亚油酸甲酯硅胶聚合物键合相的制备及对蛋白质的分离

1　引　　言从现代分离科学理论计算得出 ,色谱和电泳是目前所知道最好的两种分离方法 ,但是 ,因受各种因素的限制 ,电泳目前尚不能用于生产规模的生物大分子的分离和纯化。这就是把分离和纯化生物大分子 (包括蛋白质、酶、核酸、多糖等 )的研究重点放在色谱上的原因。在生物技术制取蛋白质的多级纯化过程中 ,液相色谱是一个必需步骤。为了获得生物大分子的快速分离就得从基质到键合基团不断改进色谱柱填料。在本文中介绍的柱填料是键合在大孔硅胶上的乙烯基与亚油酸甲酯和二乙烯基苯共聚形成的。从蛋白质混合样品洗脱曲线看出这一填料具有…     

高效液相色谱快速分离生物大分子的大孔硅质固定相的研制及应用

介绍了不同孔径的大孔硅胶基质的制备、二醇固定相的合成及其对蛋白质的色谱分离；考察了焙烧温度对硅胶孔隙度的影响；探讨了流动相中盐浓度和ｐＨ对蛋白质保留时间、柱效、分离度的影响以及硅胶孔径对键合密度和分离性能的影响。该种大孔固定相相对于常规多孔固定相具有小的比表面积、柱容量低、从而有利于生物大分子的微量分离分析。     

高亲水性强阳离子交换色谱填料的制备及其在蛋白质分析中的应用

以具有双孔结构的聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA)微球为基质,以葡萄糖进行表面亲水改性,制备了强阳离子交换色谱填料,并将其用于复杂生命体系中生物大分子的快速而高效的分离、分析与纯化。葡萄糖亲水改性增进了填料的生物相容性,提高了蛋白质样品的回收率;双孔结构及较高的比表面积赋予填料良好的柱渗透性和样品负载量。以标准蛋白质为样品,考察了该填料对生物样品的分离性能。以100 mm×4.6 mm的色谱柱分离4种蛋白质,在6 min内实现了基线分离;以溶菌酶为样品,填料的吸附容量为39.5 g/L,在蛋白质快速分离纯化分析中显示了良好的应用前景。     

高效离子交换膜色谱介质制备及其对蛋白质的分离

制备了一种以纤维素膜为基质,以二乙胺为配基的高效液相离子交换膜色谱介质,并考察了不同柱长、不同洗脱梯度、不同流速下其对几何标准蛋白的分离情况。与高效液相柱色谱相比,这种高效液相膜色谱柱可以更快速的达到蛋白质的分离。即使在较高流速下,柱压仍较低。实验表明,这种高效液相膜分谱柱适合于蛋白质的快速分离。     

二乙烯苯与乙烯基吡咯烷酮共聚硅质填料的制备及对蛋白质的分离

大孔硅胶基质与二乙氧基甲基乙烯基硅烷反应后，再与二乙烯，乙烯基吡咯烷酮共聚，制得新型反相色谱填料。实验结果表明，该填料对蛋白质的分离性能好，柱效高，速度快，惰性好。为生物大分子的高效液相色谱分离提供了一种新型填料。     

ProteinA亲合膜色谱柱的性能及从人血浆中纯化免疫球蛋白的研究

以木纤维为基质,与甲基丙烯酸环氧丙酯共聚接枝合成了复合膜介质,用复合膜介质制备了ｐｒｏｔｅｉｎＡ亲合膜色谱柱,考察了ｐｒｏｔｅｉｎＡ亲合膜色谱柱液相流动特性和吸附性能。实验证明：流速与亲合膜色谱柱柱压呈线性关系,当流速为３ｍＬ／ｍｉｎ时,柱压为１６０ｋＰａ。免疫球蛋白（ＩｇＧ）浓度和上样速度是影响ｐｒｏｔｅｉｎＡ键合容量的重要因素,对其进行了优化研究。用动态吸附法确定了对人ＩｇＧ动态最大吸附能力可达２１．７ｍｇ／ｇ（干介质）。     

