桔梗皂苷对慢性支气管炎小鼠气道重塑的干预作用研究

探讨桔梗皂苷(kikyosaponin,简称KS)对慢支小鼠气道重塑的干预作用机制.将50只健康小鼠分成正常对照组,模型组和桔梗皂苷低、中、高剂量组,除正常组外,其余4组动物均采用烟熏加浓氨水吸入法建立慢支模型,然后分别用药物进行治疗.实验结束后,取各组小鼠肺组织进行石蜡制片,苏木精-伊红(HE)染色分析气管管壁厚度变化,Masson染色分析肺组织胶原沉积,采用Image-Pro Plus 6.0图像分析软件测量总管壁厚度(WAt/Pbm)、内壁厚度(WAi/Pbm)、平滑肌厚度(WAm/Pbm)以代表气道重塑指标;生化法检测肺组织中羟脯氨酸(Hyp)含量;免疫组织化学染色法观察MMP-9在肺组织中的表达;蛋白印迹术分析MMP-9和TIMP-1在肺组织中的表达水平.HE染色显示,模型组肺组织中支气管明显狭窄,管腔及肺泡中含有大量炎性分泌物,且气道重塑的三项指标均异常增高;免疫组化和三色法显示,模型组小鼠支气管和肺泡细胞中有大量的MMP-9表达,且有胶原蛋白增加明显,生化检测发现模型组小鼠肺组织中Hyp含量亦异常升高,且MMP-9和TIMP-1表达水平升高显著,与正常对照组相比,差异十分显著(P<0.01).在连续用药30 d后,与模型组相比,桔梗皂苷各剂量组能明显抑制慢支小鼠支气管胶原纤维增生,改善气道重塑各项指标;减少MMP-9和TIMP-1表达水平,使气管重塑得到显著的减轻(P<0.05,P<0.01,P<0.01).结果显示,桔梗皂苷可明显减轻慢支小鼠气道重塑的病理改变,其干预机制可能是通过清除慢支小鼠肺组织中的炎性因子和自由基的含量,同时又能抑制MMP-9和TIMP-1的表达,从而达到减少胶原蛋白的沉积以减轻气管狭窄而达到逆转气道重塑之目的.     

超声波辅助提取桔梗皂苷方法的研究

采用桔梗为原料,以桔梗皂苷的提取率为指标,对超声波辅助提取桔梗皂苷的方法进行研究.以乙醇为主要提取溶剂,应用正交设计优选桔梗皂苷的提取方法,选择乙醇体积分数、料液比、超声温度和超声时间为影响因素,确定了超声波辅助提取桔梗皂苷的最佳条件为:乙醇体积分数90%、料液比1∶11(g/mL)、超声温度45℃、超声时间30 min.桔梗皂苷的提取率为4.255%,通过泡沫实验和颜色反应实验确定提取物质为桔梗皂苷.     

近红外光谱检测技术快速测定桔梗总皂苷的研究

利用近红外快检技术建立测定桔梗总皂苷含量的模型,探索近红外光谱仪在中药材有效成分研究方面的可行性.利用紫外-可见分光光度计建立测定不同批次的中江桔梗总皂苷含量的方法,以其含量作为参比,运用近红外技术收集50批中江桔梗样品的光谱图,借助偏最小二乘回归算法建立中江桔梗总皂苷的定量校正模型,并对未知样品中总皂苷含量进行预测.结果显示,桔梗中总皂苷定标标准偏差、相对分析误差、交叉检验标准误差、校正模型的决定系数和交叉验证相对分析误差分别是0.953、8.154、1.999、0.97、3.887.表明本研究建立的定性模型检测速度快、效率高、结果可靠,可用于桔梗总皂苷的质量控制.     

凝胶层析分离桔梗皂苷方法的研究

以桔梗为原料对桔梗总皂苷的分离方法进行了研究.采用超声波-水提法提取总皂苷,并采用凝胶层析法进行分离.通过单因素分析,确定了洗脱剂体积分数、上样量、流速、洗脱剂用量为影响凝胶层析的显著因素.通过凝胶层析分离实验确定了桔梗总皂苷的最佳分离工艺参数为:洗脱剂体积分数为70%,凝胶体积与上样量比为1∶4,流速为1 mL/min,洗脱剂用量与上样量为1∶1.     

