固定化谷氨酸脱羧酶柱式反应器测定L—谷氨酸

用羧甲基化的Ｎ,Ｎ’－甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡萄糖（简称ＣＭ－ＣＡＤＢ）凝胶树脂为新型载体,研究了谷氨酸脱羧酶（ＧＤＣ）在ＣＭ－ＣＡＤＢ上的固定化与环境的依赖头等确定了酶固定化最佳条件,研究了固定化ＧＤＣ的性状与底物浓度,ｐＨ温度的依存性,动态响应特性,热稳定性的寿命,求算了米氏常数。将固定化ＧＤＣ酶柱与进样系统具ＣＯ２气敏电极的离子活度分析器－计算机数据采集系统匹配,构成酶反应谷氨酸检测装置     

固定化谷氨酸脱羧酶柱式反应器测定L-谷氨酸

用羧甲基化的N,N’-甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡聚糖(简称CM-CADB)凝胶树脂为新型载体,研究了谷氨酸脱羧酶(GDC)在CM-CADB上的固定化与环境的依赖关系.确定了酶固定化最佳条件,研究了固定化GDC的活性与底物浓度、pH、温度的依存性,动态响应特性,热稳定性和寿命,求算了米氏常数.将固定化GDC酶柱与进样系统具CO_2气敏电极的离子活度分析器-计算机数据采集系统匹配,构成酶反应谷氨酸检测装置,测定了固定化GDC酶柱的能斯特线性响应曲线,线性回归方程为y=43.3x+181.6,r为0.9936.     

谷氨酸脱羧酶在新型羧甲基化交联烯丙基葡聚糖凝胶树脂上的 …

本文首次用合成的羧甲基化的以Ｎ，Ｎ’－甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡聚糖（简称ＣＭ－ＣＡＤＢ）凝胶生化树脂为新型载体，研究了谷氨酸脱羧酸在ＣＭ－ＣＡＤＢ树脂上的固定化与环境的信赖关系。确定了酶固定化最佳条件：缓冲体系为ｐＨ４．４，０．１０ｍｏｌ／Ｌ磷酸氢二钠－０．０５ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸，载体为交联度３５％，交换容量３．０ｍｅｑ／ｇ的ＣＭ－ＣＡＤＢ凝胶树脂，吸附平衡时间４ｈ以上，酶用量为３０．０ｍｇ／ｇ     

谷氨酸脱羧酶在新型羧甲基化交联烯丙基葡聚糖凝胶树脂上的固定化

本文首次用合成的羧甲基化的以N，N’-甲叉双丙烯酰胺交联的烯丙基葡聚糖（简称CM—CADB）凝胶生化树脂为新型载体，研究了谷氨酸脱羧酸在CM—CADB树脂上的固定化与环境的依赖关系。确定了酶固定化最佳条件：缓冲体系为pH4．4，0．10mol／L磷酸氢二钠-0．05mol／L柠檬酸，载体为交联度35％，交换容量3．0meq／g的CM－CADB凝胶树脂，吸附平衡时间4h以上，酶用量为30．0mg／gdryresin，固定化环境温度控制在40℃。从理论上分析了上述结果。     

稻米胚芽谷氨酸脱羧酶的光谱分析

从稻米胚芽中分离纯化得到谷氨酸脱羧酶(GAD),经十二烷基磺酸钠-聚丙烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、体积排阻高效液相色谱测得米胚GAD为双亚基组成,其相对分子质量为78000,亚基分子质量为40000;紫外-可见光谱特征为420nm处的弱吸收峰,这是辅基PLP与米胚GAD主链结合后产生的;荧光光谱主要表现为Tyr残基的荧光特征,脱辅基前后的荧光光谱完全相似;圆二色谱分析表明,在二级结构中,α-螺旋占13.2%,β-折叠占38.3%,是一种高β-折叠蛋白,脱辅基后蛋白质的二级结构的变化不大。     