氨基己酸为配基的新型弱阳离子交换/疏水双功能色谱固定相对蛋白质的分离纯化

以硅胶为基质、氨基己酸为配基制备了一种新型弱阳离子交换/疏水（WCX/HIC）双功能混合模式色谱固定相。该固定相配基具有一定的疏水性且含有羧基,在高盐浓度下表现为HIC的性质,可作为HIC固定相使用;在低盐浓度条件下表现为离子交换的性质,可作为WCX固定相使用。分别考察了该介质在WCX和HIC两种模式下对标准蛋白质的分离性能,并与商品柱进行比较。结果表明,所合成的WCX/HIC双功能固定相在WCX和HIC两种模式下对蛋白质均有较高的分离度和选择性,且分离能力与商品柱相当,两种模式下标准蛋白质的质量和活性回收率均大于93%,表明该柱具有“一柱二用”的功能,适于生物大分子的分离纯化。基于此双功能色谱柱构建的在线单柱二维液相色谱（2DLC-1C）可在60 min内实现8种蛋白质的快速分离。在70 min内完成了对蛋清中溶菌酶的二维纯化,纯度可达到98.3%。该技术中一根色谱柱可当作两根色谱柱使用,对蛋白质组学研究和重组蛋白药物的生产具有重要的应用价值。     

分离生物大分子的液相色谱固定相

本文介绍了各类用于生物大分子分离的液相色谱填料,并对它们在生物大分子分离及制备中的性能、基本特征作了评述。     

生物相容性分离介质在样品前处理中的应用

生物样品基体复杂,蛋白质等生物大分子的干扰给样品前处理带来很大的困难.近年来,生物相容性分离介质在样品前处理中的应用特别引人注目.本文综述了生物相容性分离介质及其在固相萃取、固相微萃取、微透析样品前处理中应用的进展.     

高效液相色谱法分离蛋白质的大孔硅质固定相的制备及分离机理

介绍了不同孔径的大孔硅胶基质的制备，二醇基和氨基固定相的合成，及其蛋白质的分离特性。探讨了流动相中的盐浓度和pH对蛋白质保留时间的影响，以及在此两种固定相上蛋白质分离机理的比较。由于大孔填料具有小的比表面积、往容量也低，从而有利于作蛋白质等生物大分子的高效快速分离分析。     

膜亲和色谱的现状、发展和应用

文章对膜亲和色谱的原理、特点、设备、过程和发展情况做了介绍，并对亲和膜在整个膜分离技术中的地位、所占的比重及市场预测做了述评，对膜亲和色谱与其它色谱分离技术的优缺点进行了比较。重点介绍了制备亲和膜的材料，活化方法，间隔臂和配基的种类、选择和共价键合方法，配基和配合物产生亲和作用的机理及解离过程和方法。并对膜亲和色谱在酶、蛋白质、核糖核酸等生物大分子纯化分离方面的应用情况做了述评。     

膜亲和色谱的现状、发展和应用

文章对膜亲和色谱的原理、特点、设备、过程和发展情况做了介绍，并对亲和膜在整个膜分离技术中的地位、所占的比重及市场预测做了述评，对膜亲和色谱与其它色谱分离技术的优缺点进行了比较。重点介绍了制备亲和膜的材料，活化方法，问隔臂和配基的种类、选择和共价键合方法，配基和配合物产生亲和作用的机理及解离过程和方法。并对膜亲和色谱在酶、蛋白质、核糖核酸等生物大分子纯化分离方面的应用情况做了述评。     

渗透汽化型酯化膜反应器研究——PVA/PSSA共混聚合物管式复合膜的膜反应性能

聚合物共混是制备具有预定性能的功能膜材料的有效方法．报道了以惰性素烧陶瓷管为支撑体的ＰＶＡ／ＰＳＳＡ共混聚合物管式复合膜的制备及其在渗透汽化型酯化膜反应器中不同实验条件下的膜催化反应性能．探讨了共混膜的组成,反应温度等对膜反应和分离性能的影响以及同步膜分离过程对反应转化率的促进作用．交联ＰＶＡ／ＰＳＳＡ管式复合膜具有良好的催化和分离性能．     

