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用微玻璃珠研磨法将 p ARG7质粒转入到莱茵衣藻精氨酸依赖型、缺壁突变株品系 CC-1 61 8( arg7cw1 5 mt-)和 CC-1 61 7( arg7cw1 5 mt-)中 ,得到了一些不同的插入型突变转化子 .CC-1 61 7突变株品系的转化率为 72个 /μg DNA,CC-1 61 8突变株品系的转化率为 2 96个 /μg DNA,即转化率比 CC-1 61 7突变株品系高 .经多次转化共获得各种转化子 3 90 0多个 ,对它们进行荧光检测后检测出缺乏叶绿素 b的两个突变子ARGT3和 ARGT4,并进一步用高效液相色谱法对其光合色素含量进行检测结果证实 ,这两个突变体的确丧失了叶绿素 b合成能力 .它们将可作为 CBN1基因的克隆及其定位的有用的工具 相似文献
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用微玻璃珠研磨法将p387NIT1质粒转入到莱茵衣藻硝酸还原酶缺陷型及缺壁突变株品系CC-2677(cw15nit1-305 mt-)中,得到了一些不同的插入型突变转化子.在本实验室条件下CC-2677突变株品系的转化率最高时达到了88个/μg DNA.经多次转化共获得各种转化子1 800多个,对它们进行荧光检测后检测出缺乏叶绿素b的一个突变子NIT17-1.并进一步用高效液相色谱法对其光合色素含量进行检测,结果证实该突变体的确丧失了叶绿素b合成能力.该突变株将可作为CBN1基因克隆及其定位的有利工具. 相似文献
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莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)中叶绿素b生物合成的遗传控制研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
光合作用是植物生理学研究的重要领域.莱茵衣藻是用于研究光合作用遗传的重要模式植物.本文以叶绿素b的合成途径为线索,阐述了以莱茵衣藻为工具,对合成途径各调控酶及其编码基因的研究成果.重点讨论对比了有关叶绿素b合成的不同观点,对于CAO基因与CBN1基因这两个叶绿素b的主控基因进行了分析,提出要弄清叶绿素b的合成途径,首先要弄清两基因是否为同源基因.用“点滴试法”与彩色数字成像法对莱茵衣藻色素调节基因突变株进行检测和分析,通过筛选调控基因相关突变株,就可为莱茵衣藻中叶绿素b生物合成相关基因调控机制的研究尊定基础. 相似文献
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用电击法将带有CAO基因片段的Psp109-E8质粒转入到莱茵衣藻cbnl-48mt^+基因突变株中后.转化子中出现了叶绿素b的恢复性表达,初步验证了丧失合成叶绿素b能力的cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;将1641-1b(cbn1-43mt^+)和CC-1354(cbn1-48mt^+)突变株分别与CBS5(cao5mt^-)突变株的分离子CBS5-c1和CBS5-c5进行杂交.并通过随机分析方法分离获得1842个减数分裂后代分离子.经检测其中均没有发现有野生性表型的分离子.初步证明cbn1和cao4突变基因问有着非常紧密的连锁性;从上述杂交系分离获得的50多个四分子中也没有检测发现显示野生性表型的分离子.进一步证明了cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;根据CAO基因的DNA序列,从5'-端和3’-端设计两个探针,分别与莱茵衣藻核基因组I号染色体上GBP1和RB47分子标记之间的21个BAC克隆进行的点杂交实验结果显示.该两个探针序列与21号BAC克隆(莱茵衣藻BAC文库序列号33e2)片段均有同源区的特性,此项DNA杂交实验初步证明.CAO基因的位点是在cbml突 变基因左右两侧的GBP1和RB47两个分子标记之间的33e2 BAC克隆片段区. 相似文献
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用电击法将带有CAO基因片段的P sp109-E 8质粒转入到莱茵衣藻cbn1-48m t 基因突变株中后,转化子中出现了叶绿素b的恢复性表达,初步验证了丧失合成叶绿素b能力的cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;将1641-1b(cbn1-43 m t )和CC-1354(cbn1-48 m t )突变株分别与CBS5(cao5 m t-)突变株的分离子CBS5-c1和CBS5-c5进行杂交,并通过随机分析方法分离获得1842个减数分裂后代分离子,经检测其中均没有发现有野生性表型的分离子,初步证明cbn1和cao 4突变基因间有着非常紧密的连锁性;从上述杂交系分离获得的50多个四分子中也没有检测发现显示野生性表型的分离子,进一步证明了cbn1和cao突变基因具有等位性的属性;根据CAO基因的DNA序列,从5′-端和3′-端设计两个探针,分别与莱茵衣藻核基因组Ⅰ号染色体上GBP 1和RB 47分子标记之间的21个BAC克隆进行的点杂交实验结果显示,该两个探针序列与21号BAC克隆(莱茵衣藻BAC文库序列号33e2)片段均有同源区的特性,此项DNA杂交实验初步证明,CAO基因的位点是在cbn1突变基因左右两侧的GBP 1和RB 47两个分子标记之间的33e2 BAC克隆片段区. 相似文献
