大孔球形纤维素固定化单宁的性能表征及其在黄酒中的应用

将单宁酸偶联在大孔球形纤维素载体上,制成一种新功能高分子材料-大孔球形纤维素固定化单宁。使用压汞法进行结构测定,发现其具有良好孔结构,平均孔径70nm,比表面积161.39m2/g,孔容13.53ml/g。流速与压力曲线表明,固定化单宁水力学特性好,可以耐受0.7Mpa的操作压力。化学溶剂浸泡实验表明,固定化单宁具有良好的化学稳定性和不溶性,符合食品用品的国家标准。800ml黄酒通过4ml固定化单宁层析柱处理,酒液清亮透明,保留原酒的香味和口感。蛋白质分离检测仪检测通过固定化单宁柱的酒液,高、中分子量的蛋白质大大减少,其中分子量在1万以上的蛋白质较未处理的酒液减少了65.7%。酒液化学成分分析显示,蛋白质的总量下降了33.4%,而氨基态氮却不变;铁离子含量由7.79×10-8mol/L降低至5.89×10-9mol/L,而且其他成分没有变化,所有指标均达到黄酒的国家标准。高温强化试验和低温贮藏试验表明,经固定化单宁层析柱处理的黄酒具有很好的稳定性。固定化单宁柱经0.1mol/LHCl洗脱再生,可以重复使用多次,而且保持性能稳定。     

钙在体内是如何分布的

钙在人体中是无处不在的,其中99％钙以骨盐（羟磷灰石结晶）形式存在于骨骼和牙齿的釉质中,只有1％左右的钙分布于各种软组织和体液中。据测算,以体质量70kg的成年人为例,其骨骼钙含量为1300g,占钙总量的98．8％;牙齿含钙量约为7g,占钙总量的0．53％;细胞外液钙含量约1g,仅占体内总钙量的0．07％;软组织含钙量约7g,占钙总量的0．53％;血浆中钙含量为0．35g,占体内总钙量的0．02％。     

钙在体内是如何分布的

钙在人体中是无处不在的,其中99％钙以骨盐（羟磷灰石结晶）形式存在于骨骼和牙齿的釉质中,只有1％左右的钙分布于各种软组织和体液中。据测算,以体质量70kg的成年人为例,其骨骼钙含量为1300g,占钙总量的98．8％;牙齿含钙量约为7g,占钙总量的0．53％;细胞外液钙含量约1g,仅占体内总钙量的0．07％;软组织含钙量约7g,占钙总量的0．53％;血浆中钙含量为0．35g,占体内总钙量的0．02％。     

火焰原子吸收光谱法测定汉中石韦中微量元素含量

应用火焰原子吸收光谱法测定了汉中石韦中Fe、Cu、Zn、Mn共4种微量元素的含量。结果表明,汉中石韦中含有丰富的Fe（12．91μg／g）、Cu（32．12μg／g）、Nn（22．45μg／g）、Zn（72．84μg／g）等人体必需的微量元素,精密度不大于3．24％,回收率在93．5～106．2％之间。方法可靠,准确。     

固相萃取-液相色谱／串联质谱法测定黄酒中的甜蜜素

建立了黄酒中甜蜜素残留的固相萃取-液相色谱／串联质谱法（SPE—LC／MS／MS）测定方法。黄酒样品用水稀释后,弱阴离子（WAX）固相萃取小柱净化,氨化甲醇洗脱。采用HypersilGold C18色谱柱（150mm×2．1mm,5μm）,乙腈-0．1％甲酸水溶液为流动相,以电喷雾离子源负离子模式（MRM）定性、定量测定甜蜜素。甜蜜素在10～500μg／L范围内峰面积与质量浓度呈线性关系,相关系数为0．9995。取有代表性的阴性样品进行添加回收试验,在0．5—5．0mg／L范围内,回收率为81．1％-88．2％,相对标准偏差为3．65％～5．21％,方法的定量检测限为0．5mg／L。该方法净化效果好,检测灵敏度高,能同时完成黄酒中甜蜜素的定量和定性分析。     

ICP—MS法测定桐油中的重金属元素

目的建立桐油中重金属元素的电感耦合等离子体质谱（ICP—MS）检测方法。方法采用硝酸、双氧水、高氯酸消解法处理样品,用ICP—MS测定桐油中的12种重金属元素。结果12种重金属元素的检出限在0．0008—0．4746μg／L之间,样品回收率在88．9％-108．0％,方法精密度（RSD）为0．3％-7．8％。结论方法简便、快速、准确,可作为桐油中重金属元素含量检测方法。     

