碱性药物与人血清白蛋白结合参数的毛细管区带电泳/前沿分析

将毛细管区带电泳／前沿分析技术用于测定碱性药物ｖｅｒａｐａｍｉｌ（ＶＥＲ）和ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ（ＰＲＯ）与人血清白蛋白（ＨＳＡ）平衡体系中结合参数的研究。通过压力进样将药物白蛋白混合液引入石英毛细管电泳柱（３２ｃｍ×５０μｍｉ．ｄ．,聚丙烯酰胺涂渍柱）,在ｐＨ值为７．４、离子强度为０．１７的磷酸缓冲液及运行电压为１０ｋＶ的条件下,未结合的碱性药物的浓度可以通过电泳平台峰的高度定量,并且具有良好的线性关系（相关系数ｒ＝０．９９９）。     

毛细管电泳法考察全氟辛酸与人血清白蛋白的相互作用

利用毛细管电泳（CE）技术建立了全氟辛酸（PFOA,C₈HF₁₅O₂）与人血清白蛋白（HSA）相互作用的分析方法。在生理条件下构建配体（PFOA）-受体（HSA）相互作用模型,通过淌度移动法、区段-区段动力学（plug-plug kinetic,PPK）法、简化的Hummel-Dreyer（HD）法研究其与HSA的相互作用。简化的HD法运用非线性方程、Scatchard方程和Klotz方程获得PFOA-HSA体系的相互作用参数,进而分析了模型适用度。结果表明,淌度移动法、PPK法、简化的HD法均适用于PFOA-HSA体系相互作用的分析,其中简化的HD法最优。模型适用度分析得出非线性回归方程为最适理论模型。相互作用参数测试表明PFOA-HSA相互作用体系之间发生的结合反应只有单一类型的结合位点且结合稳定。相关工作阐明了人血清白蛋白与PFOA的相互作用机制,可为PFOA毒理机制的深入研究提供有益参考。     

毛细管区带电泳—前沿分析法测定苯甲酸钠与牛血清白蛋白的相互作用

将毛细管区带电泳-前沿分析技术(CZE-FA)用于测定苯甲酸钠与牛血清白蛋白(BSA)平衡体系中结合参数的研究.通过压力进样将苯甲酸钠和白蛋白混合液引入石英毛细管电泳柱,在20 mmol/L硼砂缓冲液(pH=9.2)及20kV运行电压条件下,未结合苯甲酸钠的浓度可通过电泳平台峰的高度定量,两者具有良好的线性关系(相关系...     

亲和毛细管电泳法研究锌离子与人血清白蛋白的结合反应机制

建立了研究金属离子与人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)相互作用的亲和毛细管电泳(Affinity capillary electrophoresis,ACE)方法。生理条件下,构建配体(Zn2+)-受体(HSA)相互作用模型,以N,N-二甲基甲酰胺(N,N-Dimethylformamide,DMF)为内标物,基于Scatchard方程,依据有效淌度的变化,通过非线性模拟方程计算Zn2+-HSA结合反应的表观结合常数KB,定量表征了Zn2+-HSA相互作用的强度,并解析电泳谱图获得了Zn2+-HSA结合反应为一快平衡体系的结论。结果表明,建立的ACE方法简捷、有效,Zn2+-HSA相互作用的强度与Zn2+浓度之间存在明显的量效关系。     

毛细管电泳对盐酸普罗帕酮与人血清白蛋白结合作用的研究

采用毛细管区带电泳（CZE）技术,研究了盐酸普罗帕酮（propafenone hydrochloride）与人血清白蛋白（HSA）的结合作用机制。在以硼砂-碳酸氢钠（pH10,50mmol／L）为运行缓冲溶液,运行电压17kV,进样时间12s,紫外检测器（214 nm）的条件下检测,结合常数和结合位点数在298K和310K分别为心。=2．24×10^7 L·mol^-1,n298k=1．2及K310k=3．12×10^7 L·mol^-1,n310K=1．3。同时运用荧光光谱研究了盐酸普罗帕酮与人血清白蛋白的结合作用机制;并从热力学参数推得了药物分子与人血清白蛋白分子间的作用力类型等分子间的相互作用信息。     

毛细管区带电泳法测定4种抗HIV-1活性的化合物与牛血清白蛋白的结合常数

采用毛细管区带电泳紫外检测方法,在pH 8.0、浓度50 mmol/L的磷酸盐缓冲溶液及运行电压15 kV的条件下,测定了4种新合成的具有抗HIV-1活性的化合物(IG3,iso-C3,C3,MC3)与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的结合常数。在缓冲溶液中加入不同浓度的BSA,通过测定化合物迁移时间的变化,计算得到了上述4种化合物与BSA的结合常数分别为1.07×104, 1.34×104, 8.51×103和9.45×103 L/mol。该方法简单、快捷,可用于研究结合比为1∶1的小分子与生物大分子的     

