小麦离体花药中的雄核发育

观察了在离体培养的小麦花药中雄核发育的过程。一些单核花粉经过一次均等分裂成为两个细胞,它们继续分裂形成多细胞球。多细胞球进一步发育成为外形不规则的愈伤组织块。花粉愈伤组织中幼芽的发生不仅取决于所用的培养基,还与花粉愈伤组织的细胞的状态有关。在某些培养基上花药产生胚状体,然后长成幼苗。已检查的花粉植株的根尖细胞的染色体数均为21个,是单倍体。     

通过氮源比较试验建立一种较好的水稻花药培养基

花药培养是单倍体育种的主要技术环节,目前普遍采用国外引进的Miller培养基诱导水稻花粉愈伤组织和花粉植株,但诱导率不高。我们研究了氮源对水稻花粉愈伤组织的发生、生长和分化的影响,发现铵离子浓度显著影响花粉愈伤组织的诱导率并确定水稻花药培养的最适铵离子浓度大约为7.0mM(相当于3.5mM硫酸铵)。根据这一实验结果建立了一种较好的水稻花药培养基(N_6培养基),此培养基诱导水稻花粉愈伤组织和花粉植株的效果显著超过Miller培养基,这就为我国的水稻单倍体育种工作提供了一种有价值的新方法。     

小麦花粉植株的诱导及其后代的观察

用补加生长素、加或不加激动索的Ms培养基培养普通小麦(Triticum aestivum)的花药,成功地诱导小麦花粉通过形成愈伤组织发育为完整植株。研究表明:处于单核中期阶段的花粉最适合于诱导形成愈伤组织;补加水解乳蛋白和适当提高蔗糖浓度,对促进花粉形成愈伤组织有一定效果。用不同材料(品种或杂交组合)的花药进行培养,结果有较大差异。杂种花粉植株的种子后代表现整齐一致,没有分离,说明将这种方法用于育种是有希望的。     

小黑麦离体花药中花粉细胞的分裂和分化

如何提高由花粉诱导单倍体植株的成功率,是当前单倍体育种工作中存在的首要问题。研究花粉在离体条件下的分裂和分化,对其机理有更多的了解,就有可能采取某种措施提高单倍体植株的诱导成功率。 在人工培养基上,小黑麦(Triticale)花药中单核花粉的第一次分裂经常是形成形态上相似而生理上已有很大分化的两个子核。两个子核的进一步分裂采取了不同的方式,而且在核酸代谢上也有明显的差异。它们在单倍体愈伤组织的建成上起了不同的作用,对分化、静止和衰退的愈伤组织细胞的核酸及线粒体动态进行了初步的分析。     

三叶橡胶花粉植株的获得

1977年2—3月,从三叶橡胶(Hevea brasiliensis Muell.-Arg.)花药培养获得了五株花粉植株.它们都具有主根、轮生侧根、茎、子叶、第一对真叶和顶芽.在显微镜下已观察到花粉粒发育成为胚状体的全过程.对15个直径2—3毫米的胚状体所进行的细胞学观察表明,它们全部都是单倍体(染色体数为18),在小植株根尖中,观察到许多非整倍体细胞,少数仍是单倍体细胞,但没有双倍体细胞.因此可以肯定,我们用花药培养所得植株起源于花粉。     

水稻花粉植株的诱导条件及其遗传学表现的研究

本文研究了在离体培养水稻花药的条件下,一些因素对于诱导花粉发育为植株的作用,结果表明,基本培养基中除补加生长素外,再补加酵母提取物、水解核酸等,对于提高愈伤组织诱导频率有显著效果,在补加有椰子乳、水解乳蛋白、水解核酸等的培养基中形成的愈伤组织分化根与芽的能力高于对照,培养时温度的高低对愈伤组织的发生与分化也有明显影响,获得了从x—4x不同倍性的花粉植株,对于来自F₁花粉的二倍体植株后代进行的遗传学观察表明,它们基本上是整齐一致没有分离的。     