桔梗皂苷-纳米硒复合物对CCl4 致小鼠肝损伤的保护作用①

目的:研究桔梗皂苷-纳米硒复合物(PLD-NSe~0)对CCl_4引起的小鼠急性肝损伤的预防保护作用。方法:采用CCl_4法制造小鼠急性肝损伤模型,检测正常组,模型组,联苯双酯阳性组和PLD-NSe~0高、中、低剂量组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、球蛋白(GLB)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)水平以及肝组织匀浆中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力和丙二醛(MDA)含量。计算小鼠的肝重指数,观察肝脏组织病理学变化。结果:PLD-NSe~0的高、中剂量组与模型组相比,小鼠血清中TP、ALB的含量显著升高,肝组织中的GSH-Px活力(p0.01)显著增强,而小鼠血清中ALT、AST、ALP水平、GLB含量和肝组织中MDA含量显著降低,病理切片显示PLD-NSe~0组均不同程度改善肝组织病理的变化。结论:PLD-NSe~0对CCl_4所致急性肝损伤有保护作用。     

红车轴提取物对基质金属蛋白酶的抑制活性

研究质量分数为40%的红车轴黄酮提取物及其含有的4种主要异黄酮对基质金属蛋白酶（MMP-16）的抑制作用. 结果表明, 质量分数为40%的红车轴黄酮提取物以剂量依赖的方式有效抑制MMP-16的活性, 刺芒柄素抑制MMP-16的活性效果较弱而且不是剂量依赖方式, 而鹰嘴豆芽素、 大豆甙元和染料木黄酮不能抑制MMP-16的活性. 红车轴黄酮提取物通过色谱纯化, 得到33种纯化馏分, 其中13号馏分与25号馏分能抑制MM P-16的活性, 并且13号馏分的抑制作用是剂量依赖的.     

肥大细胞调控IDO诱导的肺癌细胞转移

建立了小鼠肥大细胞体外诱导体系。探究肥大细胞对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响。Transwell迁移和侵袭实验检测了与肥大细胞共培养后的细胞2LL侵袭转移能力变化。实验结果表明:肥大细胞能够抑制IDO诱导的细胞2LL的侵袭转移能力。生物信息学分析发现基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)能够抑制促肿瘤转移的基质金属蛋白酶-1(MMP1)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)以及基质金属蛋白酶-9(MMP9)的表达。Western blot结果表明肥大细胞通过抑制STAT3磷酸化而减少IDO的表达;并通过TIMP1信号通路抑制MMP2、MMP9和VEGF的表达。这些结果表明肥大细胞通过抑制STAT3信号通路磷酸化调控IDO表达和抑制下游TIMP1、MMP2、MMP9信号通路抑制细胞2LL转移能力。     

川芎嗪调控哮喘大鼠气道中VEGF和iNOS表达对气道重塑的影响

目的深讨川芎嗪调控哮喘大鼠气道中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达对气道重塑的影响。方法将30只Wistar雄性大鼠中按随机数字表分为3组，每组10只。对照组分别于第0、7和14天腹腔注射生理盐水2ml，分别于第加～29，47，61，73～75天用37℃生理盐水雾化吸入，1次／d，10min／次；哮喘组用卵蛋白粉（OVA）10mg、氢氧化铝20mg制成2ml悬液代替生理盐水，余同对照组；干预组于雾化吸入前1h腹腔注射川芎嗪2mg，余同哮喘组。末次激发24h后行肺泡灌洗，回收肺泡灌洗液（BALF），测VEGF和iNOS的浓度。取右下肺组织切片作常规HE染色，测定气道内周径（Pi），外周径（Pe），并计算管壁面积（WA），气道平滑肌面积（SMC—A）。结果哮喘组气道中VEGF与iNOS浓度、WA／Pi和SMC—A／Pi比值明显高于对照组（P〈0．05）；干预组气道中VEGF与iNOS浓度、WA／Pi和SMC—A／Pi比值明显高于对照组（P〈0．05），但明显低于哮喘组（P〈0．05）。VEGF和iNOS浓度与WA／Pi和SMC—A／Pi比值作相关分析均呈正相关性。结论川芎嗪可能通过下调哮喘大鼠气道中VEGF和iNOS表达，抑制气道重塑。     

Stat3调控MMP9和TIMP1的转录与表达

通过脂质体瞬时转染Stat3重组质粒的方法在NIH3T3细胞中过表达Stat3;采用RT-PCR,Western blot以及荧光素酶活性分析的方法评估Stat3对MMP9及对其内源性抑制因子TIMP1的影响.结果表明:Stat3可增强MMP9及TIMP1基因启动子的活性,促进两者的转录与表达;并且Stat3对TIMP1的促进作用明显强于对MMP9的促进作用,从而使ECM的降解能力减弱,细胞外基质成分积累,导致纤维化的发生.     

