双酚A分子印迹材料的制备及其识别特性研究

以双酚A为模板分子,α-甲基丙烯酸为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,偶氮二异丁腈为引发剂制备了双酚A印迹聚合物。采用动态和静态两种方法研究了该印迹材料对双酚A的结合性能与分子识别特性。印迹材料对模板分子双酚A具有良好的特异性识别作用,经过Scatchard模型分析,双酚A印迹聚合物上有两类不同性质的结合位点,两种结合位点的解离常数分别为1.36和44.78 m L/g,对双酚A的最大表观吸附量分别为24.56μmol/g和312.6μmol/g。将该聚合物应用于固相萃取中,以食品包装材料为样品的加标回收实验表明,此印迹材料可以对痕量双酚A进行富集分离测定,且可重复使用。     

高效液相色谱荧光检测法对一次性纸杯中双酚A的迁移规律研究

建立了一次性纸杯中双酚A的高效液相色谱检测方法并根据国家标准和欧盟有关模拟物规定的指令,研究了一次性纸杯中双酚A在不同模拟物中的迁移规律。考察了纸杯中双酚A对内向食物迁移的规律及其对外向人体迁移的规律,并对浸泡时间、温度、不同模拟物条件下的双酚A的迁移进行了研究。使用高效液相色谱荧光检测双酚A,检出限为10μg/kg,双酚A的线性范围为0.05~50 mg/kg;加标回收率为88%~95%;相对标准偏差(RSD)为2.7%~3.8%。     

中国裕固族、东乡族311例7～12岁儿童Vitamin A水平对比分析

为了解裕固族和东乡族7~12岁儿童vitamin A水平差异,按照整群分层抽样方法分别抽取裕固族民族聚居区(甘肃省肃南裕固族自治县)和东乡族民族聚居区(甘肃省东乡族自治县)7~12岁儿童184例和127例作为研究对象,采用微量荧光测定法检测血清中vitamin A含量。结果表明,裕固族儿童血清vitamin A平均水平为1.44μmol/L,无vitamin A缺乏(VAD)患者,中度亚临床VAD(SVAD)患病率为10.87%(20/184),可疑SVAD患病率为16.85%(31/184);东乡族儿童血清vitamin A平均水平为1.29μmol/L,VAD患病率为3.94%(5/127),SVAD患病率14.96%(19/127),可疑SVAD患病率为18.11%(23/127);两民族间儿童血清vitamin A水平有差异;不同年龄组儿童血清vitamin A状况构成比差异有统计学意义,不同民族的男性儿童vitamin A水平间有差异,男女儿童SVAD和可疑SVAD上无明显差异。结论是两民族学龄儿童较多的还是存在SVAD及可疑SVAD现象,患SVAD及可疑SVAD的儿童应该是今后vitamin A缺乏防治的主要对象。     

慈菇蛋白酶抑制剂的抑制特性及其活性中心的探讨

本文采用亲和层析分离纯化了结晶慈菇蛋白酶抑制剂A和B,抑制剂A和B均为双头多功能蛋白酶抑制剂,抑制剂A能同时等当量抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶,对激肽释放酶的抑制作用较弱,抑制剂B能当量抑制2克分子的胰蛋白酶,对激肽释放酶的抑制活力高于抑制剂A,但对胰凝乳蛋白酶的抑制作用远比抑制剂A弱。化学修饰以及胰蛋白酶与胰凝乳蛋白酶对抑制剂A的竞争性结合表明:抑制剂A和B的两个活性中心均为Lys和Arg残基,其中Lys活性中心专一抑制胰蛋白酶,而由Arg活性中心构成的活性区域则表现为多功能,能抑制多种蛋白酶,从抑制剂A和B的结构特征推测,两活性中心应分别为Lys-Ser(44—45)及Arg-Tyr-Lys(76—78),在抑制剂A中还存在一疏水性残基参与对胰凝乳蛋白酶的抑制,此残基位于由Arg活性中心所构成的活性区域中。     

饲料和鱼肝油丸中维生素A的分光光度测定

本文介绍了饲料和鱼肝油丸中维生素A经脱水处理后的分光光度测定法。维生素A在对甲苯磺酸的作用下脱水,其最大吸收波长从326.5 nm红移到397 nm;当维生素A浓度在0～9μg/mL时,397 nm处的吸光度正比于维生素A的浓度。本法灵敏度高,精密度好,线性范围宽,相关系数为0.999,不受共存的维生素E和D及其它杂质的干扰,操作简单。均匀样品的回收率为96.5～107.3%,变异系数为1.96～3.09%,适于复杂混合物中维生素A的测定。     

