血液肿瘤相关生物标志物的电化学传感检测

血液肿瘤是一类严重危害人类健康的血液系统恶性疾病,主要累及骨髓、血液及淋巴组织。血液肿瘤相关生物标志物的定量检测是实现疾病精细化病理分型以实施靶向治疗进而改善预后的关键。本文对血液肿瘤相关生物标志物的种类、目前国内外常用的检测方法进行概述,重点阐述电化学生物传感器在检测血液肿瘤相关生物标志物方面的最新进展,并对血液肿瘤相关生物标志物电化学传感技术的未来发展方向提出展望,拟为其深入研究与应用提供参考。     

口腔癌相关唾液肿瘤生物标志物的分析检测研究进展

口腔癌系头颈部癌，癌组织均位于口腔内，其非侵入性早期诊断是减少该病死亡的有效手段.唾液系口腔癌变相关物质首先释放进入的体液，取材方便，安全无创，是口腔癌普查筛选、早期诊断的首选指标.本文对唾液肿瘤生物标志物的种类、目前国内外常用的检测方法进行概述，重点阐述新型电化学生物传感方法在口腔癌相关唾液肿瘤生物标志物检测方面的相关应用及其最新研究进展.并对口腔癌相关唾液肿瘤生物标志物电化学传感技术的未来发展方向提出展望，拟为其深入研究与应用提供参考.     

基于核酸适配体的生物标志物检测方法研究进展

核酸适配体是指能与特定靶分子结合的寡核苷酸链。因其具有易修饰、易合成和低免疫原性等特点,作为生物传感器的靶向元件,已广泛应用于各种生物标志物检测技术中。本文综述了近年来基于核酸适配体的生物标志物的检测技术在癌症、心血管疾病、阿尔兹海默症、抑郁症等多个疾病领域的诊断研究进展,列举核酸适配体新兴技术的创新应用,以期为生物标志物的检测提供新思路,也有望为相关疾病的早期诊断和治疗提供参考。     

生物分析化学与肿瘤标志物的免疫检测方法研究

通过电化学和光学方法,开展蛋白质与DNA分析、生物功能传感等生物分析化学方面的研究,建立方便、特异、高灵敏的肿瘤标志物的免疫分析新方法,为临床疾病诊断提供新途径.     

神经性毒剂中毒体内诊断生物标志物的分析检测进展

文章系统综述了神经性毒剂中毒体内诊断生物标志物,包括毒剂原型、降解产物和毒剂蛋白加合物等的分析检测方法,以及近年来此领域的新技术和新进展,引文45篇。     

生物标志物用于污染的快速检测及毒性评价

生物标志物是指示污染物危害效应的生物信号，文中概括性讲述了生物标志物的定义，分类、特点及优越性，介绍了生物标志物常用的检测方法，归纳了生物标志物在快速检测各类环境污染物含量和评价其毒性方面的应用，还讨论了它的缺陷和不足，展望了生物标志物的发展前景。     

可视化蛋白芯片检测牛奶中庆大霉素的方法研究

本文采用间接竞争免疫法,研究了可视化蛋白芯片快速检测牛奶中庆大霉素的方法。在固定有庆大霉素人工抗原的醛基修饰芯片的反应区内,加入庆大霉素单克隆抗体和游离的庆大霉素或牛奶样品混合物,待抗原抗体反应完全后依次加入纳米银标记的二抗(羊抗鼠)及银增强显色剂进行可视化检测,结果采用可视化生物芯片检测系统进行定量分析。通过设计制备内标点及建立的内标曲线,可在同一孔内定量检测游离的庆大霉素。该法庆大霉素的线性检测范围为0.1~200ng/mL,检测限为0.1ng/mL,样品的加标回收率为95%~112%。     

生物标志物用于污染物的快速检测及毒性评价

生物标志物是指示污染物危害效应的生物信号。文中概括性讲述了生物标志物的定义、分类、特点及优越性，介绍了生物标志物常用的检测方法，归纳了生物标志物在快速检测各类环境污染物含量和评价其毒性方面的应用。还讨论了它的缺陷和不足，展望了生物标志物的发展前景。     

