噬菌体展示的白色念珠菌热休克蛋白90特异表位在小鼠体内诱发的免疫应答

将展示白色念珠菌热休克蛋白(HSP)90特异表位的杂合噬菌体作为抗原免疫C57BL/6J小鼠,以检测该抗原在小鼠体内诱发的体液免疫和细胞免疫.实验结果表明:抗原PA刺激机体产生了较强的抗白色念珠菌HSP90特异性抗体;脾CD4 T和CD8 T淋巴细胞出现率明显增高;脾细胞分泌IL-2的能力有增高趋势.此外,将免疫后的小鼠通过尾静脉进行系统性白色念珠菌感染,采用组织病理学方法观察了抗原对小鼠肾脏白色念珠菌寄居数量的影响,实验结果表明,抗原对系统性白色念珠菌感染具有明显的保护作用.     

多肽在丝状噬菌体外壳蛋白上的展示

利用基因工程方法将丝状噬菌体ｆｄ基因８克隆入ｐＫＫ２３３－３质粒中,将人工合成的六个氨基酸残基的多肽基因插入到修饰后的质粒载体中,并制备了杂合噬菌体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明,外源多肽基因得到了正常表达,其产物展示于丝状噬菌体的外壳蛋白上。     

百合无症病毒衣壳蛋白基因克隆和蛋白分析

根据已报道的LSV CP基因序列合成两条寡聚核苷酸引物,模板为感染LSV的百合叶片的总RNA,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出大小为876bp的LSV CP基因,经测序后,对该基因编码区全长序列及相应的氨基酸序列用生物信息学软件系统进行序列分析及结构功能预测.结果表明:该基因由876个核苷酸组成,编码291个氨基酸;与GeneBank公布的其他LSV分离物的基因序列同源性为93.4%～99.0%,氨基酸同源性为84.8%～99.5%;它含有一个卷曲螺旋结构和多个磷酸化位点,平均疏水值为-0.432;含有Carlaviruses完整的衣壳蛋白保守结构域,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主.     

噬菌体展示外源多肽的免疫原性研究

利用噬菌体展示技术将丝状噬菌体fd基因8克隆入pKK223-3质粒中，将白色念珠菌特异表位基因插入到修饰后的质粒载体中，并制备了杂合噬菌体，利用纯化的该表位抗原PA免疫小鼠，结果表明该噬菌体-表位抗原PA在有无佐剂存在的情况下均产生抗体，用ELISA方法采用双波长（450/630nm)检测抗体，其在有无佐剂存在的情况下光密度值无明显差别，免疫后小鼠脾淋巴细胞在有无佐剂的情况下均产生明显增殖，未见明显的毒副作用，具有良好的安全性，该方法产生的抗体与传统的合成多肽相比具有方法简便、低价高效等特点，它将成为生产高效低价疫苗的有效途径，该噬菌体-表位抗原PA为真菌疫苗的研制打下基础。     

植物病原丝状真菌分泌蛋白及CAZymes的研究进展

为了明确对植物病原丝状真菌分泌蛋白及CAZymes进一步研究的方向,笔者对丝状真菌分泌蛋白及CAZymes基本特征、分类情况以及预测方法、功能等方面进行综述。基于前人对于植物病原丝状真菌分泌蛋白以及CAZymes的报道,通过文献计量分析方法、SMART保守结构域和motif分析等方法,对丝状真菌分泌蛋白及CAZymes进行了综合分析,统计发现国内关于分泌蛋白的研究较多,对于CAZymes的研究报道较少,诸多分泌蛋白在病原菌侵染致病过程中发挥的功能如何尚未得到全面解析,有关CAZymes的研究也是如此,预测方法基本上是基于生物信息学分析,尚缺少有力的生物学试验验证证据。因此,今后研究需要进一步完善对于分泌蛋白及CAZymes预测的生物信息学分析工具或算法以及开展生物学试验验证; 通过比较植物病原菌与生防菌之间CAZymes数量及功能差异,明确不同菌之间的共性与特性; 此外,学术界应对丝状真菌中CAZymes的分类开展进一步细化研究,以及对比分析不同亚家族的分布情况,更好地解析CAZymes的功能。     

芜菁花叶病毒四川分离物外壳蛋白基因的克隆及序列分析

从四川省3个蔬菜基地感病的甘蓝、花菜、萝卜、叶芥菜分离到芜菁花叶病毒6个分离物.利用 RT-PCR克隆了这6个分离物的外壳蛋白基因(CP), 测定了它们的核苷酸序列并进行了序列分析. 结果表明,6个分离物的 CP基因均为864个碱基,核苷酸序列同源性较高, 达 97.0%～100%;它们与 world-B组分离物的同源性最高,达 92.1%～100%;与 basal-B组分离物的同源性最低,仅 87.6%～90.2%. 基于 TuMV的 CP基因核苷酸序列的分子进化树显示,TuMV分离物可分为4组,本研究所分离到的6个 TuMV四川分离物属于第四组,即 world-B组.     

