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生物工程(Biotechnology)是八十年代技术革命的重要组成部分。生物工程的各个分支——基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程中都面临着大量的蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的分离分析工作,迫切需要高效、高速的分离分析方法,让高效液相色谱在这一领域中发挥日益重要的作用,自然已成为生物工程学家和色谱学家的共同愿望。本文拟就这一发展趋势做扼要的讨论。 相似文献
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中药物质基础的高效液相色谱分离分析方法研究 总被引:2,自引:0,他引:2
高效液相色谱方法已成为中药物质基础研究的重要手段.在中药质量控制、中药标准品制备、活性化合物发现等方面发挥着不可替代的作用.然而我们的实验数据表明,一个中药材可能包含上万个化合物.中药物质基础的复杂性对高效液相色谱方法提出了巨大挑战.本文针对液相色谱方法在中药物质基础分离分析中存在的问题与难点,结合红花、黄连、姜黄三味药材样品,从亲水色谱分离模式、新型色谱固定相、二维液相色谱分离系统和液相色谱质谱联用技术等方面讨论了液相色谱的分离分析方法和发展方向.结果表明,高效液相色谱新技术新方法在中药复杂体系的分离分析中具有很大的发展潜力和应用前景. 相似文献
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1 引言高效亲和液相色谱(HPAC)是将经典亲和色谱的高特异性同高效液相色谱的快速、高效相结合产生的一种蛋白质的分离技术.它使经典亲和色谱原来需要几个小时才能完成的纯化工作缩短为十几分钟或更短,而且纯化倍数高,分离效果好.因此,HPAC在近年基因重组蛋白质的纯化方面得到了广泛的应用.基因重组人白细胞介素-2(rhIL-2)是生物体内具有重要生物学功能的细胞因子,目前已成功地进行了基因表达.本文以自制的rhIL-2单克隆抗体(McAb)的HPAC填料纯化了大肠杆菌(E.coli)表达的rhIL-2. 相似文献
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微型化是现代分析仪器发展的重要趋势。微型化液相色谱仪器在提供与常规尺度液相色谱相同甚至更高分离效率的同时,可以有效减少溶剂和样品的消耗;在液相色谱-质谱联用中,低流速进样可以有效提高质谱离子源的离子化效率,提高质谱检测效率;对于极微量样品的分离,微型化的液相色谱可以有效减少样品稀释;液相色谱的微型化还有利于液相色谱仪器整体的模块化和集成化设计。芯片液相色谱是在微流控芯片上制备色谱柱并集成相应的流体控制系统和检测系统。芯片液相色谱是色谱仪器微型化的一种重要方式,受到学术界和产业界的普遍关注,但是这一方式也充满挑战。液相色谱微流控芯片需要在芯片基底材料、芯片色谱柱的结构设计、微流体控制技术、检测器技术等方面做出创新,使微流控芯片系统适配液相色谱分离技术的需要。目前芯片液相色谱领域面临的主要问题在于芯片基底材料的性质难以满足芯片液相色谱进一步微型化和集成化的需求;因此芯片液相色谱在未来的发展中需要着重关注新型微流控芯片基底材料的开发以及微流控芯片通道结构的统一设计。该文着重介绍了芯片液相色谱技术近年来的研究进展,并简要展示了商品化芯片色谱当前的发展情况。 相似文献
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疏水色谱法的进展及其在生化研究中的应用 总被引:10,自引:0,他引:10
着重评述了疏水色谱法的理论研究及疏水固定相中无机填料、有机填料、非多孔填料以及大孔膜的新发展,并对疏水色谱法在生物大分子的分离、纯化和生化研究中的应用,包括在蛋白质复性、折叠和分子构象变化等方面的应用作了介绍,全文包括62篇文献和一张表格。 相似文献
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用于变性蛋白质复性及同时纯化的简易型色谱柱的研制及其应用 总被引:1,自引:0,他引:1
研制出一种简易型色谱柱并通过装填大颗粒的疏水色谱填料对色谱柱的性能进行了考察,该柱的外形和操作如同传统的液相色谱柱,但它却在生物大分子分离方面有着和高效液相色谱相似的分辨率。另外,只要给该柱装填合适的固定相,比如疏水相互作用色谱固定相,便可用于蛋白质的复性及同时纯化。实验考察了该色谱柱的结构、操作和性能,包括柱压、柱寿命及对蛋白质的分辨率等。以溶菌酶为模型蛋白质,实验测得其在初始浓度为50.0 g/L时的质量回收率和活性回收率分别为(96.6±1.3)%和(101.1±6.0)%。这种简易型色谱柱价格低廉 相似文献
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源于大肠杆菌蛋白的表达、液相色谱复性与纯化新进展 总被引:1,自引:0,他引:1
对近两年来源于大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)的蛋白表达和用蛋白折叠液相色谱(protein folding liquid chromatography,PFLC)法对所形成的包涵体目标蛋白的复性并同时纯化的新近发展做了简要的介绍和评述.PFLC法用于包涵体蛋白分离、纯化很广,其特点是除了在色谱柱上将目标蛋白与其他组分分开,还同时要在色谱柱上进行包涵体蛋白折叠.可以说,现代生物技术中所用的大多数有价值蛋白产品的制备仍然有赖于不同机理的液相色谱(Lc)法.而用PFLC法对源于E.coli的蛋白的制备方法更具可塑性和容易达到规模化,其生成本可以成倍地降低.该文主要内容包括了E.coli蛋白的表达及样品前处理、PFLC的实用范围、PFLC的优化、PFLC中的新技术、新设备和新方法、PFLC的分子学机理、应用事例及对未来的展望. 相似文献
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The number of proteins produced by recombinant DNA technology continues to grow at a rapid pace. In this review, the emphasis is on proteins that are of therapeutic interest. Aspects of protein analysis, such as glycoform separation of proteins produced in mammalian cells and the separation of oligosaccharides for structure elucidation, are covered. The use of antibodies as therapeutic proteins is growing and currently antibodies are the largest class of proteins produced by biotechnology. This has merited a separate section on analysis of antibodies by capillary electrophoresis (CE). Applications of mass spectrometry as an ancillary technique, used in conjunction with CE, are also covered briefly. This review covers the literature since 1999. 相似文献
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环境样品中砷、硒形态分析研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
综述了近年来环境样品中砷、硒形态分析的研究进展,主要内容包括样品的前处理技术、分离技术、检测技术。前处理技术主要是用各种提取液采用各种方式提取样品中的砷、硒形态,分离技术主要有高效液相色谱分离、气相色谱分离、毛细管电泳分离等,检测技术主要有原子吸收光谱法、原子发射光谱法、原子荧光光谱法、电感耦合等离子体质谱法等。最后对其研究前景进行了展望。 相似文献
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液相色谱/电喷雾质谱(LC/ESI/MS)在蛋白质分析鉴定中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
对液相色谱/电喷雾质谱(LC/ESI/MS)在蛋白质分子量测定、一级结构的分析、蛋白质和多肽纯度的鉴定、肽质量酶谱、蛋白质分子内二硫键的定量和定位、磷酰化位置的测定以及在蛋白质组中的应用等方面进行了综述和讨论。 相似文献