谷氨酸脱羧酶电极与大肠杆菌膜电极的比较研究

本文研究了分别用谷氨酸脱羧酶和大肠杆菌作为催化L-谷氨酸脱羧的酶材料来制作的生物传感器的响应性能。结果表明这两种电极各具特点。谷氨酸脱羧酶电极对底物L-谷氨酸的校正曲线的线性范围为3.16×10~(-4)mol/L～1.0×10~(-2)mol/L。斜率为46mV,响应时间为6～8min电极寿命仅为5天。而大肠杆菌膜电极线性范围为4.22×10~(-4)mol/L～1.78×10~(-2)mol/L,斜率为48.5mV,响应时间为8～9min,电极寿命达34天。这两种电极对底物L-谷氨酸皆具有专一的选择性,且在磷酸吡哆醛的存在下,活性都有所增加。将电极用于味精中L-谷氨酸钠的测定,获得较满意的结果。     

高效液相色谱法测定发鼠脑谷氨酸脱羧酶活性

应用高效液相色谱－电化学检测技术建立了鼠脑谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ）活性的测定方法。方法快速，灵敏。总分析时间９ｍｉｎ。γ－氨基丁酸的最低柱上检测限为５０ｆｍｏｌ。天内及天间相对标准差分别小于４．３％和９．８％。测得ＧＡＤ最大催化速度为０．７２３ｎｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇ蛋白。讨论了最佳衍生化ｐＨ及色谱条件。     

稀土元素在谷氨酸发酵中的应用研究

研究了在谷氨酸(Glutamicacid,Glu)发酵的不同时期加入不同量或不同形态的稀土元素对产酸的影响。结果表明,在发酵0h加入以饱和柠檬酸溶液溶解的La2(CO3)3到发酵培养基中并使之含量达到1mg·L-1时,对谷氨酸发酵产酸有明显的促进作用,平均产酸和空白相比,提高了10.7g·L-1,同比增长10.06%;平均糖酸转化率提高了5.51%,同比增长10.57%。     

多酚氧化酶在聚乙烯醇接枝谷氨酸树脂Cu(Ⅱ)配合物上的固定化

研究了固定化酶载体－聚乙烯醇接枝谷氨酸枝脂的合成及树脂络合金属铜离子后对多酚氧化酶的固定化。用红外光谱表征了树脂的结构,用DTA测定了树脂的热行为。考察了固定化酶的特性。结果表明,该树脂与Cu^2 配位后的高分子配合物能较好地对多酚氧化酶固定化,此固定化酶最适pH值为5．59和6．64,能重复多次使用,经5次使用后其活力仍保留20％。固定化酶的热稳定性比游离酶高,而米氏常数基本相同。     

RAPID DETERMINA TION OF L—GLUTAMIC ACID WITH AN ENZYME REACTOR OFL—GLUTAMIC DECARBOXYLASE IMMOBILIZED ON ION EXCHANGE RESIN

The preparation and characterization of an immobilized L-glutamic decarboxylase(GDC) were studied.This work is to develop a sensitive method for the determination of L-glutamate using a new biosensor,which consists of an enzyme column reactor of GDC immobilized on a novel ion exchange resin(carboxymethyl-copolymer of allyl dextran and N.N‘-methylene-bisacrylamide CM-CADB) and ion analyzer coupled with a CO2 electrode.The conditions for the enzyme immobilization were optimized by the parameters:buffer composition and concentration,adsorption equilibration time,amount of enzyme,temperature,ionic strength and pH.The properties of the immobilized enzyme on CM-CADB were studied by investigating the initial ate of the enzyme reaction,the effect of various parameters on the immobilized GDC activity and its stability.An immobilized GDC enzyme column reactor matched with a flow injection system-ion analyzer coupled with CO2 electrode-data collection system made up the original form of the apparatus of biosensor for determining of L-glutamate acid.The limit of detection is 1.0×10^-5M.The linearity response is in the range of 5×10^-2-5×10^-5M.The equation of linear regression of the calibration curve is y=43.3x+181.6(y is the milli-volt of electrical potential response,x is the logarithm of the concentration of the substrate of L-glutamate acid).The correlation coefficient equals 0.99.The coefficient of varioation equals 2.7%.     

