胶束在线扫集毛细管电泳法测定三聚氰胺

研究胶束在线扫集毛细管电泳法测定三聚氰胺的可行性,结果表明,与区带毛细管电泳相比,胶束在线扫集毛细管电泳法富集倍数提高约60倍。缓冲体系为140 mmol/L SDS+20 mmol/L NaH2PO4(pH 2.20)+10%(体积分数)甲醇,分离电压-18 kV,进样时间30 s,测量波长214 nm。考察了SDS浓度、pH、进样时间、运行电压等因素对分离测定的影响情况。在优化条件下,三聚氰胺在9 min时出峰,峰面积RSD≤3.7%。方法检出限、线性范围、相关系数分别为:0.13μg/mL、0.50~32.0μg/mL、0.9997。方法可用于奶粉中三聚氰胺的分离测定。     

毛细管电泳中样品的在线富集

由于毛细管进样体积小以及在柱检测光程短,极大地限制了毛细管电泳检测灵敏度的提高.为了提高毛细管电泳的检测灵敏度,多种样品富集的方法得以发展.本文对近年来毛细管电泳的样品预富集方法与应用作一简明的综述。     

DNA／聚（3-甲基噻吩）复合膜修饰电极的制备及其应用于研究8-羟基-2＇-脱氧鸟嘌呤核苷的伏安行为及测定

首先通过电聚合方法在玻碳电极表面制备了聚（3-甲基噻吩）（P3MT）修饰膜,然后在一定电位下将DNA分子电沉积到P3MT表面,制备了DNA／（P3MT）复合膜修饰玻碳电极．研究了8-羟基-2’-脱氧鸟嘌呤核苷（8-OH-dG）在该复合膜修饰电极上的伏安行为以及扫描速度、pH值和尿酸对其伏安行为和检测的影响．实验结果表明,该复合膜修饰电极结合了P3MT和DNA两者的优点,使8-OH-dG在复合膜修饰电极上的电化学行为明显改善,而且具有很好的重现性和稳定性．在0．1mol／LpH7．0的磷酸盐缓冲溶液（PBS）中,8-OH-dG的氧化峰电流与其浓度在0．28～4．2μmol／L和4．2～19．6μmol／L两个范围内成良好的线性关系,检出限为56nmol／L（S／N=3）．该研究可以为制备HPLC或毛细管电泳电化学检测器检测8-OH—dG打下一定的基础,因此在检测尿样中8-OH-dG的研究方面具有潜在的应用价值．     

高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用测定尿中的8-羟基脱氧鸟嘌呤

建立了尿样中8-羟基脱氧鸟嘌呤的HPLC-MS测定方法.尿样中的8-羟基脱氧鸟嘌呤采用WCX固相萃取小柱预富集后,以0.5%甲酸-甲醇洗脱,吹干后用0.5 mL流动相溶解剩余物上机测定.采用分子的二级碎片,方法在5.0～500.0 μg/L范围内呈良好线性关系,相关系数r=0.999 4,检出限(S/N=3)为0.50...     

胶束毛细管电泳在线扫集技术同时分离测定穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的研究

采用胶束毛细管电泳在线扫集技术分离测定了中药穿心莲中脱水穿心莲内酯和穿心莲内酯.电泳条件:以20 mmol/L H3BO310 mmol/L NaH2PO4-50mmol/L SDS(含体积分数20%甲醇,pH 2.4)为电泳运行缓冲溶液,未涂层石英毛细管(58 cm×50 μm i.d.,有效长度为41.2 cm)为分离通道,重力进样,进样高度为11 cm,-20 kV恒压,检测波长为246 nm.富集倍数可以达到200倍以上.在5.70～91.20 mg/L,和3.96～31.68 mg/L范围内呈良好的线性关系,对两种内酯分别进行了定量分析.加标平均回收率脱水穿心莲内酯为100.80%,穿心莲内酯为98.06%.     