压力驱动亲和毛细管电泳法研究3种龙血素与人血清白蛋白的结合作用

采用压力驱动的亲和毛细管电泳技术(P-ACE)分别研究了生理酸度条件下(p H 7.4)3种黄酮类化合物龙血素A、龙血素B和剑叶龙血素C与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用。利用蛋白淌度变化和药物浓度的关系,计算得出上述三者与HSA的结合常数Ka分别为0.414×105,0.252×105,1.816×105L/mol。结果表明,P-ACE可作为研究药物与蛋白相互作用的简便可行方法。     

毛细管电泳柱端盘状电极安培检测区带展宽的定量分析

从理论上分析了影响毛细管电泳法端盘状电极安培区检测区带展宽的诸因素，给出了区带展宽的模拟公式，通过实验考察了进样量，分离电压，检测器体体积对区带展宽的影响并验证了模拟公式。     

高效毛细管电泳前沿分析法研究酸性药物那格列奈与人血浆白蛋白的结合

用高效毛细管电泳前沿分析法研究了酸性药物那格列奈与人血浆白蛋白的结合常数、结合位点和结合率。使用未涂层的毛细管柱 (4 0cm× 5 0 μmi.d .;有效柱长 32cm) ,磷酸盐缓冲溶液 (pH 7.4 ,离子强度0 .17)为背景溶液 ,在紫外检测波长 2 14nm、运行电压 18kV和重力进样 10 0s的条件下 ,利用那格列奈谱峰的平台高度和游离药物浓度的良好线性关系 (r>0 .999,n =6 ) ,测定了那格列奈的游离药物浓度。固定药物浓度 (2 0 0 μmol L ,2 5 0 μmol L) ,考察不同的蛋白质浓度对结合的影响 ;固定蛋白质浓度 (10 0 μmol L) ,考察不同的药物浓度对结合的影响。实验数据采用非线性拟和程序进行处理 ,得到了那格列奈的蛋白质结合参数。高效毛细管电泳前沿分析法测定的数据重现性良好 (RSD <2 .5 % ,n =3) ,在药代动力学和药效学研究方面具有简便、准确的优点。     

基于毛细管电泳的苦参碱转运过程中的血清白蛋白行为成像

利用毛细管电泳（CE）技术在体外条件下建立了苦参碱（MT）与血清白蛋白（SA）相互作用的分析方法。生理条件下通过淌度移动法和前沿分析法（FA）研究苦参碱与血清白蛋白的结合状况，构建配体（MT）-受体（SA）相互作用模型。其中，淌度移动法采用非线性拟合方法获得苦参碱与人血清白蛋白（HSA）结合参数；FA运用非线性回归方程、Scatchard方程、Klotz方程3种方程获得苦参碱与人血清白蛋白结合参数，分析其相互作用状况进而分析模型适用度。利用淌度移动法可知，人血清白蛋白与苦参碱表观结合常数K_B为8.072×10³ mol/L；利用FA法可知，采用非线性回归方程、Scatchard方程、Klotz方程3种方程获得苦参碱与人血清白蛋白表观结合常数K_B分别为1.434×10³、1.781×10³和2.133×10³ mol/L，且二者结合位点数在1.0左右，说明苦参碱与人血清白蛋白作用只有单一类型的结合位点。通过计算分析得到3个方程的相关系数（r），关系为r_Klotz > r_非线性 > r_Scatchard。结果表明：淌度移动法和FA法均适用于分析MT-HSA体系的结合状况；由于FA法可以计算出表观结合常数的同时又能计算出结合位点数，因而更适合MT-HSA体系的分析研究；分析比较得出3种方程之中Klotz方程为最适理论模型。结合参数表明，MT-HSA相互作用体系之间发生的结合反应为单一类型的结合位点且结合稳定。相关工作阐明了典型生物碱与血清白蛋白的相互作用机制，可为生物碱的血液输运机制的深入研究提供有益参考。     

应用毛细管区带电泳测定人血清蛋白

摘要：研究了一种用于临床检测血清蛋白的毛细管区带电泳方法。弹性石英毛细管50μmi.d.×47cm（40cm有效长度）,检测波长200nm,血清用运行缓冲液（含12.5mmol/L四硼酸钠、1mmol/L乳酸钙、0.7mmol/L硫酸镁,pH9.70）稀释40倍,气压进样17.23kPa·s,分析电压23kV。正常血清蛋白分为6种,孕妇的分7种（多一个未知的α0峰）。将正常人、孕妇、多发性骨髓瘤和强直性脊柱炎患者的血清蛋白的毛细管电泳与传统的醋酸纤维膜电泳相比较,前者具有高分辨率、在线数据处理和自动化的特     