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达草灭对莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii) 品系遗传后效应的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过将莱菌衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)6种达草灭抗性突变株分别与野生型株、丧失合成叶绿素b能力的cbnI-43等基因突变株和精氨酸依赖型突变株杂交对其后代进行四分析与随机分析,发现在Nfr-4-Nfr-7突变株中达草灭抗性状只有单一核基因遗传的性质,而在Nfr-1、Nfr-3~Nfr-7抗性株的抗性性状都是由同一个nfr-1基因(norflurazon resisanse)的突变所决定的,而Nfr-4抗性株的抗性性状是由另一滚突变等位基因nfr-2所决定的。在Nfr-1和Nfr-3抗性株中除了nfr-1基因的突变还有nfr-3基因突变的参与。 相似文献
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以新疆陆地棉为实验材料,通过花粉管通道法向优质棉花高代材料中导入了灰绿藜耐盐基因CgNHX.经过三年连续转导的结果显示:①大田注射期间的天气状况对转导成功影响较大.当昼夜温差较大且有露水时,花和铃的状态较好,导致结铃率、卡那霉素检测阳性率增加;②棉叶基因组DNA的提取质量与棉叶采后冷藏的时间有一定相关性.采后一周内提取的棉叶DNA质量较好,PCR检测获得30%的阳性率,而两周及以后的棉叶DNA质量降低,PCR检测未获得阳性结果;③在mRNA水平上检测转基因植株的表达较为困难.本实验中PCR检测阳性的30份样品,在RT—PCR检测中均未获得目的基因的明显特异扩增条带,只有部分样品在目的条带的位置出现弥散带型.本研究初步显示外源基凶CgNHX已导入棉花受体中,但其表达情况还需进一步检测验证. 相似文献
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研究了三氟甲烷磺酸(HOTf)催化氧化1-茚酮的性能,考察了HOTf、H2O2的用量、反应时间、反应温度和溶剂等几个因素对反应的影响,并与用其它几种质子酸的反应结果进行了比较.研究结果表明,以HOTf为催化剂时反应效果最好,0.1g1-茚酮在0.5mL HOTf、0.32mL30%H202和2mL2,2,3,3-四氟-1-丙醇(TFP)体系中,恒温60℃反应4h,转化率可以达到86%,产物邻羟基苯丙酸的选择性达98%.可能的反应机理是:1-茚酮先经过Baeyer-Villiger反应生成二氢香豆素,后者进一步水解得到邻羟基苯丙酸. 相似文献
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用差热曲线(DTA)、热重曲线(TG)法测得了酷氨酸的热解曲线,用AM1方法优化了酷氨酸及其中间产物和产物分子的构型,计算了有关分子的键长和键级,通过对其热解过程的分析及AM1研究的结果,首次提出了酪氨酸的热解机理。 相似文献
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槐定碱与溶菌酶相互作用的荧光法研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用荧光和紫外-可见光谱法,研究了生理酸度(pH 7.4)条件下槐定碱与溶菌酶(LYS)相互作用的光谱特性。荧光猝灭光谱、共振瑞利散射光谱和紫外吸收光谱实验显示,槐定碱与溶菌酶相互作用生成新的复合物引起的静态猝灭是导致溶菌酶内源荧光猝灭的主要原因;求得不同温度下槐定碱与溶 相似文献
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用停止-流动ESR实验技术研究了在近中性条件下,1-十一烷基-十二烷基硫酸钠(SUDS)负离子胶束的形成及在此胶束中,维生素C还原4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基(HO-TEMPO)及其亲脂性衍生物4-己酰氧基-TEMPO(C 相似文献