金黄色葡萄球菌快速检测技术的研究进展

金黄色葡萄球菌是食品、医院内感染以及化妆品领域重要致病菌之一,建立和发展快速检测方法对于预防和控制该菌引起的疾病具有重要意义.对金黄色葡萄球菌的生物学特性、流行病学特征进行了简单介绍,并重点综述了近些年建立的常用金黄色葡萄球菌快速检测方法,分析比较了各检测方法的优缺点.     

鸡葡萄球菌病的防治

鸡葡萄球菌病是鸡的急性败血性传染病,在临床上主要表现为急性败血症、皮肤坏死、脐炎、滑膜炎、关节炎等。二月龄以下的雏鸡死亡率较高,多为急性败血症的症状,成年鸡发病的较少,又大多表现为慢性。     

兔葡萄球菌病的诊断和药敏试验

目的对家兔发病死亡的原因进行诊断。方法对病死家兔进行剖检观察,并进行细菌分离培养与生化鉴定、PCR检测和药敏试验。结果通过对病死家兔进行剖检观察、细菌分离培养、生化鉴定、血清学试验、PCR检测和药敏试验,确诊病死家兔是金黄色葡萄球菌感染引起的细菌性疾病。药敏试验结果表明,分离菌株对青霉素、氨苄西林、万古霉素等抗生素敏感,而对头孢他啶、呋喃妥因已产生耐药性。结论为金黄色葡萄球菌病原鉴定与疾病诊断提供了科学依据。     

微量元素硒对金黄色葡萄球菌的抑制作用

目的：观察5种浓度的亚硒酸钠对金黄色葡萄球菌的抑制作用。方法：采用Kirby－Bauer纸片扩散法。结果：5种浓度的亚硒酸钠的抑菌环直径分别为10.2mm、12mm、13.8mm、15.6mm、16.8mm,青霉素和红霉素的抑菌环直径则各为7．2mm、9．4mm。结论：硒对金黄色葡萄球菌的抑制作用要强于青、红霉素（P＜0.001）,并与浓度呈正相关。     

276例临床分离金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的 分析住院患者金黄色葡萄球菌的耐药特点,为临床合理用药提供依据.方法 细菌鉴定应用VITEK32全自动微生物分析鉴定系统,采用K-B法对临床分离的金黄色葡萄球菌菌株进行药物敏感性试验;头孢西丁和苯唑西林纸片扩散法检测MRSA.结果 276株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA) 165株占59.8％;金黄色葡萄球菌(MSSA) 111株,占40.2％.MRSA对青霉素G、氨苄西林100％耐药;对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁100％敏感;对氯霉素、呋喃妥因、利福平耐药率分别为9.1％、15.2％、17％;其他耐药率都在60％以上.MRSA的耐药率明显高于MSSA,且呈逐年上升趋势.结论 金黄色葡萄球菌对多种抗菌药均具有较高的耐药性,临床应根据药敏结果确定患者的治疗方案.糖肽类抗生素(万古霉素、替考拉宁)可作为MRSA重症感染患者的首选药物.     

PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素D基因

根据金黄色葡萄球菌肠毒素Ｄ基因的序列,设计相应的引物,建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素Ｄ基因的ＰＣＲ技术。利用该方法可从含有肠毒素Ｄ基因的金黄色葡萄球菌中扩增出ＰＣＲ产物。扩增产物具有特异性,长为３１６个碱基对。经限制性核酸内切酶ＨｈＩⅠ酶切证实扩增产物为ＳＥＤ基因片段。     

