高效液相色谱-化学发光方法同时测定血清中的肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺

本文基于肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺对鲁米诺-铁氰化钾化学发光体系的增敏作用，建立了一种高效液相色谱分离-化学发光检测体系同时检测三种物质；研究了试剂浓度、酸碱条件、流动相成分等参数对分析结果的影响。在优化发光条件下，以邻苯二甲酸氢钾-甲醇溶液（92：8）为色谱流动相，用C₁₈柱分离检测肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺样品，肾上腺素线性范围为1×10^-8~5×10^-6g/mL，检测限4.0×10^-9g/mL；去甲肾上腺素线性范围是 5.0×10^-9~1.0×10^-6g/mL，检测限1.0×10^-9g/mL；多巴胺线性范围为5.0×10^-9~1.0×10^-6g/mL，检测限8.0×10^-10g/mL。本方法快速、简便而准确，且已成功用于血清中三种物质的分析。     

柱前衍生-超高效液相色谱-电化学检测法测定牙膏中氨甲环酸

约1g牙膏样品用水50mL超声萃取30min后再离心10min,然后取上清液加入等体积的衍生试剂溶液[含有150mg·L~(-1)邻苯二甲醛(OPA)和1.3g·L~(-1)亚硫酸钠],在室温下反应5min,完成对氨甲环酸的衍生化,衍生化后的样品溶液用超高效液相色谱-电化学检测器(UPLCECD)分析。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱作为固定相,以体积比为2∶8的乙腈-30mmol·L~(-1)乙酸铵缓冲溶液(pH 3.6)为流动相进行等度洗脱。结果显示:氨甲环酸的质量浓度在0.495～19.800mg·L~(-1)内与其对应的色谱峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.18μg·g~(-1)。对牙膏样品进行了加标回收试验,回收率为98.6%,测定值的相对标准偏差(n=6)为2.4%。氨甲环酸衍生产物在12h内保持稳定(衍生产物峰面积降低了不到5%)。方法用于6个牙膏样品的分析,在已知添加的牙膏样品中检出了氨甲环酸,其质量分数为0.23mg·g~(-1)。     

高效液相色谱－电化学检测法测定尿液中的多胺

在已报道的高效液相色谱－电化学检测多胺方法研究的基础上，又进一步探讨了该方法用于尿样本测定的各种条件，并测定了健康志愿者及肿瘤患者尿液中的多胺。结果显示肿瘤患者未水解及水解尿液中的腐胺、尸胺的平均值高于健康志愿者。     

高效液相色谱－电化学检测法测定尿液中的多胺

 在已报道的高效液相色谱－电化学检测多胺方法研究的基础上，又进一步探讨了该方法用于尿样本测定的各种条件，并测定了健康志愿者及肿瘤患者尿液中的多胺。结果显示肿瘤患者未水解及水解尿液中的腐胺、尸胺的平均值高于健康志愿者。     

高效液相色谱-电化学检测法测定猪组织中的克伦特罗

建立了猪组织中克伦特罗的高效液相色谱-电化学检测方法。色谱柱为Discovery C 18柱(5 μm,4.6 mm i.d.X250 mm);流动相为1.7 mmol/L氯化锂-甲酸-甲醇(体积比为65∶1∶34)混合溶液,流速为1.0 mL/min;柱温为40.0 ℃;电化学检测器工作电位为1.25 V。猪组织中克伦特罗含量为0.5-500 ng/g 时,克伦特罗的含量与其峰面积之间存在良好的线性关系(r＞0.99),在组织中按0.5,50,500 ng/g 3个添加水平做克伦特罗的回收率试验,其回收     

柱前衍生高效液相色谱-荧光检测法测定水稻中7种巯基化合物

建立了水稻中半胱氨酸(Cys)、谷胱甘肽(GSH)和植物螯合肽(phytochelatin, PC:PC₂、PC₃、PC₄、PC₅、PC₆)7种巯基化合物的柱前衍生高效液相色谱-荧光检测分析方法.样品经0.1%三氟乙酸(TFA)(含6.3 mmol/L二乙烯三胺五乙酸(DTPA))超声提取,然后以单溴二胺(mBrB)为衍生剂在pH 8.0的4-羟乙基哌嗪丙磺酸(HEPPS)缓冲溶液中衍生化.采用的色谱分离柱为Agilent Eclipse plus C_l8柱,流动相为0.1%TFA(pH 2.5)和100%乙腈(ACN),梯度洗脱,流速为0.8 mL/min.荧光检测的激发波长和发射波长分别为380 nm和470 nm.结果表明,7种巯基化合物在0.7~100.0 mg/L范围内,峰面积与质量浓度之间的线性关系良好(r²≥0.9991);检出限为0.03~0.20 mg/L;加标回收率为89.26%~99.42%,相对标准偏差为2.05%~5.87%.该方法准确、灵敏度高、重现性好,为水稻中巯基化合物的研究提供了检测手段.     

