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相似文献
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1.
毛细管等电聚焦分离蛋白质   总被引:2,自引:1,他引:2  
采用均匀设计法进行未涂壁石英毛细管等电聚焦研究,考察两性电解质、甲基纤维素、四甲基乙二胺和牛磺酸几种组分对等电聚焦的影响,确定出了比较合适的浓度范围。当中性蛋白质迁移通过检测窗后,在进样端施加一低气压,从而使酸性蛋白质得到很好的分离,适用于较宽的pI范围。方法的重复性好,为蛋白质分离鉴定提供一种有力的工具。  相似文献   

2.
毛细管等电聚焦方法及其应用   总被引:1,自引:0,他引:1  
刘晓达  王全立  马立人 《色谱》1997,15(5):400-404
讨论了毛细管等电聚焦中所涉及的问题,如分离机理、电渗、迁移方法、检测器及其应用。由于毛细管等电聚焦操作方式的多样性,使其可适用于不同的仪器条件。非交联丙烯酰胺涂层能很好地消除电渗和蛋白吸附;而采用未处理的毛细管时,动态涂敷纤维素类亲水聚合物对碱性和中性蛋白亦能取得较好的分离效果。电荷耦合器件成像检测器尚待进一步发展才能成为常用的检测工具。对于复杂样品来说,仍需解决的问题是保证在较宽的pH范围内pI的线性。  相似文献   

3.
魏娟  谷雪  王彦  阎超 《分析化学》2011,39(2):188-192
以毛细管等电聚焦(cIEF)为第一维分离模式,以反相加压毛细管电色谱(pCEC)为第二维分离模式,开展离线二维色谱分离研究,并对复杂肽段进行分离.羟丙基纤维紊(HPC)涂层的毛细管用于cIEF分离,对6种标准蛋白质的平均分离柱效约为31万.在毛细管末端引进电隔离槽,方便了第一维样品的收集.在加电6 kV下,第二维pCE...  相似文献   

4.
毛细管等电聚焦和电渗泵驱动聚焦区带分离蛋白质   总被引:4,自引:0,他引:4  
建立了一种利用电渗泵驱动毛细管内的聚焦区带,实现毛细管电泳等电聚焦分离蛋白质的方法。通过控制电压来调节泵的输出流量,从而调节聚焦区带的迁移速度。适用于毛细管电泳等电聚焦两步法分离蛋白质等两性物质。考察了对牛血清白蛋白和溶菌酶两种粗提蛋白质混合物的分离,迁移时间的RSD分别为1.6%和1.3%,峰面积的RSD均为1.6%,证明方法可行。  相似文献   

5.
新型毛细管等电聚焦驱动方法的建立及其应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
毛细管等电聚焦(CIEF)在生物分离分析领域中的发展迅速.CIEF可分为两步法聚焦和一步法聚焦.电渗流(EOF)可作为一种新的驱动力.Rassi等根据串连体系中电渗流速率将被平均化的原理,将未涂层毛细管与聚乙二醇涂层的毛细管通过聚四氟乙烯管耦合起来,成功地利用毛细管区带电泳快速分离蛋白.此外,利用电渗流输液原理设计的电渗泵还可用作流动注射和微柱液相色谱的驱动系统。  相似文献   

6.
蛋白质组学对其分析技术提出了大规模、高通量的要求 [1] .传统的等电聚焦 ( p I) -分子量 ( MW)双向电泳技术 ( 2 D- Gel)尽管在蛋白质组学研究中占有重要地位 ,但其操作繁杂、工作周期长 .Pandey等[1] 将毛细管等电聚焦 ( CIEF)与电喷雾质谱 ( ESIMS)联用 ,使得 p I和 MW两维分离鉴定技术变得简单迅速 .但 CIEF- MS的接口操作需中断高压和将毛细管阴极端插入电喷雾管 ,故引起分析蛋白质的散焦和不重现 .本工作改进了 CIEF- MS接口 ,采用毛细管阴极端和电喷雾针一体化的电喷雾接口 ,无需中断高压 ,实现了 CIEF- MS的在线联…  相似文献   

7.
新型固定化pH梯度毛细管等电聚焦方法用于蛋白分离   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过化学键合建立一种固定化pH梯度的方法,用于毛细管等电聚焦分离蛋白质.采用微流控泵驱动毛细管内的聚焦区带,通过调节泵的流量,从而调节聚焦区带的迁移速度.该方法避免了自由溶液聚焦时两性电解质所带来的影响,实现了高灵敏度及检测波长自由选择等优点,适用于两步法毛细管电泳等电聚焦分离蛋白质等两性电解质.本文考察了对牛血清白蛋白和血红蛋白两种蛋白质混合物的分离,证明了该方法可行.  相似文献   