蛋白A连续床亲和毛细管色谱柱的制备及性能考察

人免疫球蛋白 G(HIg G)是一种重要的生物大分子 ,是人血浆中的主要成分之一 ,通常采用免疫学的方法测定 .蛋白 A(Protein A)与免疫球蛋白 (HIg G)的 Fc区之间具有很强的特异性亲和作用 ,因而固载蛋白 A的亲和介质可用于免疫球蛋白及单克隆抗体的分离、纯化和分析测定[1～ 3 ] .根据固定相存在形式的不同 ,毛细管色谱柱主要有开管、填充和连续床柱 3种方式 .连续床具有相比高、易制备 (一步合成 )、孔径易控制、不需烧塞子和易改性等优点 .连续床与其它常用的亲和介质 (如球型凝胶颗粒、灌流色谱基质 [4、 5] 、膜介质 [6,7] 等 )相比具…     

生物大分子液相色谱分离中色谱柱长与柱径比的优化研究

用厚度为 1cm、而直径不同的色谱饼 (或饼形色谱柱 )对 7种蛋白质进行了色谱谱分离 ,得出了柱长与柱径比对生物大分子分离度影响不大的结论。还对柱内腔几何体积相同、而柱长 柱径比不同的色谱柱和色谱饼对分离度的影响以及它们压力降作了比较 ,结果表明色谱饼可在几乎不降低分离度的前提下显著降低色谱系统的压力。通过对 1 0× 5 0mmI.D .色谱饼体积和质量负载量以及质量回收率的测定 ,表明色谱饼对生物大分子的分离已达到制备规模。     

亲和膜色谱技术研究进展

对一种崭新的生物大分子分离技术－－亲和膜色谱技术做了全面的评述,介绍了亲和膜色谱分离的过程,评价了亲和膜基质材料活化、改性方法、给出了配基间隔臂的选择原则,概括了亲和膜色谱理论研究的进展,并对亲和膜色谱技术进行了展望。     

核壳型二氧化硅色谱填料的研究进展

复杂样品的高效快速分离分析是分离科学家所面临的挑战。近年来,核壳型二氧化硅色谱填料以其高效、快速和低背压的特点被广泛用于小分子、大分子和复杂样品的快速分离分析。该文系统综述了二氧化硅核壳色谱固定相快速分离的机理,制备方法及其在小分子、多肽和生物大分子快速分离分析方面的应用,同时对核壳型色谱固定相的发展进行了展望。     

高效液相色谱法分离蛋白的大孔硅质固定相的制备及分离机理

介绍了不同孔径的大孔硅胶基质的制备，二醇基和氨基固定相的合成，及其蛋白的分离特性。探讨流动相中的盐浓度和ＰＨ对蛋白保留时间的影响，以及在此两种固定相上蛋白质分离机理的比较。由于大孔填料具有小的比表面积、性容量也低，从而有利于作蛋白质等生物大分子的高效快速分离分析。     

色谱最新研究亮点——新型功能化色谱分离介质的研究进展

整体柱由于具有制备方法简单、通透性好、柱容量大、易实现快速分离的优点,近年来在生物大分子的高效、快速、高通量分离分析方面得到了较快的发展。但是由于有机聚合物整体柱的表面积小（只有几十平米/g）,内部结构不均一,因此还存在分离小分子物质柱效低的缺点。最近,人们在努力寻求一种较为完美的低压高效的功能化色谱分离介质的制备方法,以期能够在大分子和小分子等多种物质的分离分析中得到普遍应用。     

高分子色谱固定相GDX203的改性及其在色谱分离中的应用

通过对高分子色谱固定相GDX 2 0 3的硝化改性处理 ,得到新型色谱固定相改性GDX 2 0 3.该固定相用于甲醇羰基合成醋酸的反应产物分析 ,可在恒温条件下快速分离反应介质中的全部组分 ,尤其是乙酸甲酯和碘甲烷可得到完全分离