量子点银增强可视化检测方法的研究与应用

通过制备链霉亲和素修饰的CdTe量子点探针,建立了基于量子点探针的银增强显色可视化检测方法,并结合蛋白质芯片分析技术,将此方法应用于反相蛋白芯片的分析检测.以人IgG测定为模式,在醛基片上固定人IgG,加入10 ng Bio-羊抗人IgG及CdTe-SA探针,银增强显色15 min.结果显示,人IgG样品量在100 pg～1.6 ng范围内,其对数值与信号灰度值呈良好的线性关系(r=0.997),检出限为50 pg.本方法可实现微量蛋白的灵敏检测,具有操作简单,对仪器要求低,结果可视化等特点.     

基于表面增强拉曼光谱技术的心肌生物标志物检测

心血管疾病(CVD)是全球最主要的死亡原因,急性心肌梗死(AMI)是心血管疾病致死的主要病因,安全快速地诊断AMI对于降低患者的死亡率至关重要。因常用的检测方法如心电图(ECG)缺乏足够的敏感性,寻找并针对AMI生物标志物开展高灵敏检测已成为早期检测AMI重要手段。心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和肌红蛋白(Myo)是目前公认的检测AMI的重要心肌生物标志物。在过去的几十年里,许多生物传感器被开发出来用于检测心肌生物标志物,其中基于表面增强拉曼光谱(SERS)的心肌生物标志物检测技术迅速发展,并表现出独特的技术优势和广阔的应用前景。本文首先介绍了多种心肌生物标志物及其与AMI的关联,在此基础上概述主要的心肌生物标志物检测方法的原理、优势及局限性,重点介绍近年来新兴的SERS技术及其在心肌生物标志物传感方面的最新研究进展,并对该技术在AMI诊断方面的应用前景以及有待突破的瓶颈进行了讨论和展望。     

一种基于金磁微粒的电化学发光免疫检测方法

基于金磁微粒(GoldMag particles)的磁性分离富集性能与良好的生物相容性,直接在金磁微粒表面吸附固定相思子毒素多抗制备捕获探针,以三联吡啶钌标记相思子毒素单抗作为电化学发光探针,两者与相思子毒素发生特异性免疫反应形成夹心复合物,成功建立了一种简单、快速、灵敏的相思子毒素电化学发光免疫检测方法。利用此方法检测相思子毒素,其浓度在0.2～1 500μg/L范围内与电化学发光强度成良好的对数线性关系,检出限为0.2μg/L。与生物素-亲和素固定法相比,该法的检出限相当,其线性范围更宽、操作更简化,具有通用性,可以此为基础发展生物毒素及其它蛋白的检测方法,用于临床诊断、环境监测及生物防护等领域。     

New Enzyme Immunoassay with Visual Detection Based on Membrane Photoimmobilized Antibodies

Abstract

New method for visual enzyme immunoassay of some model antigens in solution by using covalently photoimmobilized antibodies has been developed. This approach is based on the quantitative photoimmobilization of antibodies on the surface of porous matrixes. It is easy to control the dimensions and shape of the activated zones and the quantity of the active groups on it by this technique. A strip of the membrane impregnated with p-azidobenzaldehyde was illuminated by the light. A s a result, .the quantity of aldehyde groups developed on the surface of membrane is proportional to the time of illumination. After the covalent immobilization of antibodies, the membrane has separate zones with an exact surface concentration of antibodies. The antigens of different types were assayed: human IgG, human chorionic gonadotropin, Shigella Sonnei. The lowest detection limit was 1 μg/ml, 20 U/L 1×10₄ cells/ml. The method allows measure of thyroxire concentrations in the range 50 to 200 nM, the precision of replicate measurements has the coefficient of variation 7%. The reasons for the background signal appearance were accurately analyzed. The choice of support was substantiated, the optimal conditions of it.s pretreatment being defined. This method makes possible the visualization of the results based on comparison the color intensity of zones with the control.     