用焙烧复原法插层组装有机层柱双氢氧化物

有机酸根插层双氢氧化物(简记为:LDHs OA)是制备具有特殊性质和功能的层柱材料的一类重要前驱体[1 3]。本文以Mg6Al2(OH)16CO2-3·6H2O(简记为MgAl CO2-3)和Zn6Al2(OH)16CO2-3·4H2O(简记为ZnAl CO2-3)为前体,用焙烧复原法将十四酸根(简记为14A)和十八酸根(简记为18A)分别插层组装到了MgAl LDHs和ZnAl LDHs层板间而制得了具有大的层间距、良好的结晶度和规整的层状结构的14A(18A)插层LDHs层柱材料(分别简记为MgAl 14A,mgAl 18A,ZnAl 14A,ZnAl 18A),用XRD谱、IR谱表征了插层交换产物的结构。1　实验部分1.1　仪…     

分子印迹固相萃取检测罐装食品中双酚A

以双酚A为模板分子,3-氨基丙基乙氧基硅烷为功能单体,通过溶胶-凝胶反应合成双酚A分子印迹纳米硅胶微球。以印迹微球为固相萃取吸附剂,优化固相萃取条件,确定二氯甲烷为上样溶剂。固相萃取选择性实验表明,在双酚A及其结构类似物四溴双酚A、双酚C、壬基酚的混合物溶液中,印迹萃取柱对双酚A具有良好的选择性能,回收率达到90.7%。浓度为2.5和5μmol/L的加标罐装食品样品,经印迹萃取柱预处理,液相色谱检测得到回收率72%～84%,相对标准偏差2.9%～4.4%。     

超临界色谱法同时测定化妆品中维生素A类衍生物和维生素D2,D3

采用超临界色谱法建立了同时测定化妆品中维生素A乙酸酯、维生素A丙酸酯、维生素A棕榈酸酯、维生素D2和D3的分析方法。水溶性化妆品和油溶性化妆品经不同比例的水-乙腈-正己烷溶剂体系按不同的添加顺序进行分散、提取后,采用Viridis BEH 2-EP色谱柱(250×4.6 mm,5μm),以CO2为流动相,异丙醇-正己烷(1∶1)为改性剂,进行梯度洗脱分离,光电二极管矩阵检测器(SFC-PDA)检测,结合保留时间和光谱图定性,外标标准曲线法定量。实验结果表明,5种目标物质量浓度在1.0~60 mg/L范围内线性关系良好,相关系数为0.9992~0.9996;维生素A乙酸酯、维生素A丙酸酯、维生素A棕榈酸酯的定量下限(S/N=10)为4.0 mg/kg,维生素D2和D3的定量下限(S/N=10)为8.0 mg/kg。空白基质加标回收率为93.8%~110.1%,相对标准偏差(RSDs)小于13%。方法适用于各类化妆品中维生素A乙酸酯、维生素A丙酸酯、维生素A棕榈酸酯、维生素D2和D3的测定。     

Z_(Aβ3)和Aβ_(16–40)亲和作用的分子机理解析

淀粉样多肽(amyloid-βpeptide,Aβ)聚集是引起阿尔兹海默症(Alzheimer's disease,AD)的主要原因。开发Aβ聚集抑制剂是治疗AD的最有效手段之一。利用噬菌体展示技术筛选出来的Z_(Aβ3)蛋白质能够有效抑制Aβ聚集,但Z_(Aβ3)和Aβ之间的作用区域和关键氨基酸残基尚不清楚。针对此问题,本研究利用分子动力学模拟、MM-PBSA自由能计算和分解方法研究了Z_(Aβ3)-Aβ_(16–40)复合物之间的相互作用机制。结果表明,Z_(Aβ3)的β-股和Aβ_(16–40)之间的亲和作用占主导,而Z_(Aβ3)的α-螺旋贡献很小。利用分子力学-帕松波尔茨曼溶剂可及化表面积方法(MM-PBSA)自由能分解发现Z_(Aβ3)的热点残基为E15、I16、V17、Y18、L19、P20、N21和L22,而Aβ_(16–40)的热点残基为F19、F20、A21、E22、D23、K28、I31、I32、G33、L34、M35、V36、G38和V40。Z_(Aβ3)通过将发夹型Aβ单体包埋在α-螺旋围成的疏水性腔体内来阻碍Aβ聚集。这种结合模式为设计高效的Aβ蛋白质类抑制剂提供了三个基本要素:高亲和性的结合片段(β-股)、附属结构(α-螺旋)和通过二硫键形成的稳定构象。高亲和性结合片段能竞争性地与Aβ单体结合,附属结构α-螺旋可以阻碍其它Aβ单体靠近,而稳定的构象是上述两种要素发挥作用的基础,三者协同作用可以有效地抑制Aβ聚集。     

小孔沸石微结构的CO_2吸附表征

以3种已知结构的小孔沸石3A、4A和5A为研究对象,以N2和CO2为吸附质,通过吸附数据测定,研究了小孔沸石微孔结构的吸附表征方法.结果表明,N2吸附无法检测4A沸石的孔,而CO2吸附可以检测.对于4A和5A沸石,在35s内CO2吸附就可以达到平衡.HK(Horvath-Kawazoe)柱状模型不能表征4A和5A沸石的孔结构,但是HK球形模型可以,基于最大吸附量、D-A(Dubinin-Astakhov)方程和Langmuir-Freundlich模型计算了4A和5A沸石的微孔孔容,其中根据最大吸附容量和D-A方程计算的微孔孔容与文献值最接近.     