胶束扫集-电动色谱分离-毛细管电泳法测定升麻中三种有机酸含量

采用电场增强胶束扫集-电动色谱-毛细管电泳法对升麻中异阿魏酸、阿魏酸和咖啡酸的含量进行了测定,电泳缓冲体系为90 mmol·L~(-1)SDS-20 mmol·L~(-1)NaH_2PO_4(pH 2.20)-甲醇(10+90),分离电压为20 kV,检测波长214 nm。在优化的试验条件下,胶束扫集-电动色谱法对异阿魏酸、阿魏酸和咖啡酸富集倍数为4.3,4.8,2.9,3种有机酸均在14 min内出峰,线性范围分别为0.50～20.0,0.50～20.0,1.0～40.0 mg·L~(-1)。应用此方法分析了升麻样品并进行了回收率和精密度试验,测得回收率在93.2%～113.3%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)小于6%。     

毛细管区带电泳法测定板蓝根注射液中四种核苷的含量

采用毛细管区带电泳法测定了板蓝根注射液中胞苷、腺苷、鸟苷和尿苷的含量。电泳条件:采用未涂层石英毛细管(32.5 cm×50 μm i.d.,有效长度23.5 cm),以60 mmol/L硼砂溶液-10%(体积分数)异丙醇-20%（体积分数）乙腈为运行缓冲液,在25 ℃下以20 kV恒压电泳分离,压力进样 (1 kPa×10 s),检测波长254 nm。对电泳条件各因素进行了讨论,如缓冲液的种类、浓度和pH值,有机改性剂的种类和浓度,分离电压和毛细管温度等。样品经0.45 μm微孔滤膜过滤后直接进样;采用外     

基于场放大进样-扫集技术的毛细管电泳法测定头孢他啶、头孢噻肟钠和头孢曲松钠

采用阳离子型离子液体表面活性剂1-十四烷基-3-甲基咪唑溴盐为毛细管胶束电动色谱(MEKC)的假固定相,引入了场放大进样-扫集在线双富集技术,建立了三种头孢菌素类抗生素(头孢他啶、头孢噻肟钠和头孢曲松钠)分离检测的方法。详细考察了影响在线富集、分离和检测的因素,在优化的条件下,三种药物可在10 min内得到分离。同常规的扫集-MEKC法相比,采用这种在线双富集技术对头孢他啶、头孢噻肟钠和头孢曲松钠的富集倍数分别达到113、97和100。该方法简便、快速、灵敏、重现性好,并且成功用于尿样中三种药物的分离测定,结果令人满意。     

动态pH联接-扫集毛细管电泳法测定化妆品中迷迭香酸的含量

采用动态pH联接-扫集毛细管电泳法对化妆品中的迷迭香酸进行检测。用重力进样的方式,进样高度为15 cm的情况下,研究了硼砂浓度、pH、十二烷基硫酸钠(SDS)浓度、甲醇浓度、样品基体、进样时间、分离电压对富集与分离的影响。优化后的实验条件:15 mmol/L硼砂-45 mmol/L SDS(pH8.8)-15%甲醇为缓冲液,进样时间60s,分离电压16kV,样品中磷酸盐浓度10 mmol/L,样品基质pH 4.7。在上述条件下,迷迭香酸(RA)的线性回归方程式为y=539200ρ+53588(r=0.9985),线性范围为0.144～3.6μg/mL,检出限0.036μg/mL,迷迭香酸的回收率为92.5%～103%,相对标准偏差为2.5%。     

场放大进样-胶束扫集毛细管电脉法测定痕量泼尼松

建立了胶束毛细管电动色谱在线富集技术测定药品中痕量的泼尼松的方法。在胶束扫集的基础上联用场放大进样,使泼尼松的富集倍数提高了136倍;检出限由原来的2.7mg/L降至20μg/L。胶束扫集毛细管电泳缓冲体系为120mmol/LSDS、10mmol/LNaH2PO4(pH2.5)10%乙腈(V/V)。分离电压-20kV,进样电压-20kV,进样时间70s,进水时间180s,检测波长250nm。同时讨论了SDS浓度、样品基质pH、进样电压、进水时间和进样时间对分离效果的影响。实验结果显示:在优化实验条件下,样品的检测仅需8min,泼尼松在0.05～10mg/L的范围内线性关系良好(r=0.998)。回收率在89.4%～106%之间,相对标准偏差在2.1%～2.6%之间,可用于各种中药制剂中泼尼松的含量测定。     

基于胶束反向扫集的毛细管电泳量子点电化学发光研究

研究了胺分子对CdSe量子点电化学发光的增强作用，构建了CdSe量子点电化学发光传感器.结合胶束扫集预富集技术，发展了一种基于胶束反向扫集的毛细管电泳（CE）量子点（QD）电化学发光（ECL）新方法用于莱克多巴胺和克伦特罗的同时分离检测.毛细管内首先充满含有十二烷基硫酸钠（SDS）胶束的缓冲溶液，电动进样时，样品分子进入毛细管，在入口端被迎面而来的SDS胶束捕获并富集，经CE分离后顺次进入检测端，根据不同浓度的胺分子对CdSe量子点发光强度的增强作用不同，实现对不同胺分子的同时分离检测.胶束反向扫集富集技术，使胶束-样品结合物在毛细管中处于准静止状态，进样时间可达50 min，量子点电化学发光信号增强6000倍.该方法成功用于猪肉样品中莱克多巴胺和克伦特罗的同时分离检测，其线性范围分别为（0.8~2960）和（3.0~5520）μg/L，检出限分别为96.8和192.5 ng/L.     