142株金黄色葡萄球菌的分布及耐药性分析

了解酒泉市第二人民医院金黄色葡萄球菌的分布及耐药性,为临床合理使用抗菌药物治疗感染性疾病提供实验依据。对酒泉市第二人民医院2014年1月1日至2016年12月31日的门诊及住院患者中分离的142株金黄色葡萄球菌的分布及耐药性情况进行回顾性分析和总结。142株金黄色葡萄球菌中,来自脓液的占42.3%,居首位,其余依次为伤口分泌物39.4%,痰液11.3%,咽拭子4.2%,尿液2.8%。MRSA的检出率为23.9%,低于CHINET耐药监测网。对青霉素的耐药率高达97.2%,对克林霉素,红霉素的耐药率较高,分别为63.4%和70%。未检出对万古霉素耐药或中介的金黄色葡萄球菌。本院金黄色葡萄球菌对多种药物产生了不同程度的耐药性,虽然MRSA的检出率低于CHINET耐药监测网,但耐药趋势应引起重视。     

520株金黄色葡萄球菌的耐药性变迁与分析

采用K—B法进行药敏实验并用琼脂扩散法对苯唑西林耐药的菌株做耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)测定,对2000-2004年韶关市铁路医院临床检出的520株金黄色葡萄球菌进行耐药性变迁情况的分析.结果表明:测定菌株对β-内酰胺类和氟喹诺酮类抗菌药的耐药性总体上呈逐年上升趋势,对氨基糖苷类则有下降趋势,对苯唑西林耐药率逐年增高,出现耐万古霉素的菌株,提示临床医生在治疗金黄色葡萄球菌引起的感染中,应根据不同感染情况参考耐药性监测选用适宜的抗菌药.     

大肠杆菌S12无细胞系统合成AgrA蛋白的研究

利用无细胞合成方法，对AgrA蛋白进行了生物体系外合成，且研究了不同反应温度和时间对蛋白合成的影响。结果表明，AgrA蛋白在无细胞系统中成功被合成，且30℃、4h条件下蛋白合成效果较好。     

金黄色葡萄球菌细胞内生物大分子含量变化的光镊拉曼光谱研究

【目的】利用光镊拉曼光谱技术(Laser Tweezers Raman Spectroscopy,LTRS)研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)细胞内主要生物大分子含量的动态变化,探寻监测微生物代谢状态变化的有效工具。【方法】收集分批培养过程不同时间点金黄色葡萄球菌细胞的拉曼光谱,观察其特征峰依赖时间的变化特点。【结果】归属于核酸的特征峰,如667cm~(-1)峰,724cm~(-1)峰,781cm~(-1)峰,809cm~(-1)峰和1 574cm~(-1)峰在整个分批生长阶段持续降低,在对数生长期下降幅度尤其剧烈,反映了对数生长期细胞分裂快速,DNA复制活跃;与蛋白质相关的特征峰,如850cm~(-1)峰,1 001cm~(-1)峰和1 662cm~(-1)峰,在对数生长期显著增强,而到稳定期峰强度基本维持恒定。【结论】光镊拉曼光谱技术能实时监测生物样品内生物大分子的含量,是单细胞水平上研究微生物代谢状态变化的有效工具。     

金黄色葡萄球菌调控基因agr及sae对其耐热核酸酶分泌的影响

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是一种重要的人畜共患病病原,它能产生一种由nuc基因编码的胞外耐热核酸酶。耐热核酸酶是金黄色葡萄球菌的毒力因子之一,agr及sae位点是编码金黄色葡萄球菌的主要毒力调节因子,研究发现sae调节位点在影响耐热核酸酶的表达上占主导地位。分析金黄色葡萄球菌各毒力因子和金黄色葡萄球菌现有疫苗,为解决金黄色葡萄球菌的耐药性,寻找更好的防治方法,有必要进行探索性实验寻找一种因素或药物,用来阻抑sae调控因子对耐热核酸酶的分泌过程进行调节,从而为金黄色葡萄球菌的防治研究提供一种新材料。     