Evaluation of spatial epitope computational tools based on experimentally-confirmed dataset for protein antigens

Antibody molecules interact with antigen proteins through the epitope area, where the epitope residues are found to be discontinuous or spatial or conformational rather than linear on the protein surface. There are various computational algorithms to predict the spatial epitopes, and each of them have an outstanding performance based on their individual testing dataset. In this work, an independent dataset was created through collection of the epitope residual sites which have been confirmed by experiments. Based on this dataset, 6 popular web-servers developed for B-cell structural epitope prediction, including SEPPA, CEP, DiscoTope, ElliPro, PEPOP and BEpro, were evaluated and compared according to sensitivity, the positive predictive value, the successful pick-up rate and the area under the curve of the receiver operator characteristic (AUC). The results showed that the general performance of spatial epitope prediction tools did obtain substantial advancement, and SEPPA gave the best performance among the 6 tools. However, the current prediction accuracy was still far from satisfaction. Moreover, our comparison elucidated that the performance of the web-servers was significantly affected by their training datasets and the algorithms adopted. In this sense, the results of our research may improve the design of B-cell epitope prediction tools and provide additional clues when the users utilize these tools in their related research.     

Cloning and expression of the Chinese wheat mosaic virus RNA2 coat protein readthrough and 19 ku cysteinerich domains and localization of these proteins

The 5′-terminal (RTn) and 3′-terminal (RTc) halves of the coat protein readthrough domain and the 19 ku cysteine-rich protein of Chinese wheat mosaic virus (CWMV) were amplified by RT-PCR, cloned and expressed in E. coli. Antisera and monoclonal antibodies against these proteins were prepared by immunising these purified proteins to mice. Detection of RTn, RTc and 19 ku proteins in CWMV infected wheat sap and leaf tissue indicated that the RTn and RTc proteins were distributed on the surface of virus particles whereas the 19 ku protein was in the cytoplasm of the infected wheat cells.     

磁化处理对吸波涂层吸波性能的影响

按相同比例制备了两组掺杂Mn-Zn铁氧体复合聚苯胺吸波涂层．一组放入外磁场中磁化,一组放置在空气中,然后将两组样品分别放入3cm波导测量线中,在9．2GHz的频率点处测量其电磁参数及吸波性能．吸波涂层在外界磁场处理后,涂层获得较高的各向异性．从而影响到涂层的电磁参数及吸波性能．结果表明,经磁化处理的吸波涂层的吸波效果优于未磁化处理的吸波涂层,这给出了一种增加吸波涂层吸波效果的方法．     

鸡白痢沙门氏菌O_(12)特异性噬菌体的分离及生物学特性研究

采用双层平板培养法从成都某养鸡场的污水样本中分离得到一株鸡白痢沙门氏菌O12(宿主菌)的噬菌体(Ph-1),并对菌斑形态及理化特性进行了初步研究.试验结果显示,纯化后该噬菌体的噬菌斑直径约3mm;经高于60℃温度处理1h后噬菌体失活;PH5-7时该噬菌体可保持较高效价和较强的紫外线耐受性;该噬菌体的最佳感染复数(MOI)为0.01-0.001;一步生长曲线显示该噬菌体的潜伏期为40min,裂解期持续60min.     

236例儿科抗菌素使用对比分析

目的为了解儿科抗菌素应用的变化及现状,探讨改善儿科抗菌素滥用趋势的途径。方法分别随机抽取时间跨度10年两组儿科住院病历,对其诊断,用药指征、用药时间、用药种类、用药量进行对比分析。结果住院病例全部使用抗菌素、X线、实验室检查支持使用抗菌素分别为75%和47.1%,抗菌素越用越新,用量偏大。结论必须建立系统的到位的干预措施,强化继续教育,加强知识更新和病原微生物的临床研究。     

鸡白痢沙门氏菌O12特异性噬菌体的分离及生物学特性研究

采用双层平板培养法从成都某养鸡场的污水样本中分离得到一株鸡白痢沙门氏菌O₁₂(宿主菌)的噬菌体(Ph-1), 并对菌斑形态及理化特性进行了初步研究. 试验结果显示, 纯化后该噬菌体的噬菌斑直径约3mm; 经高于60℃温度处理1h 后噬菌体失活; PH5-7时该噬菌体可保持较高效价和较强的紫外线耐受性; 该噬菌体的最佳感染复数(MOI)为 0.01-0.001; 一步生长曲线显示该噬菌体的潜伏期为40min, 裂解期持续60min.     

鸡白痢沙门氏菌O12特异性噬菌体的分离及生物学特性研究

采用双层平板培养法从成都某养鸡场的污水样本中分离得到一株鸡白痢沙门氏菌O12 (宿主菌)的噬菌体(Ph-1), 并对菌斑形态及理化特性进行了初步研究. 试验结果显示, 纯化后该噬菌体的噬菌斑直径约3mm; 经高于60℃温度处理1h 后噬菌体失活; PH5-7时该噬菌体可保持较高效价和较强的紫外线耐受性; 该噬菌体的最佳感染复数(MOI)为 0.01-0.001; 一步生长曲线显示该噬菌体的潜伏期为40min, 裂解期持续60min.     

"格陵兰长衣"的构成意识和方法探究

“格陵兰长衣”在构成意识和方法上较前几个世纪大为不同,开始在前后及两侧收省,使上身的褶皱基本消除。同时为了加大下摆而进行了分片裁剪,出现了前所未有的侧身衣片,从而彻底脱离了平面结构,而展现了近世纪的三维、四面、立体结构形式,这种长衣因为特殊的裁剪方法而确立了它在服装史上的地位。     

浆膜下阑尾切除术156例临床分析

目的报告特殊位置和类型的阑尾炎浆膜下切除的手术经验。方法对用传统方法切除困难的156例阑尾,采用浆膜下阑尾切除术。结果全组均顺利切除,无1例出现腹腔内出血、肠瘘及腹膜炎等并发症。结论对传统方法切除困难的一些特殊位置和类型的阑尾炎,采用浆膜下切除的方法,不仅有利于医生的术中操作,更有利于患者的术后恢复。