳蛋白酶. 最佳固定化条件为:m(酶)∶ m(载体)=20∶ 1 000、戊二醛体积分数为1.0%、pH=5.20、30 ℃交联60 min. 固定化酶活力达850 U/g,Km为1.83 mmol/L,比游离酶增大33.6%,比交联壳聚糖固定化酶低24.0%. 壳聚糖-精氨酸树脂固定化胰凝乳蛋白酶水解时间进程曲线与游离酶基本一致,均在反应30 min达到最大速率,最适温度为70 ℃,比游离酶升高10 ℃;在75 ℃时的半衰期可达6.0 h,比游离酶提高约4.3倍;最适pH值为5.92,比游离酶向酸性偏移2pH单位. 4 ℃贮存半衰期为49 d. 相似文献
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用高效液相色谱手性固定相法,以自行制备的两种Pirkle型手性固定相拆分的DL-3,4-二羟基苯丙氨酸对映体,均获得了良好的拆分效果。 相似文献
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以自制的多孔、具柔性亲水手臂的壳聚糖–精氨酸树脂为载体,戊二醛为交联剂固定胰凝乳蛋白酶,确定了酶与载体的最佳比例为20 mg酶/g湿树脂,交联剂的最佳用量为10 mL 1.0%戊二醛/1.5 g湿树脂,交联时间为60 min,所得固定化酶的活力回收率达68.95%。固定化胰凝乳蛋白酶的Km为8.36 mg/mL,比游离酶增大1.52倍,其酶促反应10 min达到最大速率,具有接近游离酶的催化时间进程曲线;其最适温度为70 ℃,比游离酶升高10 ℃;其最适pH值为5.92,比游离酶酸性偏移2个pH值。此外,固定化胰凝乳蛋白酶具有良好的热稳定性和贮存稳定性,75 ℃时的半衰期为8 h,4 ℃时的半衰期为46天。 相似文献
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用嗜热菌蛋白酶催化合成天冬甜精并同时进行DL-苯丙氨酸甲酯的光学拆分 总被引:2,自引:0,他引:2
以DL-苯丙氨酸甲酯作原料,利用嗜热菌蛋白酶和固定化嗜热菌蛋白酶催化合成了天冬甜精,经拆分得到D-苯丙氨酸甲酯。实验结果表明,不仅天冬甜精产率高,而且D-苯丙氨酸甲酯的回收率好,光学纯度高。 相似文献
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通过霍夫曼降解光化学原位聚合制备的聚丙烯酰胺包覆的Fe3O4纳米粒子得到了氨基化磁性纳米凝胶,用缩合剂1-乙基-3-(3-二甲胺)碳二亚胺成功地将α-胰凝乳蛋白酶固定到氨基化磁性纳米凝胶上,并采用光子相关光谱、傅里叶变换红外光谱、透射电子显微镜、X射线粉末衍射和热重-示差扫描量热联用等多种手段对其进行了表征.固定化了的α-胰凝乳蛋白酶平均粒径约为31 nm;热重法测得每克凝胶上的载酶量为69 mg,BCA 法测得每克凝胶上的载酶量为61 mg;酶的固定化和氙灯辐照并未改变Fe3O4的晶形结构;固定化酶比活力为0.93 U/(mg·5min),为自由酶活力的59.3%;磁含量高达88%,具有优异的磁响应性能,可应用于诸多生物医药领域的快速检测、分离及酶的再生利用. 相似文献
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用固定化氨基酰化酶拆分DL-对氯苯丙氨酸王道宾,何炳林(南开大学高分子化学研究所,天津300071)L和D型对氯苯丙氨酸在生理学及多肽药物合成中有重要作用,L型光学异构体可抑制5-羟-色胺的形成 ̄[1],将D型氨基酸用于LHRH桔抗类似物的合成中可延... 相似文献
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本文采用戊二醛-明胶-乙二胺交联固定米曲霉,应用正交设计方法优选出相应的固定化条件,制备出拆分DL-氨基酸反应活性较高的酶催化剂,并对pH,温度,离子浓度,底物浓度等因素对固定化菌体的反应活性的影响进行了实验研究,用固定化菌体柱对N-乙酰-DL-丙氨酸进行连续拆分,结果表明催化剂具有主好的工业应用前景。 相似文献
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用高效疏水相互作用色谱(HPHIC)研究了将四氢糠醇加入盐酸胍(GuHCl)变性剂中或将四氢糠醇键合至硅胶基质时,对α-胰凝乳蛋白酶(α-Chy)复性效率的影响情况,并以α-Chy的生物活性回收率对结果进行了表征。用尺寸排阻色谱(SEG)与HPHIC的实验结果进行了比较,结果表明,四氢糠醇在变性剂中和键合至硅胶上时,均可提高α-Chy的复性效率,但提高的程度不同。四氢糠醇在溶液中或在HPHIC固定相表面时具有辅助α-Chy进行复性作用的机理可能是由于四氢糠醇与α-Chy形成了复合物的形式。实验中还对GuHCl中加入的四氢糠醇量进行了优化。 相似文献
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高分辨气相色谱法手性固定相拆分α—羟基酮光学异构体 总被引:1,自引:0,他引:1
使用高分辨气相色谱法环糊精接枝聚硅氧烷(二环[2,6-二-戊基-3-O-乙基(-5)五环[2,6-二-O-基3-O-甲基]-β环糊精-聚氧烷)作手性固定相,实现了α-羟基酮的有效拆分,并测定了一系列光学活性3-羟基-2-丁酮的对映体过剩值(e.e值)。结果表明,所选取的手性固定相对测定此类不对称催化反应产物的光学产率,评价催化体系的手性选择性均具有较好的效果。 相似文献
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用低温辐射聚合法将α-淀粉酶固定到聚甲基丙烯酸-β-羟乙酯载体上。研究了低温辐射聚合固定化的条件;讨论了不同固定化酶对淀粉转化成还原糖的相对活性及其重复使用的稳定性;探索了载体微孔结构与固定化酶活性的关系。结果表明,在真空体系内,酶用量≥250μg/mL、单体浓度在30%~40%之间,于-50℃~-55℃范围内进行5.6×10~5rad剂量的辐射聚合,所得固定化酶重复使用10多次其相对活性仍可保持在30%以上。 相似文献