三波长分光光度法测定洋葱中蒜氨酸酶的活性

采用三波长分光光度法对洋葱中蒜氨酸酶的活性进行了测定,方法有效地消除了由于背景值及光谱吸收峰不对称给定量分析造成的影响,校正了因干扰组分的吸收光谱具有线性吸收所产生的基线倾斜。分别于波长426nm(λ1)、446nm(λ2)、506nm(λ3)处测定吸光度A1、A2和A3,求ΔA=A2-[(λ2-λ3)A1+(λ1-λ2)A3]/(λ1-λ3)。丙酮酸钠的质量浓度在8.8～44.0mg.L-1之间与ΔA呈线性关系。方法的平均回收率为99.8%,相对标准偏差(n=5)为0.13%。     

加速溶剂萃取/HPLC-MS对毛冬青药材中Ilexgenin A与Ilexsaponin A1含量的测定

建立了加速溶剂萃取/高效液相色谱-质谱法(ASE/HPLC-MS)测定毛冬青药材中活性成分ilexgenin A和ilexsaponin A1含量的方法.采用ASE萃取毛冬青药材中的活性成分ilexgenin A和ilexsaponin A1,萃取溶剂为甲醇,萃取温度100 ℃,压力1.0×107 Pa,静态萃取模式,循环3次,每次萃取10 min.采用HPLC-MS对萃取液中ilexgenin A和ilexsaponin A1进行定量分析,色谱柱选用Dikma Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱,大气压化学电离源(APCI),定量离子m/z 485.ilexgenin A和ilexsaponin A1的线性范围为1.0 ～200.0 mg/L,对毛冬青试样的定量下限分别为19.5和35.0 μg/g,RSD分别为6.7%和7.8%,回收率分别为87% ～96%和93% ～102%.将建立的方法用于分析11个不同产地的毛冬青药材,ilexgenin A含量为0.42 ～6.3 mg/g,ilexsaponin A1含量为0.80 ～8.9 mg/g.     

气液萃取色谱法测定水中溶解氧、氮及总二氧化碳

气体A在液体b中的溶解度(浓度)[A]_b和分压P_A的关系符合Henry定律〔A〕_b=kP_A时,如以色谱载气从溶液中萃取A,则P_A=〔A〕_aRT,式中〔A〕。为载气中A的浓度。因此在温度恒定时,〔A〕_b正比于〔A〕_a。当求得溶解气体在不同温度下的萃取率时,即可进行溶液中溶解气体的测定。根据上述原理测定了水中溶解氧、氮及总二氧化碳。萃取装置及色谱条件: 改装100毫升医用注射器为萃取器,即在针头与针管之间用一段乳胶管联接。     

不同介质条件下纳米二氧化钛溶胶的低温制备及其光催化性能表征

以四氯化钛为原料,分别以硝酸和过氧化氢为介质在低温下制备了两种二氧化钛溶胶A和B,通过X-射线衍射、透射电子显微镜、紫外-可见吸收光谱等测试手段进行了表征。结果表明,两种样品中的TiO2结晶相颗粒均呈锐钛矿型结构,样品A呈球形,粒径为4.8nm,样品B呈纺锤形,粒径为11．2nm;样品B比A结晶度高,而且光吸收波长红移了大约130nm。通过室外光催化降解亚甲基兰和室内光催化降解品红两组实验对比,研究了样品A和B的光催化活性,结果表明样品B比A具有更高的光催化性能。     

多元醇酯冷冻机油的化学组成及其分子结构鉴定

应用傅里叶变换红外光谱法(FTIR)和气相色谱-质谱法(GC-MS)对某品牌进口多元醇酯(POE)冷冻机油(简称A油)的化学组成和结构进行剖析。FTIR光谱图显示A油为季戊四醇脂肪酸酯,且表明其酯化完全。从GC-MS的总离子流色谱图可推断A油有5种主要组成;从A油经甲酯化后的GC-MS谱图可推断A油系季戊四醇与辛酸和壬酸酯化反应的产物。如酯化反应达到完全,则能产生6种产物,由于其中2种产物为同分异构体,因此在图谱中只出现5个信号峰。在实验室中用季戊四醇和壬酸模拟A油的合成,经分析所得产物,证实了对A油组成的推断。     