肺结核及病变转归患者血清MMP-2及TIMP-2检测的临床意义

[目的]探讨肺结核（PTB）及病变转归患者血清中基质金属蛋白酶2（MMP-2）及基质蛋白酶组织抑制剂2（TIMP-2）含量关系,以期为监测PTB患者病情变化及判断结核病治疗效果提供理论依据.[方法]酶联免疫（ELISA）法检测60 例肺结核患者及 20 例无肺部疾病患者（对照组）的血清MMP-2 及 TIMP-2含量,同时进行肺功能检查.[结果]浸润型肺结核（MMP-2:157.52±21.04;TIMP-2:185.15±14.08）及慢性纤维空洞型肺结核（MMP-2:169.48±18.13;TIMP-2:208.60±17.06）显著高于肺功能正常及其他类型的结核病患者（差异显著,均有统计学意义（p<0.01））.当PTB疾病逐渐转归并且痊愈,MMP-2 与TIMP-2的含量比例逐渐接近肺功能正常组.[结论]MMP-2、TIMP-2的含量关系在监测及治疗该两类结核病上具有一定的临床价值.     

金水六君煎对慢性支气管炎模型小鼠呼吸道纤毛病理损伤的影响

目的：观察金水六君煎对慢性支气管炎小鼠呼吸道纤毛的保护作用。方法：将小鼠随机分为对照组、模型组、金水六君煎治疗组,采用改良烟熏法复制慢性支气管炎小鼠模型,以金水六君煎口服液进行干预,连续用药4周后取气管和肺叶组织分别在扫描电镜和透射电镜下观察。结果：模型组小鼠呼吸道纤毛出现明显脱落、减少、倒伏、粘连、变短、肿胀、超微结构异常增多等病理现象,纤毛细胞出现变性、坏死、脱落等病理改变;而金水六君煎治疗组小鼠呼吸道纤毛上述病理改变均较模型组明显减轻。结论：金水六君煎能明显改善慢性支气管炎小鼠呼吸道纤毛的病理损伤程度,促进呼吸道受损纤毛的结构修复。     

DanHong Injection inhibits the development of primary abdominal aortic aneurysms in apoE knockout mice

Clinical observations indicate that DanHong Injection （DHI） can increase blood flow and reduce various syndromes in patients with cardiovascular disease. How- ever, it still needs to define the function of DHI and the involved mechanisms in details, such as the protective effect on the development of primary abdominal aortic aneurysms （AAAs）. In this study, we determined whether DHI is able to inhibit AAA in apoE knockout （apoE-/-） mice. Thirty apoE-/- male mice on high-fat diet （0.5 % cholesterol, 21% fat） were randomly divided into two groups and received i.p. injection of saline （100 μL/day） and DHI （100 μL/day）, respectively, for 16 weeks. At the end of experiment, we determined the development of atherosclerosis in en face aorta and aneurysms,pathological morphology of arterial wall, and serum lipid levels. We also determined the expression of monocyte chemoattractant protein-1 （MCP-1）, MMP-2, and MMP-9 mRNA in aortic wall using real-time RT-PCR. Our results indicated that high-fat diet induced the development of AAAs in apoE-/- mice, but the induction was totally blocked by DHI （P 〈 0.01）. The result of staining of abdominal aortic cross sections showed that DHI main- tained the collagen content in arterial wall, thereby pre- venting the animals from the development of AAA. Although DHI had little effect on serum total- and LDL- cholesterol levels, it reduced the expression of MCP-1, MMP-2, and MMP-9 mRNA in aortic wall （P 〈 0.01）. Taken together, our study suggests that DHI can inhibit the high-fat diet-induced AAA formation. The inhibitory effects may be related to the maintenance of the collagen content and inhibition of expression of AAA-related genes. Our study may suggest a new application of DHI in clinics.     

GM(1,1)模型研究的一些进展

介绍作者对灰色GM（1，1）模型研究取得的成果，具体内容为：证明了GM（1，1）模型为有偏差的指数模型，导出了模型的相关公式，提出了无偏灰色预测模型（无偏GM（1，1）模型），并用实例说明了该模型的优越性。     

灰色GM(1,1)模型误差特性的实验研究

从理论上分析了影响灰色GM(1,1)模型精度的三个主要因素 ,通过实验的方法研究了各个因素对模型误差特性的影响 ,并作出了用指数序列建模时的误差特性曲线 实验的结果有助于人们对GM(1,1)模型的认识和应用     