小麦花粉植株花粉母细胞染色体的变异

本文对72个当代花粉植株(H_1)花粉母细胞的染色体变异情况进行了研究,并探讨了其染色体的稳定性问题.根据染色体倍性情况,72个小麦花粉植株可分为:3X,6X,8X.6X-2(缺体)和混倍体等五类. 在72个花粉植株中,87.5％为单倍体和二倍体.这和文献[1]的结果十分相近.同时观察到二倍体的染色体构型稳定,因此,花药培养方法可直接应用于育种工作. 在获得的近10％的异倍体和非整倍体植株中,缺体、八倍体以及混倍体等植株有的结了种子.文中还讨论了这些异倍体和非整倍体的产生和利用问题,认为花药培养方法可能获得染色体发生变异的新类型.     

用单倍体育种法育成水稻新品种的研究

单倍体育种是一种多快好省的育种方法,它能控制杂种分离、加快育种速度、简化选育程序和提高选择效率,是育种工作上的一项重大技术革新,本文报道了运用单倍体育种技术培育水稻新品种的研究结果。我们用N_6或Miller’s培养基诱导花粉愈伤组织,并使其分化出单倍体和自然加倍的二倍体花粉植株,并用秋水仙素或富民隆使单倍体植株染色体加倍,来源于杂种的花粉植株当代表现多种多样,二代基本整齐一致,后代没有生活力减退现象,通过对花粉植株后代的选择鉴定,从中选出三个优良品系,并进行了广泛的区域性鉴定和生产示范,其中“单4”品系(命名为“单丰一号”)亩产1100斤左右,适于在松花江南部地区推广,文中还讨论了水稻单倍体育种技术和后代选育的有关问题。     

小麦花药诱导单倍体植株的减数分裂分析

本文研究了由花药诱导的72株小麦单倍体的减数分裂过程。阐述了减数分裂各期染色体的行为,特别是二价体和单价体在中期Ⅰ和中期Ⅱ的分布。根据单倍体花粉母细胞减数分裂染色体行为的特点,讨论了同源染色体间的交换、染色体向赤道面排列的机制和次级联会的原因等问题。     

菸草(Nicotiana tabacum L.)离体花粉诱导形成单倍体植株的研究

通过菸草离体花粉的液体培养,诱导花粉粒形成胚状体而后发育成小植株.对花粉离体前在花药中作不同时间预培养的各组试验,作了详细的细胞学观察,并对离体培养中影响花粉粒脱分化的因素进行了讨论。     

水稻白化苗质体的亚显微结构

禾谷类作物在粮食生产中占有特别重要的位置,在由花药培养得到的禾谷类花粉植株中,缺绿苗占了相当大的比例,这就给单倍体育种法在禾谷类作物中应用增加了困难,研究缺绿植株的成因进而控制其发生,是当前禾谷类单倍体育种中急待解决的问题之一,电子显微镜的观察表明,单倍体水稻白化叶片细胞中有前质体存在,这种前质体可以发育出初始片层,从而否定了那种认为白化苗起源于生殖核,因细胞内没有质体而造成白化的看法,但是白化苗的前质体不能发育出正常叶绿体所具有的基粒片层,白化苗质体中DNA状的纤丝是存在的,但没有核糖体,因此质体中缺乏核糖体从而不能进行蛋白质合成是造成白化苗的直接原因。     

烟草(Nicotiana tabacum)原生质体再生成植株及影响植株分化的某些因素

从烟草(品种革新一号)单倍体花粉植株的叶和茎产生的愈伤组织,结合悬浮培养,获得的细胞分离出原生质体。在液体培养基中静置培养,12小时后原生质体开始变为卵圆形,细胞壁明显可见,24小时后完成第一次细胞分裂。以后继续分裂形成浅黄色的愈伤组织,在培养四星期后可达1毫米大小,再放到转床上进行旋转培养18天左右,愈伤组织可达3—4毫米大小。当转移到分化培养基后,分别分化出苗及根,长成完整的植株。 原生质体再生细胞的分裂与分化,不仅受不同器官来源的愈伤组织及其年龄的影响;还受分化培养基的基本成份及所用细胞分裂素的类型等的影响。     

