流动注射双安培法测定柚皮苷

基于柚皮苷的不可逆氧化和氧化铂的不可逆还原构成双安培检测体系应用于柚皮苷的直接检测。使用两支经阳极化预处理的铂电极,在外加电压为0 V时,通过偶合柚皮苷在一支电极上的氧化和氧化铂在另一支电极上的还原两个不可逆电极过程,构成流动注射双安培检测体系。实验发现,在pH 9.62BR(Briton Robinson)缓冲溶液中,测得柚皮苷氧化电流与其浓度在6.0×10-5~1.0×10-3mol/L范围内呈良好的线性关系(r=0.9953,n=8),检出限为1.0×10-5mol/L。连续20次测定6.0×10-4mol/L柚皮苷,其峰电流相对标准偏差(RSD)为3.3%。常用药物赋形剂和无机离子均不干扰柚皮苷的测定。方法用于模拟样品中柚皮苷的测定。     

近红外光谱法快速测定化橘红中柚皮苷的含量

利用近红外光谱快速测定技术,建立化橘红药材中柚皮苷含量测定模型;用高效液相色谱法(HPLC)测定44批不同产地的化橘红中柚皮苷的含量作为参考值,使用2350～2199 nm、1750～1600 nm和1301～1150 nm波长范围的近红外光谱检测技术,利用偏最小二乘回归分析结合交叉验证法,建立快速测定化橘红中柚皮苷含量的模型;结果表明,所建立的校正模型的相关系数和内部交叉验证均方差分别为:R~2=0.978,RMSECV=0.997,预测结果良好。该法的建立证明了近红外光谱技术应用于化橘红药材中柚皮苷含量测定的可行性;近红外光谱结合偏最小二乘法(NIR-PLS)可以快速评估化橘红药材中柚皮苷的含量,可以应用于大批化橘红药材中柚皮苷的含量测定。     

柚皮苷双席夫碱的合成及生物活性研究

将柚皮苷与1,3-丙二胺缩合得到一种柚皮苷双席夫碱。通过Th T实验、MTT实验、SOD检测以及细胞内ROS检测考察了该化合物生物活性。实验结果发现,该化合物能有效阻止Cu~(2+)诱导的Aβ_(1-42)聚集、抑制Aβ_(1-42)介导的神经毒性,与未修饰的柚皮苷相比,生物活性明显提高;该化合物能减少经Cu~(2+)-Aβ_(1-42)处理的PC12细胞中的ROS以及提高Cu~(2+)-Aβ_(1-42)处理的PC12细胞中SOD活性。这一研究工作显示,柚皮苷双席夫碱可能是一种具有潜在治疗阿尔茨海默病的药物。     

反相高效液相色谱法测定中成药风寒咳嗽颗粒中橙皮苷和柚皮苷的含量

提出了反相高效液相色谱法测定中成药风寒咳嗽颗粒中橙皮苷和柚皮苷含量的方法。采用SHIMADZU VP-ODS(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱;乙-腈pH 3.5磷酸(22+78)混合溶液为流动相,流量为1.2 mL.min-1,检测波长为283 nm。待测组分与其他组分分离度良好(R值1.5),橙皮苷和柚皮苷线性范围分别为2.8~56.0 mg.L-1和0.43~8.6 mg.L-1,橙皮苷和柚皮苷的平均回收率分别为99.2%,98.7%,相对标准偏差(n=5)分别为1.2%,2.1%。     

免疫亲和色谱特异性剔除中药方剂四逆散中的柚皮苷

为了获得剔除柚皮苷(naringin)的中药方剂四逆散样品以供其药理活性探讨时使用,制备了抗柚皮苷抗体的免疫亲和色谱柱,用于特异性地剔除四逆散中的柚皮苷。首先合成了柚皮苷的完全抗原柚皮苷与牛血清白蛋白的结合物naringin-BSA,并用naringin-BSA对新西兰兔进行免疫获得抗血清,再将其纯化后与经CNBr活化的Sepharose 4B凝胶共价偶联制成免疫亲和色谱柱。将四逆散提取物样品溶液上样该色谱柱,洗脱,制得特异性剔除了柚皮苷的四逆散样品。由检测结果可知,naringin-BSA被成功合成。将其用于免疫新西兰兔,获得的抗血清的效价经酶联免疫吸附法（ELISA）测定达到1∶30000,抗体IgG的纯度达94%,交叉反应率低。在IgG与Sepharose 4B合成的IgG-Sepharose免疫亲和色谱柱中,IgG的偶联率为87%。用该免疫亲和色谱柱处理四逆散后,其中所含的柚皮苷几乎完全被剔除。结果证明,利用抗柚皮苷免疫亲和色谱,能特异性地剔除四逆散或其他样品中的柚皮苷成分。     