氯氮平、去甲氯氮平及奥氮平的高效液相色谱电化学检测特性的研究

 采用高效液相色谱安培电化学检测法 ,考察了氯氮平、去甲氯氮平和奥氮平在不同 pH值流动相下的色谱分离情况及其色谱峰高与检测电压的关系。结果表明 ,氯氮平、去甲氯氮平和奥氮平的保留时间均随流动相 pH值的升高而延长 ;在pH值为 4 5 6和 5 5 6的流动相中 ,均可实现基线分离。 3种化合物的色谱峰高与检测电压之间呈典型的“S”型曲线 ,pH值升高时该曲线均左移。氯氮平、去甲氯氮平和奥氮平的检测电压必须大于产生最大氧化电流的最低电压才能得到稳定的检测电流。这种典型的“S”型伏安曲线对于化合物的定量和定性检测具有重要意义。     

高效液相色谱/电化学检测法测定大鼠下丘脑的组胺和5-羟色胺

采用高效液相电化学检测的方法测定了大鼠下丘脑内组胺和5_羟色胺。色谱柱为NUCLEOSILRC18(250mm×4mm ,10μm) ,流动相 :磷酸二氢钠溶液 (25mmol/L ,内含乙二胺四乙酸二钠0.5mmol/L ,辛烷磺酸钠3mmol/L,pH4.8) -乙腈=100∶14(体积比 ) ,流速0.8mL/min,检测电位0.6V。大鼠下丘脑匀浆液经低温高速离心 ,上清液直接进样测定5_羟色胺 ,另取上清液衍生后进样测定组胺。组胺在0.075～1.8μg/mL ,5_羟色胺在0.0625～1.25μg/mL浓度范围内 ,线性关系良好。组胺测定的日内和日间相对标准偏差分别小于1.0%和11.4 %,5_羟色胺测定的日内和日间相对标准偏差分别小于3.4 %和6.3 %,两者回收率分别为94.1 %～102.3%和72.8 %～89.1 %。正常雄性SD大鼠下丘脑内组胺和5_羟色胺的平均含量分别为0.280±0.029μg/mL和0.224±0.068μg/mL。本法简便、准确、快捷 ,可用于大鼠下丘脑内组胺和5_羟色胺的测定     

高效液相色谱荧光法快速检测人血浆及肌肉中的谷氨酰胺

谷氨酰胺（ＧＬＮ）是肝脏糖异生的主要物质,同时又是肠粘膜细胞优先利用的氧化原料,在许多代谢性疾病中ＧＬＮ的需要量大大超出机体合成能力,导致血浆、肌细胞内ＧＬＮ浓度下降。ＧＬＮ浓度的下降与蛋白质合成的减少、肠粘膜萎缩及免疫功能损伤有高度的相关性,细胞内ＧＬＮ浓度的下降与病人的死亡率成正比。目前ＧＬＮ的测定多为酶法及全氨基酸谱分析法,这些方法在临床及研究中应用时既复杂费时,且成本较高。对此本文建立了一个快速简便而灵敏的反相高效液相色谱法。     

Simultaneous Determination of Epinephrine, Noradrenaline and Dopamine in Human Serum Samples by High Performance Liquid Chromatography with Chemiluminescence Detection

A simple, rapid and accurate high performance liquid chromatographic （HPLC） technique coupled with chemiluminescence （CL） detection was developed for the simultaneous determination of epinephrine （E）, noradrenaline （NA） and dopamine （DA）. It was based on the analyte enhancement effect on the CL reaction between luminol and potassium ferricyanide. The effects of various parameters, such as potassium ferricyanide concentration, luminol concentration, pH value and component of the mobile phase on chromatographic behaviors of the analytes （E, NA and DA） were investigated. The separation was carded out on C18 column using the mobile phase of 0.01 mol/L potassium hydrogen phthalate solution and methanol （92 ： 8, V/V）. Under the optimum condi- tions, E, NA and DA showed good linear relationships in the range of 1 × 10^-8 -5 × 10^-6, 5.0× 10^-9 -1.0× 10^-6 and 5.0×10^-9-1.0× 10^-6 g]mL respectively. The detection limits for E, NA and DA were 4.0×10^-9, 1.0× 10^-9 and 8.0 × 10^-10 g/mL. The proposed method has been applied successfully to the analysis of E, NA and DA in human serum samples.     

