双水相萃取法从发酵液中分离提取α-淀粉酶和蛋白酶的研究

以ＰＥＧ／硫酸铵双水相体系，经一次萃取从α－淀粉酶发酵液中分离提取α－淀粉酶和蛋白酶。萃取最适宜的条件为１５％ＰＥＧ１０００、２０％（ＮＨ４）２ＳＯ４，ｐＨ＝８，α－淀粉酶收率９０％，分配系数为１９．６；与蛋白酶的分离系数高达１５．１，比活率为原发酵液的１．５倍，蛋白酶在水相中的收率高于６０％。本文对反萃取条件进行了初步研究。与传统的提取法相比，本法可直接处理发酵粗滤液，提高工效，降低能耗和酶活损     

国产大孔吸附树脂浓集分离赤霉素

研究了７种国产大孔吸附树脂对赤霉素的吸附能力,其中Ｓ－８吸附效果较好,赤霉素固／液分配系数为１２．４４,动态吸附容量为４．０６ｍｇ／ｍｌ。８０％丙酮水地赤霉素的洗脱能力较强。用工业赤霉素发酵液进行吸附－解吸实验,分配系数可提高至２５．８８（ＰＨ＝２）,动态吸附容量可提高至１０．０２ｍｇ／ｍｌ,赤霉素收率可达９０％以上,且经吸附－解吸循环,可将发酵液中赤霉素浓缩７倍以上。     

离子交换法从发酵液中提取α-酮基-L-古龙酸的工艺研究

本文就离子交换法从发酵液中提取α-酮基-L-古龙酸(以下简称KGA)的可行性进行了研究。比较系统地研究了大孔阴离子交换树脂对发酵液中KFA的静态和动态交换吸附性能及影响因素,并对洗脱条件进行了探索。实验结果表明,用离子交换法从发酵液中提取KGA的工艺是切实可行的。     

大孔吸附树脂提取酸性蛋白酶抑制剂研究

采用CAD-40大孔吸附树脂吸附法代替正丁醇溶剂萃取法从发酵液中提取酸性蛋白酶抑制剂是可行的。研究结果表明在pH=6条件下吸附效果最佳,经水或0.05摩尔/升的氨水淋洗后,用95％乙醇洗脱,其提取率比溶剂萃取法提高15％。     

利用离子交换色谱快速纯化α－淀粉酶

 本文开发了一个用强阴离子高效液相色谱分离纯化α－淀粉酶的的新方法。详细讨论了纯比的最佳条件＊在给定的条件下纯化工业α－淀粉酶，其活性回收率达９６％，比活性为３８８ｕ／ｍｇ蛋白，纯化倍数提高３０倍，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，得到分子量分别为５８Ｋ和３３Ｋ两条α－淀粉酶谱带。此法纯化α－淀粉酶简单，快速，效率高。不仅能纯化工业粗酶，也可纯化其它来源的α－淀粉酶。     

利用离子交换色谱快速纯化α－淀粉酶

本文开发了一个用强阴离子高效液相色谱分离纯化α－淀粉酶的的新方法。详细讨论了纯比的最佳条件＊在给定的条件下纯化工业α－淀粉酶，其活性回收率达９６％，比活性为３８８ｕ／ｍｇ蛋白，纯化倍数提高３０倍，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，得到分子量分别为５８Ｋ和３３Ｋ两条α－淀粉酶谱带。此法纯化α－淀粉酶简单，快速，效率高。不仅能纯化工业粗酶，也可纯化其它来源的α－淀粉酶。     

枯草杆菌α－淀粉酶在色谱介质上的热变性行为研究

通过用前沿分析测定热力学参数的方法,研究了枯草杆菌α－淀粉酶在几种色谱介质上的热变性行为。实验结果表明,在RP-C18反相介质、Zn2+螯合的Chelating Sepharose Fast-Flow亲和介质和WCX-1阳离子交换介质上,当温度分别低于或超过30℃时,α－淀粉酶分子分别以一种稳定的构象存在;而在PEG-400 和修饰的PEG-400疏水色谱介质上,当温度分别低于40℃和30℃时,α－淀粉酶分子分别以一种稳定的构象存在,但当温度分别高于40℃和30℃时,α－淀粉酶分子的构象会发生剧烈的变化。同时,通过测定α－淀粉酶分子在自由溶液以及在PEG-400 和修饰的PEG-400疏水色谱介质上的热失活曲线,可以得出结论：在液相色谱过程中,色谱介质会诱导α－淀粉酶分子构象的变化,并促进它们的热变性;而在疏水色谱中,色谱介质的疏水性越高,α－淀粉酶分子在其上的构象变化温度越低。     