橙汁类饮料中橙皮苷、柚皮苷含量的测定

建立了反相高效液相色谱法测定橙汁中橙皮苷和柚皮苷的方法,并对不同厂家生产的橙汁饮料中橙皮苷和柚皮苷进行了比较.采用SHIMADZUVPODS(4.6 mm×150 nn,5μm)色谱柱;V(乙腈):V(磷酸水溶液)=22:78(pH 3.5)为流动相,流速为1.2 Ml/min;检测波长为283 nm.结果待测组分与其他组分分离度良好(>1.5),橙皮苷和柚皮苷线性范围分别为2.8～56.0 μg/mL和0.43～8.6μg/mL,橙皮苷和柚皮苷的平均回收率分别为99.9%,98.9%,RsD分别为1.9%,1.3%.     

环糊精修饰毛细管胶束电动色谱同时分离检测橙皮苷和柚皮苷对映体

本文利用环糊精修饰毛细管胶束电动色谱法(CD-MEKC)同时分离检测橙皮苷和柚皮苷对映体。实验优化的条件为:以60mmol/L胆酸钠(SC)+30mmol/L羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)+20 mmol/L NaH2PO4-100 mmol/L NaOH(pH=9.0,97%(V/V))+3%(V/V)甲醇为运行缓冲液,分离电压25kV,紫外检测波长214nm。在上述最佳条件下,橙皮苷和柚皮苷对映体在9min内得到完全分离,橙皮苷对映体的检测限(S/N=3)分别为0.13μg/mL和0.25μg/mL;柚皮苷对映体的检测限(S/N=3)分别为0.14μg/mL和0.07μg/mL。将所建立的方法用于胃苏颗粒制剂中橙皮苷和柚皮苷的对映体测定,回收率在86.0%~113.2%之间。     

高效液相色谱法测定柑橘汁中的柠檬苦素和柚皮苷

柑橘汁的苦味主要是由于柚皮苷和柠檬苦素的存在所致,其含量的测定可用于控制柑橘类果汁的质量。采用高效液相色谱法在KR100-5C18(4.6 mm i.d.×250 mm,5 μm)上,分别以乙腈-四氢呋喃-水(体积比为17.5∶17.5∶65)和甲醇-冰醋酸-水(体积比为40∶1∶59)为流动相（流速均为1 mL/min）,在207 nm和283 nm检测波长下分别测定了柠檬苦素和柚皮苷。实验结果表明,柠檬苦素在1.00～50.00 mg/L时线性关系良好(r=0.9992),检出限为0.07 μg,平均加标回收率为98.69%,相对标准偏差（RSD）为2.5%;柚皮苷在20.00～160.00 mg/L时线性关系良好(r=0.9988),检出限为0.14 μg,平均加标回收率为100.13%,RSD为1.5%。用该法检测柑橘汁样品中的柠檬苦素与柚皮苷,方法简便、快速、准确。     

柚皮苷分子印迹传感器的制备与应用

以邻氨基酚为单体,无电化学活性的柚皮苷为模板分子,采用循环伏安法(扫速为100mV/s)在碳电极上往复扫描30次,电聚合出具有识别柚皮苷分子功能的敏感膜。以扫描电子显微镜(SEM)、X射线全反射(XRR)及电化学方法对该印迹传感器进行表征。结果表明,印迹传感器敏感膜与非印迹膜在形貌结构和电化学特性方面有明显的不同。此传感器对柚皮苷有较好的选择性,响应快(30s),在6.0×10-5～1.4×10-4mol/L范围内呈线性关系,且重现性好(RSD=1.8%,n=5);传感器对柚皮苷的检出限为1.6×10-5mol/L。     

TLC-HPLC-Q-TOF-MS法快速鉴定柑橘提取物消毒液中桔皮素、蜜橘黄素、新橙皮苷和柚皮苷及其含量测定

建立了薄层色谱-高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法联用技术(TLC-HPLC-QTOF-MS)快速鉴定柑橘提取物消毒液中桔皮素、蜜橘黄素、新橙皮苷和柚皮苷4种活性物质并测定其含量的方法。样品经氯仿-丙酮洗脱剂梯度洗脱,TLC检识,半制备HPLC纯化,HPLCMS/MS鉴定及HPLC含量测定。结果表明,以氯仿-丙酮(3:1,V/V)作为展开剂分离效果最好。以甲醇-水(7:3,V/V)作为流动相测定桔皮素和蜜橘黄素的含量,以甲醇-0.2%乙酸(13:7,V/V)作为流动相对柚皮苷和新橙皮苷进行定性和定量分析,分离度及峰形最佳。方法测定桔皮素、蜜橘黄素、新橙皮苷和柚皮苷含量的相关系数均大于0.999,检测限分别为:0.3,0.1,0.4,1.2μg/mL,相对标准偏差分别为1.9%,1.9%,2.2%,1.5%,平均回收率分别为97.0%,103.5%,97.8%,100.1%。方法可用于柑橘提取物消毒液质量控制。     