以N-十二烷基二甲基铵基乙酸为增敏剂催化光度法测定锰

基于存在增敏剂N-十二烷基二甲基铵基乙酸（DDMAA）和活化剂氨三乙酸,锰（Ⅱ）催化高碘酸钾氧化萘酚绿B的反应,拟定了测定痕量锰的新催化光度法。本法在两性表面活性剂DDMAA存在下,灵敏度提高10．3倍（Mn~(2+)量为0~6．0μg/L）和5．3倍（Mn~(2+)量为6．0~14μg/L）,相对标准偏差为0．5％,检出限为5．6×10~(-8)g/L,可用于酒样和谷物制品中锰的测定。     

Fe（acac）3-Al（i-Bu）3-α，α＇-联吡啶催化丙烯腈与苯乙烯共聚合

研究了Fe（acac）3-Al（i-Bu）3-α，α＇-联吡啶（acac=乙酰丙酮）催化体系催化丙烯腈（AN）与苯乙烯共聚合，用元素分析和核磁共振研究了共聚物的结构，在单体比为1：1时共聚物中丙烯腈／苯乙烯含量分别为49．3％和50．7％．用凝胶渗透色谱研究了聚合物分子量和分子量分布，共聚物分子量分布较窄．动力学研究表明共聚合反应对单体浓度呈一级关系，表观活化能为57．8kJ／mol．     

阻抑速差催化光度法测定痕量色氨酸和酪氨酸

研究了色氨酸、酪氨酸在硫酸环境中抑制碘对亚砷酸与硫酸铈氧化还原反应的催化作用及动力学条件。在0．001mol／L Ce(SO4)2,0．00125mol／L As2O3,0．013mg／L KI,0．025g／L和0．25g／L NaCl溶液中测定色氨酸和酪氨酸,其线性范围分别为0．0～0．65mg／L,0．0～4．0mg／L和0．0～1．3mg／L。0．10～4．0mg／L,用联立方程分别求出各自含量。用此法对醇溶蛋白质和混合氨基酸溶液中色氨酸和酪氨酸进行测定,混合氨基酸的色氨酸、酪氨酸测量值为0．8037g／L,3．591g/L;蛋白质的色氨酸、酪氨酸测量值为1．8g/kg、3．43g/kg;回收率在88％～109％;色氨酸和酪氨酸的RSD分别为4．8％和5．2％,结果满意。     

离子排斥色谱法测定黄酒中的13种有机酸

建立了离子排斥色谱法（ion-exclusion chromatography,IEC）测定黄酒中有机酸含量的分析方法。使用Waters离子排斥色谱柱（300 mm×7.8 mm,7 μm）,流动相为H₂SO₄溶液（A）与乙腈（B）的混合溶液（体积比为98：2）,线性梯度程序：0~40 min,流动相A的浓度由0.01 mol/L 上升到0.02 mol/L;40~50 min,流动相A的浓度为0.01 mol/L ;流速为0.5 mL/min,柱温50 ℃,进样量10 μL,检测波长210 nm。结果表明,该方法可在30 min内实现草酸、马来酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸、琥珀酸、乳酸、富马酸、乙酸、丙酸、异丁酸和丁酸的完全分离与定量,13种有机酸在0.001~1.000 g/L范围内线性关系良好,回归方程的线性相关系数在0.9997以上。黄酒中13种有机酸的加标回收率为93.4%~103.8%,相对标准偏差为0.1%~1.5%（n=5）。该方法简单快捷、准确、重复性好,可用于黄酒中有机酸的测定。     

超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法直接测定黄酒和葡萄酒中氨基甲酸乙酯

建立了超高效液相色谱-电喷雾串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)直接测定黄酒和葡萄酒中氨基甲酸乙酯含量的方法。黄酒和葡萄酒样品经蒸馏水简单稀释后,过0.22 μm微孔滤膜,直接进行UPLC-MS/MS分析检测。以Waters Acquity UPLCTMBEH C18色谱柱为分析柱,乙腈和0.1%(v/v)乙酸水溶液为流动相,采用电喷雾正离子(ESI+)模式电离,多反应监测(MRM)模式检测,以氨基甲酸丁酯(BC)作为内标进行定量。结果表明: 方法在2～500 μg/L的范围内线性关系良好(相关系数大于0.995),其对黄酒和葡萄酒的检出限为1.7 μg/L,定量限为5.0 μg/L,可达到黄酒和葡萄酒中氨基甲酸乙酯的检测要求。当添加水平为10、20和100 μg/L时,黄酒和葡萄酒中待测组分的回收率为90%～102%,日内精密度(n=6)为0.8%～4.5%,日间精密度(n=6)为1.4%～5.6%。该方法样品处理简单,前处理过程不使用有机溶剂,测定快速、准确,灵敏度高,非常适合黄酒和葡萄酒中氨基甲酸乙酯的快速检测和定量分析。     