微板式磁化学发光酶免疫分析法对人绒毛膜促性腺激素(HCG)的灵敏快速测定

以磁性酶免疫测量分析为模型,建立了微板式磁化学发光酶免疫分析法.利用3-(2′-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷(AMPPD)-碱性磷酸酶(ALP)化学发光体系对人绒毛膜促性腺激素(HCG)进行测定,测量的灵敏度较分光光度法提高了13倍.测定的线性范围为0.15～500 mIU/mL;批内变异系数(C.V.%)和批间变异系数(C.V.%) 均在18%之内;回收率在80%～116%之间;利用本法对血清样品进行了测定,并与其它化学发光免疫分析方法进行了比较,其相关系数为0.965.首次将酶免疫分析方法用于唾液中人绒毛膜促性腺激素(HCG)的测定,为建立非侵入式样品测定方法打下了基础.     

曲美他嗪在冠心病合并心力衰竭治疗中的应用价值探究

目的分析并研究曲美他嗪在冠心病合并心力衰竭患者治疗中的应用价值。方法选取2015年3月至2016年3月期间上饶市广丰区人民医院收治的冠心病合并心力衰竭患者86例,按照随机数字表抽取法均分成对照组和观察组,每组各43例,其中对照组患者采用常规疾病内科治疗方式,观察组在对照组治疗的基础上增加曲美他嗪治疗,观察比较两组患者的治疗效果及治疗前后左室舒张期末内径和左室收缩期末内径及左室射血分数。结果观察组患者治疗有效率为95.34%,对照组患者治疗有效率为81.40%,数据比较差异具有统计学意义(P0.05);治疗后,观察组患者左室舒张期末内径、左室收缩期末内径显著低于对照组,左室射血分数显著高于对照组,数据比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论对冠心病合并心力衰竭患者在常规治疗的基础上增加曲美他嗪具有显著的效果,且安全性较高,具有重要的临床价值。     

基于铜增强纳米金标记物结合磁分离的溶出伏安免疫分析法用于蛋白质的高灵敏测定

应用铜原位化学放大纳米金颗粒的信号增强特性, 并结合磁分离技术, 提出了一种高灵敏的溶出伏安免疫分析方法. 实验中以人IgG为模式蛋白质, 将抗体修饰的SiO₂@Fe₃O₄核壳型磁性纳米颗粒和纳米金标抗体悬浊液混合, 用以均相免疫识别人IgG, 借助外加磁场分离纯化, 在免疫复合物悬浊液中加入铜增强试剂进行沉积放大反应, 再将铜用稀硝酸溶解并进行溶出伏安分析检测. 结果表明, 与基于固相反应的金属免疫分析法相比, 所提出的基于均相反应和磁分离原理的方法具有操作简单、分析时间短等优点. 该方法显示出明显增强的人IgG检测性能, 其线性检测范围为01~1000 ng/mL, 检出限为73 pg/mL. 此外, 将其用于实际样品的回收率测定, 结果令人满意.     

慢性心功能衰竭患者尿液的代谢组学研究

采用基于液相色谱-质谱联用的方法对慢性心力衰竭(Chronic heart failure, CHF)患者和正常对照(Control)人群的尿液进行分析, 筛选慢性心力衰竭患者尿液中的差异代谢物, 研究其发病机制, 并为临床治疗提供科学依据.选择15个慢性心力衰竭患者(年龄(62.27±3.14)岁)及15个正常人(年龄(65.41±4.63)岁), 采用高分辨度快速液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(RRLC-QTOF/MS)技术对尿液代谢物进行分析, 采用主成分分析(PCA)对两组代谢物进行分类, 并筛选潜在生物标记物;运用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)建模, 考察生物标记物对疾病筛选的预测能力.研究结果表明, CHF组和Control组尿液代谢物谱能得到很好的区分, 发现并鉴定了2种潜在生物标记物尿苷及丙氨酰色氨酸, 提示嘧啶代谢和色氨酸代谢可能在心力衰竭发生发展中有重要作用.     