溶癌呤(AT-1438)抗癌作用的研究

溶癌呤是一种抗癌新药,它是一种水溶性的6-巯基嘌呤(6-MP)衍生物,由磺酸钠基取代6-MP中巯基上的氢原子而得。在150毫克/公斤剂量下,腹腔及肌肉给药对大鼠吉田肉瘤的抑制率分别达99％和96％。临床试用于治疗178例各类肿瘤患者的结果表明:对绒毛膜上皮癌和恶性葡萄胎的疗效较好,有效率为80.3％(57/71),其中35.2％肿瘤完全消退;对各类急性白血病均有一定疗效,显效迅速。 脊髓腔给药对滋养叶细胞癌及白血病的脑转移亦有一定疗效;对上颌窦癌和鼻咽癌等头颈部肿瘤亦有效。副反应与6-MP类似,但较6-MP为轻。     

从胚乳培养再生三倍体柑桔植株

为了研究用胚乳培养获得无核水果和通过培养杂种胚乳探索作物育种新领域,我们研究了柑桔胚乳培养的条件。研究结果指出:(1)在MT培养基+2,4-D(2ppm)+BA(5ppm)+CH(1000ppm)上,可将发育到细胞时期的幼胚乳诱导成愈伤组织;(2)在2 MT培养基+GA(2—15ppm)上,胚乳愈伤组织分化出各种发育阶段的胚状体,这些胚状体并能形成根、茎、叶和完整的小植株;(3)根尖染色体计数初步说明胚乳分化的根是三倍体(3n=27)。     

当归提取液对HaCaT细胞凋亡的影响及其机制

目的研究当归提取液在体外诱导人角质形成细胞株HaCaT细胞凋亡的作用及其可能的机制.方法采用MTT法检测不同浓度当归提取液对HaCaT细胞增殖的影响,流式细胞仪FITC-Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况,分光光度法检测细胞内半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)活性的改变情况.结果浓度≥10mg/ml的当归提取液处理后HaCaT细胞增殖受到抑制,早期凋亡率显著增高(均P<0.01),细胞内Caspase-9活性明显增加(P<0.05),均呈浓度依赖性.结论在一定浓度范围内,当归提取液可抑制诱导HaCaT细胞凋亡,Caspase-9活性增加可能是其诱导凋亡的机制之一.     

小黑麦(Triticale)和辣椒(Capsicum annuum)花粉植株的诱导

应用花药培养获得单倍体植株不但具有十分明显的育种学上的实用价值,也具有遗传学、细胞学及胚胎学等生物基础学科的理论研究上的意义。因此当Guha和Maheshwari(1966)首次从毛叶曼陀罗(Datura innoxia)     

水稻原生质体的分离和培养

近年来国内外都在大力开展植物体细胞杂交的研究工作,为创造植物优良品种探索新方法、新途径,以适应生产上不断提高的要求。本工作报道了水稻(Oryza sativa L)体细胞原生质体的制备和培养,为引进外来遗传物质以改变细胞遗传组成及细胞杂交准备条件。用纤维素酶和果胶酶处理由花药离体培养所产生的花粉愈伤组织,可以消化掉细胞壁并获得大量有生活力的原生质体。经过在液体培养基中培养,原生质体增大体积,变为卵圆形并产生了新的细胞壁。培养约10天左右新形成的细胞开始分裂,培养约20天以后,形成了数十个细胞的细胞团。     