8.
通常采用二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析组织或细胞的全蛋白质,但难与质谱(MS)直接联用.用高效液相色谱(HPLC)和毛细管电泳(CE)分离分析蛋白质和多肽的一维分离模式的分辨率和峰容量有限.多维柱联用技术比一维分离有更高的分辨率和峰容量,便于和MS直接联用,  相似文献   

9.
毛细管电色谱进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
毛细管电色谱是近年来发展起来的微分离技术。较炙系统地综述了毛细管电色谱的进展以及其分离效能的因素,柱子类型和制柱相关技术、概括了它的适应范围,并且指出了它的发展趋势,引用文献68篇。  相似文献   

10.
陈泓序  屈锋 《色谱》2018,36(3):195-208
单克隆抗体药物在生物制药行业占有重要地位,是生物医药领域发展的主要方向。因此,单克隆抗体药物的质量控制已成为全球生物制药企业及法规机构关注的热点,对单克隆抗体药物精确表征的需求日益增加。毛细管电泳技术具有分离效率高、分析速度快、分离模式多、样品用量少等特点,已成为单克隆抗体药物分析和质量控制的重要手段。该文对毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦、毛细管区带电泳等模式在单克隆抗体药物的纯度分析、等电点测定、电荷异质性分析和N-寡糖分析的应用进行综述,以期为国内单克隆抗体研究开发和生产的企事业单位提供技术参考。  相似文献   

11.
设计并制作了一种新型的中空纤维接口,以此为核心构建了毛细管等电聚焦(CLEF)/毛细管无胶筛分(CNGE)电泳二维蛋白质分离技术平台,实现了将二维凝胶电泳从平板转移到毛细管中。利用该二维分离平台,对血红蛋白样品进行了高效、快速分离分析,验证了该二维分离平台的可行性及分离效能。实验结果表明:二维分离系统总的峰个数和分离效能都比各自一维分离系统有较大提高。  相似文献   

12.
L 《高等学校化学研究》2005,21(4):436-438
A liquid-phase isoelectric focusing electrophoresis system(Rotofor) was used as the prefractionation tool for the sample preparation in the MALDI-MS analysis of a protein mixture. Each fraction collected was then directly subjected to MALDI-TOF-MS analysis. By this approach, we are able to resolve two types of hemoglobins, A and C, which cannot be successfully separated by means of the traditional SDS-PAGE method.  相似文献   

13.
非水毛细管电泳进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
熊建辉  张维冰  许国旺  张玉奎 《色谱》2000,18(3):218-223
 毛细管电泳通常是在以水为溶剂的缓冲溶液中进行的,事实上以纯有机溶剂替代水介质同样可以完成特殊样品的电泳分离,且存在诸多优点。以所建立的非水毛细管电泳方法为核心,总结了该方法中有机溶剂、电解质的选择原则及溶质-添加剂相互作用模式,并综述了它在无机离子、中性物质、有机酸等化合物分离分析中的应用。71篇。  相似文献   

14.
杨春  张维冰  张玉奎 《分析化学》2003,31(9):1097-1100
开发了一种利用鸡卵清蛋白改性毛细管柱内表面的快速方法。改性后的毛细管柱可避免蛋白质样品的吸附作用,在较温和的条件下,柱性能有很好的稳定性,可适用于等电聚焦电泳分离生物样品的需要。  相似文献   

15.
非水溶液毛细管电泳   总被引:6,自引:0,他引:6  
王荣英  辛慧君 《分析化学》1997,25(10):1228-1231
评述了非水溶液毛细管电泳的应用及发展,对非水溶液毛细管电泳的原理及应用情况作了简要叙述,有机试剂在毛细管电泳中的加入,扩大了分析物质的范围,以纯有机试剂作电泳介质,具有许多水溶液毛细管电不能比拟的优点。  相似文献   

16.
毛细管电泳免疫分析的发展及动向   总被引:2,自引:0,他引:2  
毛细管电泳免疫分析是一种新兴的免疫分析技术,较常规免疫分析方法具有很多的优越性。本文对毛细管电泳免疫分析近几年的发展情况作了总结,并对其发展的动向作了评述。  相似文献   

17.
近年来,改善毛细管电泳灵敏度的相关研究得到了快速发展.作者对毛细管电泳与样品前处理联用技术的研究进展进行了综述,以期对相关的研究工作提供参考.  相似文献   

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