大孔吸附树脂提取麦拓莱霉素的工艺研究

研究了用大孔吸附树脂从发酵液中分离提取新型大环内酯类抗生素-麦拓莱霉素的吸附工艺过程，对吸附条件进行了优化，得到了适宜的操作条件．结果表明：NKA树脂为最佳吸附剂：吸附最佳pH值为10．32；吸附流速选择为1ml／min；NaCl的加入对吸附不利，选择NaCl浓度为0．6％左右，本实验条件下，发酵液中的麦拓莱霉素浓度为0．18mg／ml；NKA的吸附量可达33．7mg／g树脂。     

用高效疏水色谱法对多种脲变α—淀粉酶折叠中间体的研究

用高效疏水色谱法对用脲变性的α－淀粉酶的体外折叠中间体进行了分离，发现脲变α－淀粉酶折叠至少有１９个中间体，而且，这些中间体在色谱流出液中可稳定一周。这一结论已由电泳、离子交换色谱和体积排阻色谱法证实。此外，还用紫外吸收光谱和荧光发射光谱研究了这些折叠中间体与天然α－淀粉酶构象之间的差异。     

离子交换法从发酵液中提取L-异亮氨酸

采用天然高分子絮凝剂壳聚糖对L-异亮氨酸发酵液进行预处理，在发酵液pH=2，壳聚糖用量30mg／L的条件下可取得较好的絮凝效果．并通过静态吸附实验，考察了pH和L—异亮氨酸浓度对平衡吸附量的影响．最后确定了732″离子交换树脂提取L-异亮氨酸的最佳工艺条件：上柱发酵液pH=2，上样速度0．6BV／h，洗脱液为0.5mol／L的NH4Cl．流出液经脱色、浓缩结晶后得L-异亮氨酸成品，总提取率为55％．     

用高效疏水色谱法对多种脲变α-淀粉酶折叠中间体的研究

用高效疏水色谱法对用脲变性的α-淀粉酶的体外折叠中间体进行了分离，发现脲变α-淀粉酶折叠至少有19个中间体，而且，这些中间体在色谱流出液中可稳定一周．这一结论已由电泳、离子交换色谱和体积排阻色谱法证实．此外，还用紫外吸收光谱和荧光发射光谱研究了这些折叠中间体与天然α-淀粉酶构象之间的差异．     

DA201树脂对伊枯草菌素A动态吸附性能的研究

伊枯草菌素A是一种具有代表性的微生物源两性环脂肽类化合物。采用DA201大孔吸附树脂从枯草芽孢杆菌发酵液中分离提取伊枯草菌素A,考察了不同吸附、解吸条件对其动态吸附性能的影响。结果表明,DA201型树脂对发酵液中伊枯草菌素A的饱和吸附容量可达到3.48mg/g;动态吸附中最佳吸附流速为1BV/h,其吸附率可以达到95.56%;采用95%乙醇作为洗脱剂,以1BV/h的流速洗脱,其洗脱率可以达到92.41%;DA201型树脂是一种从发酵液中分离和提取伊枯草菌素A的较理想的吸附剂。     

1,5—二—(2—噻唑)甲簪官能基螯合树脂的合成及其特性研究

通过偶合反应将1,5—二—(2—噻唑)甲(?)接到苯乙烯—二乙烯苯的骨架上,得到一种含氮、硫配位原子的螯合树脂(1)。该树脂1对Au~(3+)的吸附容量最高达1.1mmol/g。吸附在树脂上的金络离子可以用5％硫脲——盐酸(0.1mol/L)溶液进行洗脱,回收率为84％。对pd~z+可被5％硫脲——0.1mol/LHCI热溶液定量洗脱。     