在反复自然流产模型CBA/J×DBA/2小鼠血清中未检测出抗精子抗体

目的 :评价抗精子抗体 (anti -spermantibody ,AsAb)与反复自然流产 (recurrentspontaneousabortion ,RSA)小鼠模型CBA/J×DBA/ 2生殖力特点的关系 .方法 :对CBA/J×DBA/ 2小鼠的生殖力特点做为期 6 0d的观察 ,与生殖力正常的BALB/c×DBA/ 2小鼠进行比较 ,并检测上述雌鼠血清AsAb水平 .结果 :CBA/J×DBA/ 2小鼠平均每窝产仔数和雌雄同笼至第 1窝鼠仔出生的平均时间均与BALB/c×DBA/ 2小鼠有显著差异 ,分别为 (3 0± 1 1)只与 (6 1± 1 6 )只 ,P <0 0 0 1,和 (33 5± 7 1)d与 (2 5 8± 3 2 )d ,P <0 0 1.在这些CBA/J×DBA/ 2和BALB/c×DBA/ 2组合的雌鼠血清中均未检测出AsAb .结论 :CBA/J×DBA/ 2小鼠生殖力的下降可能并非由于雌鼠血清中存在AsAb所致     

扁担杆正丁醇提取物抗炎作用及机制研究

采用化学方法制备扁担杆正丁醇提取物．采用二甲苯致小鼠耳郭肿胀法及角叉菜胶致小鼠足肿胀法观察抗炎作用,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清IL-1β和TNF-α含量,分析抗炎机制．与对照组比较,高浓度扁担杆正丁醇提取物对二甲苯致小鼠耳郭肿胀及角叉菜胶致小鼠足肿胀均具有显著的抑制作用（P＜0．05）,并可不同程度降低角叉菜胶致炎小鼠血清IL-1β和TNF-α的含量（P＜0．05）．扁担杆正丁醇提取物具有一定的抗炎作用,其抗炎作用机制可能与降低TNF-α和IL-1β的表达有关．     

GM(1,1)模型分析股价趋势

用GM (1,1)等维新陈代谢模型来分析股价短期趋势 ,并根据GM(1,1)等维新陈代谢模型显示的趋势变化 ,指出了买入股票的最佳时机     

一种复合微生态制剂的研制及其应用效果观察

在优选菌株、优化培养基和发酵参数的基础上,开发出一种新型复合微生态制剂及其发酵生产工艺.养殖实验表明：该制剂对改善断奶仔猪、蛋鸡等畜禽肠道的微生物区系、降低腹泻率有显著效果.     

Al90Mn9Ce1／Al2O3复合材料综合性能研究

研究了通过放电等离子烧结（Spark Plasma Sintering,SPS）方法制备的Al90Mn9Ce1／Al2O3金属／陶瓷块体复合材料的抗氧化腐蚀性能和力学性能。结果表明,复合材料具有良好的抗氧化抗腐蚀性能以及较高的强度,强度氧化速率仅为0．016mg／h、腐蚀速率为3．2mg／h;抗压强度514MPa、显微硬度达到231．75HV。     

Wistar系大鼠自发性脑积水动物模型建立的初探

继１９８９年１０月在我所实验动物中心普通级Ｗｉｓｔａｒ鼠中发现一雄性脑积水幼鼠之后，１９９０年９月又在该鼠群中发现一窝三只脑积水幼鼠，遂将此窝内其他表型正常鼠育成基础种鼠群，并以此作为Ｆｏ代动物，于同年的１１月１９日开始建立此模型的近交育种研究。经过一年多的试繁与选育，仔代脑积水发生率从始发代的１．９％上升到１７．Ｏ％，累积获得脑积水动物４４只，其中雄性１９只，雌性２５只，雄雌之比为０．８：１。由于该性状系受隐性、致死基因控制，故建立了以“Ｐ×Ｏ”为辅助系统，“ｂ×ｓ”为主系统的育种保种方法。此脑积水动物的生物学特征为：最早发现为１日龄，最早死亡日龄为＜２０日龄。早期表现为脑部隆起肿大成泡状，生长发育较同窝正常鼠稍缓慢，之后随着日龄的增加，病情加重，脑部隆起更甚，体消瘦，被毛杂乱竖立，弓背，目光呆滞无神，肛门及腹面常不清洁，严重者步伐不稳，四肢麻痹，侧卧于宠底，常出现阵发性颤抖，直至衰竭死亡。此脑积水为生理性自发，与人类脑积水相似，且孕期短，窝（代）发生率较高，脑标本体积较大，可望成为又一理想的研究人类脑积水的动物模型。