RAPID DETERMINATION OF L-GLUTAMIC ACID WITH AN ENZYME REACTOR OF L-GLUTAMIC DECARBOXYLASE IMMOBILIZED ON ION EXCHANGE RESIN

1. INTRODUCTION L-Glutamate is present in many physiological fluids and pays an important role in amino acid biosynthesis and metabolism. Usually, the determination of L-Glutamate acid is based on a chromatographic technique [1], but the method is unsuitable for the rapid analysis of large numbers of samples. The applications of immobilized enzymes in analytical chemistry have been stimulated because of their well-known advantages [2~8]. The key problem of their applications is the immob…     

固定化木瓜蛋白酶的制备和性质研究

多孔硅球固定化木瓜蛋白酶具有热增活性 .本文在前文研究的基础上 ,用载体交联法制备了甲壳胺固定化木瓜蛋白酶和纤维素固定化木瓜蛋白酶 .考察了固定化pH值、戊二醛浓度和给酶量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响 .研究了固定化木瓜蛋白酶的性质 ,特别是热稳定性和耐热性 ,并与溶液酶和多孔硅球固定化木瓜蛋白酶进行了比较 .所制得的甲壳胺固定化木瓜蛋白酶和纤维素固定化木瓜蛋白酶的最适反应温度均达到了 80℃ ;90℃温育 1h后固定化酶的活力保持在 95 %以上 ;70℃温育处理 5h和 6h后固定化酶的活力也仍能保持在 90 %以上 .固定化木瓜蛋白酶的热稳定性和耐热性得到了显著提高     

三乙醇胺交联聚硅氧烷树脂对羧酸吸附性能研究

本文研究了甲酸、乙酸、丙酸和戊酸在三乙醇胺交联聚硅氧烷树脂上的吸附行为。通过其吸附速度、吸附等温线的研究,得出甲酸和乙酸在该树脂上以单分子吸附为主,丙酸和戊酸以多分子吸附为主,而且吸附的强弱与羧酸的解离有关,解离越强吸附越弱,反之,吸附越强。     

TPPS4浸渍树脂对镉吸附性能的研究

本文用ｍｅｓｏ－四（４－碳酸苯基）卟啉处理１３００－Ⅱ型大孔吸附树脂制得县有相应卟啉基团的浸渍树脂（ＴＰＰＳ４浸渍树脂），并用静态法求得ＴＰＰＳ４浸渍树脂吸附镉的最佳ｐＨ，平衡速率、吸附容量、吸附物组成及热力学函数等．     

离子交换树脂催化对羟基苯甲酸酯化反应的研究*

本文研究了一种固体酸催化剂一阳离子交换树脂催化剂,用于对羟基苯甲酸的酯化反应。通过对不同树脂进行筛选,发现ＪＫ００８的催化活性比较高。本文还进一步考察了ＪＫ００８催化剂的使用寿命,研究了合成对羟基苯甲酸乙酯的最佳反应条件。     

柠檬酸在D354树脂上的离子交换研究

研究了大孔型弱碱性阴离子交换树脂Ｄ３５４分离水中柠檬酸的相平衡和动力学。Ｌａｎｇｍｕｉｒ方程能够良好地关联等温线。建立了离子交换过程的孔扩散模型，并以正交配置法与Ｇｅａｒ法结合进行数据拟合。结果表明，液膜阻力对交换过程具有重大影响，简单线性推动力模型能够很好地描述液膜传质过程。     

酚醛型吸附树脂对VB_(12)的吸附性能研究

研究了酚醛型吸附树脂JDW 1、JDW 2 (自制 )和DuoliteS 76 1对VB12 的静态和动态吸附 .结果表明 ,JDW 1对VB12 的吸附量达 84mg g ,明显优于DuoliteS 76 1;吸附VB12 的初始阶段 ,即达到 4 3%～6 9%平衡吸附时 ,吸附速率数据和半经验速率方程很吻合 ;酚醛型吸附树脂等温吸附VB12 的平衡吸附数据符合Langmuir方程 ,相关系数在 0 99以上 ,因此 ,酚醛型吸附树脂吸附VB12 属单分子层吸附 ;在动态条件下 ,用含甲醇 80 %溶液以 1 1BV h来洗脱吸附VB12 的JDW 2 ,在 4 2、6 4个床体积的洗脱率分别是 92 2 0 %、95 93% ,这表明酚醛型吸附树脂具有良好的洗脱性能 ,用含甲醇为 80 %溶液作洗脱剂从JDW 2洗脱VB12 ,效果很好