毛细管电泳-柱端安培检测法用于抗癌药物2-氨基-6-巯基嘌呤和8-氮杂鸟嘌呤的研究

采用毛细管电泳-安培检测法建立一种简单、快速、有效的同时分析抗癌药物2-氨基-6-巯基嘌呤和8-氮杂鸟嘌呤的新方法.在长50 cm、内径为25μm的未涂层毛细管中,采用20 mmol/L磷酸盐(pH为7.0)缓冲液作为运行液,当分离电压为21 kV时,两组分在12 min内达到基线分离.在上述最佳分离条件下,当电极电位为1.050V、进样时间为10 s时,2-氨基-6-巯基嘌呤和8-氮杂鸟嘌呤的峰电流和浓度之间呈良好的线性关系,其相关系数分别为0.999 20、.999 0,检测限分别为3.0×10-7、2.0×10-7mol/L.7次重复实验2-氨基-6-巯基嘌呤和8-氮杂鸟嘌呤的日间峰电流RSD分别为2.44%3、.46%.利用该法检测了牛血清蛋白中的2-氨基-6-巯基嘌呤和8-氮杂鸟嘌呤,回收率分别为100%-113%,93.0-102%.     

在线扫集-毛细管胶束电动色谱法对石榴与石榴叶中没食子酸含量的测定

建立了一种在线扫集-胶束电动色谱法测定没食子酸的新方法。考察了背景溶液pH值、十二烷基硫酸钠(SDS)浓度、样品基体组成和进样时间对富集效果的影响。使用未涂层的毛细管柱(48.5 cm×75μmi.d.,有效柱长40 cm),pH9.0的20 mmol/L硼酸盐+50 mmol/LSDS为背景溶液,在紫外检测波长272 nm、运行电压18 kV的条件下,200 s内的富集倍数可达20倍。线性范围为0.62~10.30 mg/L(r=0.999),检出限(S/N=3)为0.08 mg/L,平均回收率为104%。没食子酸迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别为1.2%和1.6%。方法快速、准确可靠、灵敏度高、重复性好,可检测石榴不同部位和石榴叶以及饮料中没食子酸的含量。     

用高效毛细管电泳测定二(2′-脱氧-2′-氟)嘧啶核糖核苷酸对蛇毒磷酸二酯酶的稳定性

本文报道用高效毛细管电泳测定蛇毒磷酸二酯酶催化的二(2’-脱氧-2’-氟)嘧啶核糖核苷酸的水解速度.高效毛细管电泳用于这个目的有分辨率高、样品需要量’、使用不含有机溶剂的缓冲液和操作方便等优点.用来测定具有中等反应速度的反应是很方便的.     

毛细管电泳法高效筛选8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶的核酸适配体

8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG1)是人体中重要的功能蛋白,在修复DNA氧化性损伤过程中起关键作用。氧化应激等引起的氧化损伤易导致炎症反应的发生,对OGG1的抑制可以一定程度上起到缓解作用;对癌细胞OGG1的抑制有望作为癌症治疗的新方法。目前的研究多集中于小分子对OGG1功能的影响和调控,而OGG1的适配体筛选尚未见报道。作为功能配体,适配体具有合成简单、高亲和力及高特异性等优点。该文筛选了OGG1的核酸适配体,结合毛细管电泳高效快速的优点建立了两种基于毛细管电泳-指数富集进化(CE-SELEX)技术的筛选方法:同步竞争法和多轮筛选法。同步竞争法利用单链结合蛋白(SSB)与核酸库中单链核酸的强结合能力,与目标蛋白OGG1组成竞争体系,并通过增加SSB浓度来增加竞争筛选压力,以去除与OGG1弱结合的核酸序列,一步筛选即可获得与OGG1强结合的核酸序列。多轮筛选法在相同孵育条件和电泳条件下,经3轮筛选获得OGG1的核酸适配体。比较两种筛选方法的筛选结果,筛选结果中频次最高的3条候选核酸适配体序列一致,其解离常数(K_D)值在1.71~2.64 μmol/L之间。分子对接分析结果表明候选适配体1(Apt 1)可能与OGG1中具有修复氧化性损伤功能的活性口袋结合。通过对两种筛选方法的对比,证明同步竞争法更加快速高效,对其他蛋白核酸适配体筛选方法的选择具有一定的指导意义。得到的适配体有望用于OGG1功能调控,以抑制其修复功能。     