Separation range and separation efficiency in high-speed gel filtration on TSK-GEL SW columns

Separation ranges for gel filtration on TSK-GEL SW columns, G2000SW, G3000SW and G4000SW, were measured for globular protein, dextran and polyethylene glycol. It was possible to separate globular proteins of molecular weights from 5000 to 7,000,000, dextrans of molecular weights from 1000 to 500,000 and polyethylene glycols of molecular weights from 500 to 250,000 by using these three columns of different pore sizes. The column having the highest separation efficiency for globular proteins was also determined. The highest separation efficiency for molecular weights of less than 30,000, 30,000–500,000 and greater than 500,000 was exhibited by G2000SW, G3000SW and G4000SW, respectively.     

Characterization of the Fc receptors of the murine leukemia L1210

A glycoprotein extract prepared from the plasma membranes of L1210 cells was passed over columns of Sepharose 4B to which either heat-aggregated human IgG or F(ab')2 fragments has been coupled. The intact IgG column bound 35.7 percent of the applied counts, whereas the F(ab')2 columns bound 2.8 percent. The bound glycoproteins were eluted with citrate buffer (pH 3.2) and analyzed by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. Three peaks with apparent molecular weights of 65,000 45,000, and 28,000 daltons were identified and purified by electroelution from polyacrylamide gels. The isolated proteins were able to bind to the same sub-classes of mouse IgG myeloma proteins as the intact L1210 cells, indicating that these molecules are related to L1210 surface Fc receptors. Amino acid analyses of the 3 proteins were markedly similar suggesting that the observed molecular heterogeneity might be due to carbohydrate differences. Neuraminidase digestion of the isolated proteins resulted in mobility shifts on polyacrylamide gel electrophoresis which were consistent with the interpretation that either the isolated proteins have considerably different sialic acid contents, or that removal of the sialic acid results in disaggregation of an Fc receptor molecule.     

高效液相色谱-串联质谱法结合稳定同位素标记肽段同时测定稻米及其制品中3种过敏蛋白质

基于稳定同位素标记特征肽段和液相色谱-质谱联用仪建立稻米及制品中3种过敏蛋白质的同时定量方法。稻米及制品样品经盐溶液提取,赖氨酰基内切酶(Lys-C)和胰蛋白酶依次水解,C18-SD柱净化后,采用纳升高效液相色谱-线性离子阱-静电场轨道阱(NanoLC-LTQ-Orbitrap)采集和Protein Discovery软件鉴定,NCBI和Uniprot数据库的基本局部搜索比对工具(BLAST)筛选验证,最终获得表征稻米及制品中α-淀粉酶/胰蛋白酶抑制剂类蛋白质(seed allergenic protein RAG2, RAG2)、乙二醛酶Ⅰ活性蛋白(glyoxalase Ⅰ)和α-球蛋白(19 kDa globulin)3种过敏蛋白质的特异性肽段。3个特异性肽段经液相色谱梯度洗脱,在Poroshell色谱柱上实现完全分离,由三重四极杆质谱仪分析。实验通过优化多反应监测(MRM)质谱参数,比较不同溶剂体系、水解酶种类和酶量等酶解条件,结合内标法定量,实现对稻米及制品中3种蛋白质的绝对定量。实验结果表明,当酶解溶剂中含1 g/L十二烷基硫酸钠,采用Lys-C和胰蛋白酶组合消化策略,可有效提高3种蛋白质的酶切效率至65.7%~97.3%。该方法在1~200 nmol/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.9972, 3种蛋白质的检出限和定量限分别为3 mg/kg和10 mg/kg。3种蛋白质在空白稻米制品基质中3个水平下的加标回收率为80.6%~103.7%,日间和日内精密度均小于11.5%。该方法稳定性好,检测灵敏度高,操作简便,在分析各类稻米及制品中3种过敏蛋白质含量具有广泛的应用前景。     