SBA-15固定化黑曲霉脂肪酶对柚皮苷的区域选择性酰化

柚皮苷(Naringin)是一种天然存在的生物类黄酮,分布于较多种类的水果和蔬菜中,具有抗癌症、抗氧化和保护心血管等多种生物活性。但因其较差的生物利用率致使其深度开发和临床治疗应用面临着严重阻碍。为了提高柚皮苷的生物利用价值,采用SBA-15固定化黑曲霉脂肪酶(Aspergillus niger lipase, ANL)对柚皮苷进行了酶法转化研究。系统考察了在非水相有机介质中固定化ANL催化柚皮苷酰基化反应的酶活及区域选择性的影响因素。结果表明：酰基供体、反应溶剂、水活度及反应温度对柚皮苷的酰化反应具有不同程度的影响。在最佳催化条件下,酶活最高(153±5μmol·h^-1·g^-1),酶转化率可达92.00%±2.43%,且固定化ANL对柚皮苷的C-6′位置具有区域选择性(>99%)。     

超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱法鉴定育发化妆品中4种植物功效成分

建立了固相萃取/超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)鉴定育发化妆品中4种植物功效成分(槲皮苷、何首乌苷、芦丁和柚皮苷)的分析方法。样品采用甲醇超声提取,上清液经2%/甲酸水溶液稀释后上PAX阴离子固相萃取柱净化。以甲醇和0.002%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,在CSH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm,Waters)上分离,于UPLC-QTOF-MS负离子模式下进行检测。槲皮苷、何首乌苷和芦丁采用外标法定量测定;5%氨水溶液条件下,柚皮苷因在PAX上的吸附过程中结构转化为柚皮苷查尔酮,只能进行定性鉴定。在优化条件下,槲皮苷、何首乌苷和芦丁在5~200μg·L-1浓度范围内均呈良好线性,相关系数大于0.999;方法定量下限(LOQ,S/N=10)为0.03~0.1 mg·kg-1;在洗发水基质中的加标回收率为80.9%~104.7%,相对标准偏差(n=6)不大19.6%。该方法准确、适用性强,已成功应用于育发化妆品中槲皮苷、何首乌苷和芦丁的定性定量检测以及柚皮苷的定性鉴定。     

高效液相色谱法测定野生和人工种植库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素的含量

本文建立了新疆库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素两种活性成分的高效液相色谱同时测定方法,并实现了野生及人工栽培库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素的检测。采用Agilent HC-C_(18)色谱柱(250×4.6mm,5μm)分离,以甲醇-0.2%HAc水溶液作为流动相,在柱温为室温和流速1.00mL/min条件下进行梯度洗脱,实现了两种活性成分之间以及它们与干扰组分的良好分离。柚皮苷和木犀草素的线性范围分别为120~1 440mg/L(r=0.9998)和17.5~210mg/L(r=0.9999),加标回收率分别为93.8%~100.2%(RSD=1.8%~2.7%,n=3)和98.3%~100.6%(RSD=1.3%~2.9%,n=3)。研究结果表明野生库鲁木提草中柚皮苷和木犀草素的含量更高。     

柚皮苷与人血清白蛋白相互作用的研究

用荧光、紫外光谱、分子对接研究了柚皮苷与人血清白蛋白(HSA)在pH=7.40的Tris-HCl缓冲溶液中相互作用的情况。结果表明,柚皮苷对人血清白蛋白的内源荧光有明显的猝灭作用,猝灭过程为动态猝灭。根据Stern-Volmer方程计算得到柚皮苷与HSA在293、298和310 K下的结合常数分别为2.472×105、2.210×105和1.392×104L·mol-1,结合位点数约为1。由实验计算出热力学参数焓变ΔH为-16.8 kJ·mol-1,ΔS为46.0 J·mol-1·K-1,推断出柚皮苷与人血清白蛋白之间主要靠疏水作用和静电引力结合,与分子模拟的结果相同。同时采用同步荧光技术考察了柚皮苷对HSA构象的影响。     