在线扫集-胶束电动毛细管色谱法对活血通脉片中阿魏酸与原儿茶醛的分离测定

建立了在线扫集-胶束电动毛细管色谱法同时分离测定活血通脉片中阿魏酸和原儿茶醛含量的方法。讨论了pH值、十二烷基磺酸钠(SDS)浓度、电压、有机溶剂、进样时间和背景电解质组成对分离效果的影响。结果表明:采用未涂层熔融石英毛细管,以20 mmol/L磷酸二氢钠、140 mmol/LSDS为电泳缓冲液(含16%甲醇,pH2.2),在优化条件下,阿魏酸和原儿茶醛在19 min内出峰,峰面积RSD均小于5%,其线性范围分别为0.67~21.4、0.72~23 mg/L,回收率分别为94%~108%、91%~106%,检出限(S/N=3)分别达55.5、34.8μg/L。与胶束电动毛细管色谱相比,在线扫集-胶束电动毛细管色谱分离效果稳定,重现性好。该方法用于活血通脉片中阿魏酸、原儿茶醛含量的测定,结果满意。     

胶束毛细管电泳在线推扫技术分离检测猪肉组织中痕量喹诺酮类药物

利用胶束毛细管电泳法结合在线推扫富集技术对组织中残留的痕量环丙沙星、氧氟沙星和恩诺沙星进行了检测, 弥补了毛细管电泳检测灵敏度低的缺点, 大大减化了操作过程, 为动物食品组织中残留的痕量药物检测提供了一种新的简便可靠的方法.     

胶束毛细管电泳在线推扫富集技术测定工业废水中痕量苯酚和硝基苯酚

利用胶束毛细管电泳在线推扫富集技术建立了测定工业废水中痕量苯酚、邻硝基苯酚和间硝基苯酚的方法。采用未涂层熔硅弹性石英毛细管(60cm×75μm,有效柱长52cm),选择20mmoL/L硼-砂80mmoL/L十二烷基硫酸钠(SDS)(pH9.45)为缓冲溶液,分离电压18kV,紫外检测波长214nm,在200s内可实现苯酚、邻硝基苯酚、间硝基苯酚的分离检测。在优化条件下,苯酚、邻硝基苯酚、间硝基苯酚的检出限分别为0.03、0.020、.02mg/L;相对标准偏差RSD(n=3)分别为3.42%、4.15%、3.48%;间硝基苯酚富集倍数可达1000倍。     

毛细管电泳拆分2-(9-蒽基)-2-羟基乙酸对映体

以羟丙基-β-环糊精为手性选择试剂,首次对外消旋的2-（9-蒽基）-2-羟基乙酸对映体的毛细管电泳分离进行了研究.比较了环糊精的种类、浓度、背景电解质的类型及pH对分离的影响.实验结果表明,采用15mmol/L羟丙基-β-环糊精为手性选择试剂,在20 mmol/L的三羟甲基氨基甲烷（Tris）-磷酸缓冲体系中（pH6.0）,2-（9-蒽基）-2-羟基乙酸对映体达到基线分离,分离度为1.58.     

阴离子选择性耗尽进样-胶束扫集毛细管电泳法对痕量醋酸氢化可的松的测定

联用阴离子选择性耗尽进样和胶束扫集两种在线富集技术,建立了胶束毛细管电泳方法测定化妆品中醋酸氢化可的松的方法。讨论了SDS浓度、样品基体、进样电压、进水时间和进样时间对富集和分离的影响。优化的实验条件:以120 mmol/L SDS-20 mmol/L NaH2PO4(pH2.2)-10%(体积分数)甲醇为缓冲体系,分离电压-20 kV,进样电压-20 kV,进样时间80 s,进水时间200 s,测量波长250 nm。在该实验条件下,醋酸氢化可的松的富集倍数比普通毛细管电泳法提高了约173倍。方法的线性范围为0.05~5.0 mg/L,检出限为12.6μg/L。该方法用于化妆品中醋酸氢化可的松含量的测定,回收率为98%~105%,相对标准偏差均小于4.0%(n=4)。