亲和毛细管电泳法测定牛血清白蛋白和加替沙星的结合常数

利用亲和毛细管电泳法对牛血清白蛋白(BSA)与加替沙星(GT)间的结合反应及其相互作用做了初步探索,并应用淌度比(M)作为指标测定了两者的结合常数。以20 mmol/L pH 7.4的磷酸盐缓冲液作为运行缓冲液,分别以GT和BSA作为添加剂,另一组分为进样样品,内标为二甲基甲酰胺,于214 nm波长下检测。两种测定条件下得到的结合常数分别为4.4×104 L/mol和4.2×104 L/mol,与传统的荧光淬灭法测得的结果基本一致。该方法具有简单、高效的优点。     

高效毛细管区带电泳法分离人血清蛋白质的研究

 研究了高效毛细管区带电泳分离人血清蛋白质的电泳行为及实验条件 ,建立了分离血清蛋白质的高效毛细管区带电泳法。血清样品经硼酸缓冲液 (5 0 mmol/L,p H8.80 )稀释后 ,以 0 .1 mol/L硼酸缓冲液 (p H9.3 5 ,含4g/L PEG80 0 0 )为电泳介质 ,在 5 0 μm i.d.× 3 7cm弹性石英毛细管柱 (有效柱长为 3 2 cm)中进行电泳分离 ,以2 0 0 nm紫外波长检测。方法简便、快速、重复性好 ,1 2 min内便可完成对血清中蛋白质的电泳分离。     

纳米金与牛血清白蛋白作用的毛细管电泳研究

开展了针对微量纳米金与牛血清白蛋白相互作用的毛细管电泳研究, 测得二者的结合常数为28.6 L/μmol, 每个纳米金颗粒吸附约24个牛血清白蛋白分子. 结果表明, 牛血清白蛋白可改善并稳定纳米金的峰形, 二者作用时温育介质的pH以及电泳所用的缓冲溶液浓度对毛细管电泳(CE)效率有重要影响. 此法可推广到其它纳米颗粒的吸附研究中.     

亲和毛细管电泳法和荧光法研究氟喹诺酮类药物与牛血清白蛋白的相互作用

分别采用亲和毛细管电泳法和荧光法对6种氟喹诺酮类药物(司帕沙星、洛美沙星、左氧氟沙星、诺氟沙星、培氟沙星和氟罗沙星)与牛血清白蛋白的相互作用进行考察. 结合比均为1∶1, 结合常数在104 L/mol量级, 热力学参数表明体系间的相互作用力以范德华作用力和氢键力为主. 另外, 亲和毛细管电泳实验结果表明, 缓冲溶液pH值和离子强度增大会造成结合常数在一定程度上的减小, 使相互作用减弱. 同时, 荧光猝灭实验结合紫外光谱扫描说明体系间为静态猝灭. 所得到的数据对进一步研究氟喹诺酮类药物的作用机理、提高药效和开发新一代氟喹诺酮类药物具有一定的参考意义.     

A Novel Method for Quantification of Circulating DNA in Serum by Capillary Zone Electrophoresis

In this paper, we first presented a novel method for quantification of circulating DNA in human serum based on capillary zone electrophoresis with laser-induced fluorescence detection (CZE-LIF). The serum was digested by proteinase to release free DNA, and then CZE-LIF system was used for the quantification of total circulating DNA. This method was successfully used to quantify the circulating DNA levels in sera from healthy individuals and certain cancer patients.We found the significantly elevated circulating DNA levels in certain prostate cancer patients. Our results demonstrated that CZE-LIF system has good linearity, excellent sensitivity (0.5 ng/mL DNA),satisfactory reproducibility (RSDs in one day and between days were both less than 5%) and reliability, and is well suitable to the quantification of the circulating DNA in human serum or plasma.     

毛细管区带电泳法快速测定食品中的金属硫蛋白

 采用毛细管区带电泳法 (CZE) ,以 5 0cm× 75 μmi d 毛细管柱作为分析柱 ,0 .0 2mol/L磷酸二氢钠 0 .0 2mol/L磷酸氢二钠混合体系 (pH 7.0 )作为背景电解质 ,以紫外检测器在波长 2 0 0nm的条件下检测 ,对具有生物活性的金属硫蛋白 (MT)的两种异构体 (MT1,MT2 )进行了分离。样品经过预处理后 ,采用外标法可对食品中的金属硫蛋白进行定量测定。该方法的最低检测质量浓度为 1mg/L ,相对标准偏差低于 10 % ,加标回收率为 82 .0 %～93.4%。