柚皮苷分子印迹膜的水相制备与识别

以柚皮苷为印迹分子,PEG为致孔剂,在水相中制备了柚皮苷分子印迹壳聚糖膜.分别讨论了交联剂、致孔剂和印迹分子的用量对印迹膜结构和性能的影响.用SEM观察了致孔剂对印迹膜形貌及孔径的影响.紫外吸收光谱分析、柚皮苷在不同体系中的溶解度变化,以及红外光谱分析的结果表明功能聚合物壳聚糖和模板分子柚皮苷间形成了氢键.膜的渗透实验结果表明,在水相中,柚皮苷分子印迹膜能有效地从新橙皮苷和柚皮苷的混合液中分离出印迹分子柚皮苷,选择透过率为11.16%.     

柚皮素、柚皮苷与溶菌酶相互作用的荧光光谱法研究

应用荧光光谱法研究了50%甲醇/水体系中柚皮素、柚皮苷与溶菌酶分子间的结合反应. 以Lineweaver-Burk双倒数方程和能量传递原理分别计算了两者与溶菌酶反应的结合常数(K)和结合距离(r): K_柚皮素^{25 ℃}＝4.00×10⁴, K_柚皮苷^{25 ℃}＝3.48×10⁴; r_柚皮素＝3.21 nm, r_柚皮苷＝3.30 nm, 以及由热力学参数的计算判断了两种分子与溶菌酶之间的作用力类型. 结果表明: 柚皮素、柚皮苷均能与溶菌酶以疏水作用相结合形成非共价化合物, 从而导致溶菌酶内在荧光的静态猝灭; 相对柚皮素, 柚皮苷与溶菌酶的结合距离增大, 作用强度减弱, 表明黄酮分子上多糖的取代不利于黄酮分子与蛋白之间的亲和作用. 根据Haslam等提出的多酚-蛋白质反应模型, 从分子水平初步探讨了糖取代对黄酮分子与蛋白相互作用减弱的原因.     

高效液相色谱-电喷雾质谱法测定枳壳中黄酮苷类化合物

利用高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术研究了枳壳中的黄酮苷类化合物.实验采用反相C18色谱柱,二元线性梯度洗脱,分离并检测了枳壳中的6种黄酮苷类化合物;它们分别是新圣草苷(neoeriocitrin)、异柚皮苷(isonaringin)、柚皮苷(naringin)、橙皮苷(hesperidin)、新橙皮苷(neohesperidin)和新枸橘苷(neoponcirin);通过与电喷雾质谱联用获得了这6种黄酮苷的准分子离子峰([M+H]+)及分子加钠峰([M+Na]+),利用质谱的碰撞诱导解离技术获得了碎片裂解信息.通过这此质谱信息并结合文献,对这6种化合物进行了结构鉴定.     

超高效液相色谱法快速测定陈皮及其提取物中4种黄酮类化合物的含量北大核心CSCD

陈皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟果皮[1],具有理气健脾、燥湿化痰等功效,在许多中药复方制剂中均有添加。陈皮的活性成分主要为黄酮类化合物,包括橙皮苷、芸香柚皮苷、柚皮苷、新橙皮苷以及多甲氧基黄酮(如川陈皮素和红橘素等)[2-5]。     

柚皮苷的伏安行为

柚皮苷在pH 8.3的0.05 mol·L-1氯化钾支持电解质溶液中,产生灵敏的线性扫描极谱峰,峰电位为-1.31 V(vs.Ag/AgCl).峰电流与柚皮苷浓度在2.0×10-6～1.5×10-5mol·L-1范围内呈线性关系.用线性扫描和循环伏安法研究体系的伏安行为,结果表明,该电极反应过程为具有吸附性的不可逆过程.     

橘、橙、柚皮中橙皮苷和柚皮苷含量的测定

橘、橙、柚皮分别为芸香科植物橘(citrus reticulata Blnco)、橙(citrus simenis ( L.) Osbeck)、柚(citrus grandis ( L.) Osbeck)及其栽培变种的干燥成熟果皮.橘皮(陈皮)为历版药典收录的中药材[1],而橙、柚皮资源的开发多年来被人们忽略,较多地重视其果实的利用,除极少部分作为中药材或提取果胶和香精油的原料外,在果实食用或加工后将占果总重量约40%~50%果皮渣弃去,从环境、经济和资源利用角度都不尽科学合理.橘、橙、柚皮中均含有橙皮苷(hesperidin)和柚皮苷(naringin)2种生物活性成分[2,3].