人参二醇对鱼藤酮、MPP+诱导的PC12细胞损伤的作用

目的观察人参二醇对鱼藤酮、MPP+诱导的大鼠嗜铬细胞瘤损伤的影响。方法以大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞为研究对象,以鱼藤酮（0.3、1、3、10、30μmol/L）或MPP+（0.1、0.3、1、3mmol/L）诱导细胞损伤。设阴性对照组、人参二醇对照组（10、25、50、75、100mg/L）、鱼藤酮（3μmol/L,24h）或MPP+（1mmol/L,48h）组,人参二醇（10、25、50、75、100mg/L）联合鱼藤酮（3滋mol/L）或MPP+（1mmol/L）组。采用MTT法检测细胞增殖活性;PI和Hoechst 33342染色检测细胞坏死和凋亡;并以免疫组织化学测定细胞酪氨酸羟化酶（TH）的表达。结果人参二醇（10、25、50、75、100mg/L）本身不会抑制PC12细胞增殖,其中50、75mg/L人参二醇还可促进细胞增殖;各浓度人参二醇对鱼藤酮诱导的细胞损伤均不具有保护作用;在MPP+处理诱导细胞损伤后,50、75mg/L人参二醇可提高细胞增殖活性,但人参二醇对细胞凋亡和坏死及TH的表达无影响。结论人参二醇（50、75mg/L）对MPP+诱导的PC12细胞损伤有保护作用,其作用机制与促进细胞增殖有关;人参二醇对鱼藤酮诱导的细胞损伤无明显保护作用。     

雷公藤内酯醇和缬沙坦对高糖诱导小鼠足细胞活性的影响

目的观察不同浓度高糖对小鼠足细胞活性的抑制作用,以及不同浓度雷公藤内酯醇（TP）和缬沙坦（Val）对高糖抑制后小鼠足细胞活性的影响,探讨高糖对足细胞的损伤作用,以及有效的药物干预浓度范围。方法将培养成熟的小鼠足细胞随机分为对照组（11.1mmol/L葡萄糖）和不同浓度高糖组（16.1、21.1、26.1、31.1、36.1mmol/L）,以上述浓度培养48h后采用CCK-8检测足细胞活性的变化。取活性变化最大的浓度为高糖诱导浓度,在此基础上随机分为不同浓度的TP组（4、8、16、32、64ng/ml）和Val组（2×10-8、2×10-7、2×10-6、2×10-5、2×10-4mol/L）,以上述浓度干预48h后,采用CCK-8检测足细胞活性的变化。结果（1）与对照组相比,除16.1mmol/L高糖组外,其余各高糖组的足细胞活性显著减少,其中以26.1mmol/L葡萄糖组减少最为明显（P＜0.01）。（2）与26.1mmol/L葡萄糖组相比,TP组（除4ng/ml组外）和Val组（除2×10-8mol/L组外）足细胞活性部分恢复,其中以16ng/mlTP组和2×10-5mol/LVal组足细胞活性恢复最为明显（P＜0.01）。结论一定浓度范围的TP和Val可部分恢复受高糖抑制的小鼠足细胞活性。     

大鼠缺血再灌注损伤对心肌超微结构的影响及LXA4的保护作用

目的探讨脂氧素A4(LXA4)对大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)超微结构的保护作用.方法72只SD雄性大鼠随机分成假手术一组(C1组)、假手术二组(C2组)、MIRI一组(I/R1组)、MIRI二组(I/R2组)、MIRI前用药组(LX1组)、MIRI后用药组(LX2组),每组12只.建立大鼠MIRI模型,各组于开胸前取血(T1)、实验结束后取血(T2)测IL-1β、IL-8、cTnI血清浓度;同时测定SOD活性、MDA含量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡率;电镜下观察心肌超微结构的变化.结果 I/R1、LX1与C1组相比,I/R2、LX2与C2组相比,血清IL-1β、IL-8、cTnI浓度(均为T2),SOD、MDA以及凋亡率增高(P<0.05).LX1与I/R1组,LX2与I/R2组相比,血清IL-1β、IL-8、cTnI浓度(均为T2),MDA含量及凋亡率均降低(均P<0.05);SOD活性提高(P<0.05);同时心肌超微结构损伤明显改善,线粒体排列整齐,电子密度增高,肿胀及空泡明显减轻.结论 LXA4通过抑制组织促炎细胞因子、氧自由基损伤,降低细胞凋亡来减轻心肌超微结构的损伤,对大鼠MIRI起明显的保护作用.