树脂吸附法D-核糖发酵液脱色的研究

首次考察了六种不同树脂对D－核糖发酵液的脱色作用,详细地研究了吸附工艺条件对树脂脱色能力的影响．试验结果表明,在25℃下,以1.0BV／h的流速进行吸附时,NKA－Ⅱ树脂对D－核糖发酵液具有良好的脱色效果,脱色率91％,处理量5.7BV;并对树脂再生的条件进行了较详尽研究。     

用大孔吸附树脂从发酵液中提取顺-1,2-二羟基-3,5-环己二烯

顺-1，2-二羟基-3，5-环己二烯(DHCD)是化学合戍高性能材料1．4-聚苯的单体。本文系统地研究了用大孔吸附树脂从发酵液中提取DHCD的方法，进行了树脂的筛选．考查了流速．溶液中葡萄糖浓度等因素对吸附能力的影响．选择极性的NKA-Ⅱ树脂作为吸附剂，采用12ml／mm的流速．用甲醇作为洗脱剂对DHCD发酵液进行提取使提取率达到82，2％．大大优于现有的用二氟甲烷萃取的工艺。     

大孔树脂吸附和分离密蒙花黄色素

本文研究了用大孔树脂吸附和分离密蒙花黄色素，比较了四种树脂对密蒙花黄色素的吸附。选用经x—5作吸附剂，洗脱剂用60％乙醇，产品质量较传统法好，提取率达8％，x－5树脂非常稳定，使用15次后其吸附率仅降低4．95％。     

免疫球蛋白吸附剂体外研究

本文探索了聚丙烯酰胺功能化树脂对人血清免疫球蛋白的吸附。丙烯酰胺共聚物在甲醛作用下,与α—氨基酸相连,能够选择性吸附人血清免疫球蛋白。通过实验发现:交联剂占单体用量10％的共聚物连接D,L—脯氨酸和L—酪氨酸所制备的免疫吸附剂,有较大的吸附量和较好的选择性。本文利用单向免疫扩散法测定吸附前后免疫球蛋白量的变化。     

沥青基球形活性炭对葡萄糖分子的吸附行为研究

考察了沥青基球形活性炭(PSAC)对葡萄糖分子的吸附行为,以探讨其治疗糖尿病的可能性.在不同吸附时间、不同活性炭用量及不同浓度等条件下,测定沥青基球形活性炭对葡萄糖分子的吸附量,根据Langmuir和Freundlich等温线方程对吸附等温线数据进行拟合,检验实验数据与方程的吻合度,确定方程参数.同时,研究了葡萄糖和α-淀粉酶在沥青基球形活性炭上的竞争吸附行为.结果表明,所选用沥青基球形活性炭对葡萄糖分子的吸附在5h内达到吸附平衡;葡萄糖的初始浓度为3g/时,平衡吸附量为71mg/g;平衡吸附量受葡萄糖分子空间构象的影响,且随葡萄糖浓度的升高而增加,吸附等温线数据与Langmuir方程吻合,说明该吸附为单分子层吸附.在葡萄糖分子和α-淀粉酶的共存环境下,沥青基球形活性炭对葡萄糖有较好的吸附选择性.     

大孔吸附树脂X—5对维生素B_(12)的吸附

大孔吸附树脂X—5是一种非离子型的优良吸附剂,骨架成分是苯乙烯—二乙烯苯的交联共聚物。其比表面为550m~2/g,平均孔径为300。X—5吸附树脂对维生素B_(12)有良好的吸附及解吸性能。其吸附率高达97％,吸附量高达132mg/g(干树脂),易于洗脱,洗脱率在98％以上。     

3β,17α,21-三羟基-5α-孕甾-20酮-3β,21-双醋酸酯的微生物转化——化合物S的合成

以剑麻皂素(Tigogenin)制得的中间体3β,17α,21-三羟基-5α-孕甾-20酮-3β,21-双醋酸酯(3)为原料,经诺卡氏菌№ 8018(Nocardia sp.№ 8018)转化为化合物S(1)及少量的△~1化合物S(4)。可采用两种投料方式:用乙醇溶解投料(乙醇浓度为发酵液体积的0.2％),或用固体粉末(粒子为1μ左右)投料(浓度为0.5％),产率均为50％左右。