细交链格孢菌酮酸间接竞争酶联免疫检测方法及配套试剂盒的研制

建立了间接竞争酶联免疫吸附法检测食品中细交链格孢酮酸(Tenuazonic Acid,TA)残留,并研制快速检测试剂盒。采用肟化法对TA进行衍生化,活泼酯法偶联半抗原和载体蛋白得到人工抗原TAO-BSA和TAO-KLH,以TAO-KLH作为免疫原免疫雌性Balb/c小鼠制备特异性抗体。对包被浓度、包被时间、封闭液类型、抗体工作浓度、二抗稀释度、底物显色时间等参数进行研究,建立了TA残留间接竞争酶联免疫检测方法并进行了配套试剂盒的研制。该试剂盒半抑制浓度Ic_(50)为1.48ng/mL,检测线性范围为0.06~35.95ng/mL(R~2=0.9941);检测限为0.02ng/mL;加标样品平均回收率大于88.50%;试剂盒的批间和批内平均变异系数分别为2.84%和9.49%,与食品中常见真菌毒素交叉反应率均小于1%。     

管式磁性微粒子化学发光免疫分析法测定人尿液中的雌三醇

待测尿液中的雌三醇、辣根过氧化物酶标记的雌三醇与异硫氰酸荧光素(FITC)标记的兔抗雌三醇抗体在均相体系中发生竞争性免疫反应,再加入用羊抗FITC抗体包被的磁微粒,反应生成物结合在磁微粒上,在磁场中经分离、洗涤后加发光底物,检测发光强度(RLU),测定尿液中雌三醇的含量。通过对检测条件的优化,建立了磁性微粒子化学发光免疫分析法测定人尿液中雌三醇的方法,并对正常男性、女性和孕妇的尿液中雌三醇含量进行了测定。结果表明,本方法的线性范围为1～100μg/L,检出限为0.25μg/L,具有很高的灵敏度;批内相对标准偏差<14%;批间相对标准偏差<7%,具有良好的稳定性和重现性。     

A Novel Fluorescence Immunoassay Based on Two-time Amplified Fluorescence Signal by Hemin and Magnetic Nanoparticles for the Detection of Antigen

Abstract

A novel, selective, and sensitive magnetic-mimetic enzyme fluorescence immunoassay method for antigen detection has been developed by taking advantage of a magnetic separation process and the amplification feature of the hemin label. This method is based on a twice amplified fluorescence signal. The signal is first amplified due to the ultrasmall size and the high surface-to-volume ratio of the silica-coated magnetite nanoparticles, which enable the nanoparticles to carry much more antibodies. Second, the mimetic enzyme (hemin) as a labeling reagent catalyzes the reaction of p-hydroxyphenyl acetic acid and H₂O₂ can further amplify the fluorescence signal. This protocol was also evaluated for a sandwich-type immunoassay of human IgG, and the calibration graph for human IgG was linear over the range of 0–100 ng mL^?1 with a detection limit of 9.8 ng mL^?1. This method can easily separate magnetic nanoparticles from the solution, which simplified the process and played a promising role for various applications in immunoassay.     

Development of An Amperometric Immunoassay Based on An Highly Dispersed Immunoelectrode

Abstract

An amperometric immunoassay technique utilizing a highly dispersed immunoelectrode was developed. The assay method is based on the ‘sandwich’ scheme of immunointeraction. Rabbit IgG has been used as model analyte. Horseradish peroxidase labelled conjugates were employed coupled with amperometric detection of iodine reduction. Highly dispersed ULTI carbon serves as an immunosorbent and at the same time as an electrode material. It was found that the dependence of immunoelectrode response on the time of incubation during the second stage of ‘sandwich’ -based assay was complex. This is probably due to non-equilibrium immuno-agglomeration of sub-micron sized particles of immunosorbent. The improvement in the sensitivity of immunoelectrode by increasing the amount of immunosorbent was demonstrated. The increase in the magnitude of the immunoelectrode response is proportional to the increase of the amount of immunosorbent. A detection limit of 10 pM has been achieved with an overall assay time of less than 20 minutes.