单波长紫外可见分光光度计测定药物的导数吸收光谱

建立单波长紫外可见分光光度计测定药物导数吸收光谱的方法。以较小的波长差连续测定药物在不同波长λ处的吸光度A,得到一系列A-λ数据,对该系列数据进行数学处理,分别计算Δλ、ΔA、ΔA/Δλ、Δ2A/Δλ2、Δ3A/Δλ3,分别以ΔA/Δλ、Δ2A/Δλ2和Δ3A/Δλ3等各阶导数为纵坐标,以λ为横坐标,绘制药物的一阶、二阶或三阶导数吸收光谱。采用本方法测定并绘制了维生素A、布洛芬两种药物的一阶、二阶及三阶导数吸收光谱,并与其常规吸收光谱进行对比,表征了药物导数吸收光谱的特性。本方法测定药物的导数吸收光谱,扩大了单波长紫外可见分光光度计的应用范围和分析功能,实现了在单波长紫外可见分光光度计上测定药物导数吸收光谱。     

高效液相色谱法测定小鼠血浆和脑中的丹参酮ⅡA及药代动力学研究

建立了小鼠血浆和脑中丹参酮ⅡA(TsⅡA)的高效液相色谱分析法,并用于测定静脉给药后小鼠血浆和脑中TsⅡA浓度的动态变化及药动学参数。小鼠尾静脉注射TsⅡA单体8.0 mg/kg,血浆及脑样品经乙酸乙酯萃取后,用HPLC法检测。所建立的血浆样品分析方法线性范围为0.05~7.12 mg/L,相关系数r=0.9984;脑样品分析方法线性范围为0.022~2.37 mg/L,相关系数r=0.9988;血浆和脑样品中最低定量限分别为0.0498和0.022 mg/L;检出限分别为0.0255和0.0166 mg/L;日内和日间RSD<10.3%。本方法专属、准确、灵敏,可以定量检测小鼠静脉注射后TsⅡA在血和脑中的浓度。TsⅡA静脉给药后,小鼠血浆中TsⅡA浓度-时间变化可用三室模型拟合,峰浓度为1.58 mg/L,AUC(0-t)值为68.18 mg/L.min。给药后5 min TsⅡA在小鼠脑中即可达峰值0.17 mg/L,且480 min时仍能在脑组织中测到,表明TsⅡA能很快透过血脑屏障,且能在脑组织中停留较长时间。     

SPR生物传感器测定Aβ(1-40)与Cu(Ⅱ)结合的探索

采用表面等离子共振(SPR)生物传感器,分别固定Aβ及其单克隆抗体于传感芯片表面,实时监测Aβ与Cu(Ⅱ)混合前后与Aβ单抗体特异的结合过程,及Cu(Ⅱ)与Aβ亲和结合及解离情况.结果显示:Cu(Ⅱ)影响Aβ与Aβ单抗体的特异结合能力,加入Cu(Ⅱ)后Aβ不能与Aβ单抗体起特异免疫结合反应;Aβ与Cu(Ⅱ)的结合过程为快结合快解离的动力学过程.     

虎舌红多糖的分离纯化与性质研究

采用水提醇沉法提取虎舌红多糖,经DEAE-C32柱层析分离,Sephadex G-200进一步纯化,得到AⅠ和AⅡ二种虎舌红多糖,Sephadex G-200凝胶过滤法表明,AⅠ组分为均一组分,其相对分子质量为2.76×104,借助气相色谱技术,研究了粗多糖和AⅠ组分的单糖组成.     

基于多光谱方法和计算模拟的细胞色素CYP1A2与阿奇霉素的结合机制研究

为了解阿奇霉素(AZI)在模拟的人体环境中与CYP1A2的结合情况,探索AZI在人体内的转化机制,本论文使用分子对接、分子动力学模拟、荧光光谱、紫外分光光度法、傅立叶变换红外光谱、圆二色光谱等多种实验方法,阐明AZI与CYP1A2之间的相互作用机制。分子对接结果表明AZI与CYP1A2的结合方式是半包裹并且以疏水作用力相结合。分子动力学模拟结果表明,CYP1A2-AZI复合物的均方根偏差(RMSD)值增大;均方根波动(RMSF)值表明复合物体系柔性较大;回旋半径(Rg)值表明蛋白质特定区域的结构松散。荧光猝灭光谱实验表明,CYP1A2与AZI是以静态猝灭机制结合在一起。热力学参数表明AZI与CYP1A2之间的主导作用力为疏水作用力。时间分辨光谱表明AZI对CYP1A2的机制为静态猝灭。紫外光谱实验表明AZI与CYP1A2反应生成了复合物。红外光谱实验结果表明CYP1A2的二级结构含量发生了改变。圆二色光谱证实AZI对CYP1A2的二级结构产生影响。