离子色谱-串联质谱法检测酒类产品中10种有机酸

建立了一种离子色谱-串联质谱(IC-MS/MS)测定白酒、黄酒、干红葡萄酒3种酒类样品中10种有机酸含量的方法。白酒样品氮吹后,经去离子水稀释,用IC-MS/MS分析检测;干红葡萄酒样品和黄酒样品,对比不同固相萃取小柱净化能力,最终选择石墨化炭黑固相萃取小柱进行净化,经去离子水稀释,用IC-MS/MS分析检测。选用高容量、强亲水性的Dionex IonPac^TM AS11-HC型阴离子分析柱进行分离,以淋洗液自动发生器在线产生的KOH水溶液为淋洗液,进行梯度淋洗。淋洗液经抑制器抑制后直接进入电喷雾电离串联质谱(ESI-MS/MS),采用负离子模式电离,多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。在该实验条件下:草酸、富马酸、马来酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、奎尼酸和乌头酸在0.05~2 mg/L范围内线性关系良好;琥珀酸在0.05~5 mg/L范围内线性关系良好;乳酸在0.05~10 mg/L范围内线性关系良好(相关系数r²>0.99)。10种有机酸的检出限(S/N=3)在1.0~8.0 μg/L范围内,定量限(S/N=10)在3.5~26.5 μg/L范围内,在3个不同浓度的添加水平下,平均回收率在83.0%~112.1%之间,相对标准偏差≤9.1%,满足检测要求。该方法前处理简单,不使用有机溶剂,不需进行衍生化处理,测定快速、准确,灵敏度高,适用于3种酒类样品中10种有机酸的定量分析,为酒类食品的风味及品质测定提供方法支持。     

High-performance gel filtration of water-soluble samples on polyvinyl alcohol columns

The chromatographic behaviour in aqueous solution of pullulans, polyethylene glycols, peptides and proteins with different molecular weights on newly developed polyvinyl alcohol columns (Asahipak GS column series: GS-310, GS-320, GS-510 and GS-520) has been investigated. Pullulans and polyethylene glycols eluted according to the gel filtration mode, so both series of compounds produced almost equal calibration curves for GS-310 and GS-320 and for GS-510 and GS-520; the exclusion limits on GS-310 and GS-320 and on GS-510 and GS-520 were found to be ca. 40,000 and 300,000, respectively. Peptides and proteins were found to adsorb slightly on the columns. However, the plots of the elution volumes against the logarithm of the molecular weights for many of the substrates tested gave rise to the linear calibration curves. Recovery of several crude proteins was also studied for the columns and high values were obtained (81–100%). The effects of changes in the flow-rate, temperature and concentration of electrolytes added to the eluents, on the retention of all four types of compound are also reported.     

孔石莼质体蓝素的柱色谱纯化及其N-端氨基酸序列的分析测定

通过DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱和Sephadex G-75凝胶过滤柱分离纯化得到了孔石莼(Ulva pertusa)的质体蓝素。其步骤为:将孔石莼样品以0.02 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.2)进行匀浆,然后离心去除沉淀,将上清液用硫酸铵分级盐析获得饱和度为40%~80%的盐析蛋白;通过DEAE-Sepharose 柱色谱,在含有0~1.0 mol/L NaCl 的0.01 mol/L磷酸盐缓冲液线性梯度洗脱下,盐析蛋白有3个主要的洗脱峰,然后在Sephadex G-75凝胶过滤色谱柱中进一步纯化。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）显示,该蛋白质被纯化为单一条带。根据蛋白质电泳迁移率,纯化蛋白质的相对分子质量约为10000。该蛋白质不含糖。纯化的蛋白质经电转移至聚偏二氟乙烯（PVDF）膜后,以Edman降解法进行N-端氨基酸序列测定,前20个氨基酸残基序列为AAIVKLGPDDGSLAFVPSKI。通过对相关蛋白质数据库的检索,发现该序列与3种已报道的海藻的质体蓝素具有较高的序列同源性,其同源性分别为85%,85%和90%。据此,认为孔石莼的质体蓝素已获得纯化,其N-端20个氨基酸残基与已报道的海藻质体蓝素的氨基酸残基有较大的同源性,也存在着一定的变异。     

高效液相色谱法测定血清中头孢噻肟浓度

用固相萃取法处理样品,以扑热息痛为内标物、甲醇－醋酸钠／醋酸缓冲溶液作流动相,采用反相高效液相色谱法测定血清中头孢噻肟的浓度。头孢噻肟和内标物的平均回收率分别为９６．７％和９７．７％,头孢噻肟血清浓度在１０ｍｇ／Ｌ至１５０ｍｇ／Ｌ范围内有良好线性关系,最低检测浓度为２ｍｇ／Ｌ,日内和日间相对标准偏差分别在３．０％和４．１％以内。结果表明方法准确、简便。     

液相色谱测定糙米中烯虫酯残留量

研究了液相色谱测定糙米中烯虫酯残留量的方法。试样用丙酮提取，经活性炭，中性氧化铝层析柱一步净化，用液相色谱测定。线性范围０．２－１０．０ｍｇ／Ｌ，检出限为０．０５ｍｇ／Ｌ，当添加浓度０．５－１０．０ｍｇ／ｋｇ时，回收率为８４．２％－１００．７％之间。用于糙米中烯虫酯残留量检验，结果满意。