丹酰氯柱前衍生仲胺的高效液相色谱-电化学检测方法的研究

立了一种灵敏检测仲胺的新方法。首次以丹酰氯作为仲胺的电化学检测衍生试剂,对分离检测条件、仲胺的衍生条件及电化学定量检测条件作了详细的研究。以甲醇－２０ｍｍｏｌ／Ｌ的邻苯二甲酸氢钾缓冲液（７０∶３０,ｐＨ３．３）为淋洗液,采用安培检测器在Ｅ＝＋１．１Ｖ电压条件下,在ＰＥＲＫＩＮ－ＥＬＭＥＲ／ＨＳ－３Ｃ１８（８３ｍｍ×４．６ｍｍｉ．ｄ．,３μｍ）柱上实现了二甲胺、二乙胺和哌啶的良好反相分离和灵敏检测,线性范围超过两个数量级。二甲胺、二乙胺和哌啶的检出限分别为０．０２４,０．６０,０．０９０ｐｇ。     

High Performance Liquid Chromatography Determination of Pcmx In Blood Plasma Using Electrochemical Detection

Abstract

A rapid and specific high performance liquid chromatographic (HPLC) procedure has been developed for the determination of p-chloro-mxylenol (PCMX) in blood plasma. the method is based on the extraction of PCMX from plasma with benzene in the presence of a known amount of dichloro-m-xylenol (internal standard). the benzene extract is evaporated to dryness and the residue dissolved in 200 μl of mobil phase. the HPLC system consisted of a reversed-phase column and a 65% methanol:35% ammonium carbonate 0.05% solution as a mobile phase. an electrochemical (EC) detector/glassy carbon electrode set a potential of +0.9V versus Ag/AgCl/3M NaCl is used to monitor the drug. the recovery of PCMX is approximately 98%, the limit of quantitation is 2 ng/ml of plasma for the HPLC-EC procedure. the coefficient of variation is 5.1% over the range of 10-1000 ng/ml of plasma. Data are presented to illustrate the practicality of this method for evaluation of PCMX plasma levels after a single intravenous administration of 500 mg dose of PCMX to five mongrel dogs.     

新型荧光试剂柱前衍生化高效液相色谱荧光检测法测定醇类化合物

采用新型的紫外、荧光衍生试剂咔唑－9－乙基氯甲酸酯，对15种脂肪醇柱前衍生的反应条件，包括反应温度、催化剂的选择、衍生化时间等，进行了考察。结果表明：催化剂选用吡啶，反应温度80℃，时间15min，衍生化具有最大且恒定的检测响应。利用高效液相色谱对衍生产物进行分析，同时对衍生物的分离进行了优化选择，达到了较好的基线分离。检测限为13.3-93.5nmol/L。     

痕量硝基酚的反相高效液相色谱电化学检测

本文以甲醇与０．０３ｍｏｌ／Ｌ邻苯二甲酸氢钾缓冲液为淋洗液，采用安培型电化学检测，实现了２－硝基苯酚，３－硝基苯酚，４－硝基苯酚及２，４－二硝基苯酚和２，６－０二硝基苯酚等五种酚类化合物于Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ Ｃ８柱上反相高效液相色谱的分离及在Ｅ＝＋１．２Ｖ时于玻碳电极上的同时检测。     

高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸的研究

研究了用高效液相色谱法分析茶叶中茶氨酸的方法。以异硫氰酸苯酯（ＰＩＴＣ）作衍生剂、醋酸钠缓冲液与乙腈梯度洗脱、Ｃ１８柱分离、紫外２４３ｎｍ检测,探讨了茶氨酸的提取方法。比较了不同茶叶中茶氨酸的含量。方法具有快速、精确、灵敏等特点。     

高效液相色谱同时检测生物样本中8种单胺类神经递质

建立一种快速、准确测定生物样品中左旋多巴(L-DOPA)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴柯(DOPAC)、多巴胺(DA)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)及5-羟色胺(5-HT)8种递质含量的高效液相色谱- 电化学检测方法.使8种物质在25 min于单一流动相、单流速、单通道检测器情况下达到良好的分离效果.采用ESA MD-150色谱柱 (150 mm×3.2 mm, 3 μm),流动相为50 mmol/L柠檬酸、50 mmol/L无水乙酸钠、0.5 mmol/L 1-庚烷磺酸钠、0.5 mmol/L乙二胺四乙酸二钠、5 mmol/L三乙胺,pH 3.5,在甲醇浓度为5%～10%,流速0.3～0.5 mL/min, 柱温为30 ℃时,都能使8种物质很好分离,其中在甲醇浓度8%,流速0.4 mL/min,检测到前5种物质线性范围为0.005～10 nmol/L; 后3种0.001～10 nmol/L,8种物质相关系数在0.994～0.999之间,检出限在pmol/L水平;回收率在80.3%～102.1%之间,相对偏差在1.4%～4.8%之间.且对样本处理和保存方法进行了探讨.     

高效液相色谱多波长定性方法研究

介绍了高效液相色谱法中除常用的保留时间和光谱图定性以外的另一方法──多波长定性分析方法。根据Beer's定律可知,同一化合物在不同波长下测得的峰面积之比为定值。利用高效波相色谱多波长同时检测的方法,比较化合物在不同波长下的峰面积大小,建立了简便的定性方法,并在禁用假氮染料测定时对18种芳香腔的定性分析中得到成功的应用。