一种可作为抗金黄色葡萄球菌感染的新型广谱疫苗--PNSG

金黄色葡萄球菌是医院感染中最常见的病原菌，也是社会上大范围感染的主要病原菌．金黄色葡萄球菌感染可引起心内膜炎、骨髓炎、脓毒性关节炎、肺炎和脓肿等疾病．金黄色葡萄球菌也是重要经济动物的主要病原菌．金黄色葡萄球菌对青霉素这样的首选药物产生抗药性后引起的主要问题是，用甲氧西林治疗甲氧西林抗性的金黄色葡萄球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓ．Ａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）引起的感染无效，这就使金黄色葡萄球菌引起的疾病越来越流行，尤其是在住院的病人中．人们更为忧虑的是，最近在几个国家中，ＭＲＳＡ…     

针对不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株的agr Ⅰ-Ⅳ分型初探

目的:金黄色葡萄球菌附属基因调节子(agr)位点是一个全面的群集感应系统并且控制着毒力因子的产生,本研究旨在针对不同来源的金黄色葡萄球菌分离菌株进行agr Ⅰ-Ⅳ基因分型研究.方法:根据金黄色葡萄球菌agrⅠ-Ⅳ基因组别类型的引物,对五种不同来源的169株金黄色葡萄球菌DNA模板进行多重PCR扩增,获得目的基因,以判断agr基因型.结果:169株分离菌株中,agrⅡ型的检出率为19%(32/169),agrⅢ型检出率为12%(20/169),agrⅣ型检出率为8%(14/169),五种不同来源的金黄色葡萄球菌均有检出agrⅡ型,均未检出agrⅠ型,并且都含有未能分型的agr阴性菌株.研究结果表明不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株中agr Ⅰ-Ⅳ基因型的流行情况.该方法对于金黄色葡萄球菌菌株分子分型有一定的借鉴意义,也为金黄色葡萄球菌菌株分子流行病学调查奠定一定的基础.     

针对不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株的agr I-IV分型初探

目的: 金黄色葡萄球菌附属基因调节子(agr)位点是一个全面的群集感应系统并且控制着毒力因子的产生, 本研究旨在针对不同来源的金黄色葡萄球菌分离菌株进行agr I-IV基因分型研究. 方法: 根据金黄色葡萄球菌agrI-IV基因组别类型的引物, 对五种不同来源的169株金黄色葡萄球菌DNA模板进行多重PCR扩增, 获得目的基因, 以判断agr基因型. 结果:169株分离菌株中, agrⅡ型的检出率为19%(32/169), agrⅢ型检出率为12%(20/169), agrⅣ型检出率为8%(14/169), 五种不同来源的金黄色葡萄球菌均有检出agrⅡ型, 均未检出agrⅠ型, 并且都含有未能分型的agr阴性菌株. 研究结果表明不同来源金黄色葡萄球菌分离菌株中agr I-IV基因型的流行情况, 该方法对于金黄色葡萄球菌菌株分子分型有一定的借鉴意义, 也为金黄色葡萄球菌菌株分子流行病学调查奠定一定的基础.     

SD大鼠的剖腹净化

1994年从日本引进的SD大鼠种群 ,本身携带有金黄色葡萄球菌 ,不符合我国SPF动物的等级要求 ,为使之符合我国三级动物的要求 ,通过剖腹产手术进行净化 ,并用SPFWistar大鼠为保姆代乳。成功剖腹孕鼠 35只 ,选取活仔 115只 (每只母鼠选仔 4— 6只 ) ,经过扩大繁殖 ,目前已为 180只生产母鼠 ,4 0只生产雄鼠的生产群。经过 4年共18次的微生物检测 ,不但去除了金黄色葡萄球菌 ,而且 ,各项微生物检测指标均符合我国SPF大鼠的等级标准。表明剖腹净化是成功的     

金黄色葡萄球菌isdB基因克隆、表达及其抗原性鉴定

为了构建含牛源金黄色葡萄球菌isdB基因的原核表达载体,并确定其在大肠杆菌表达系统中的表达效果,应用PCR方法扩增出osdB基因片段与原核表达载体pQE-30,构建了重组原核表达载体pQE-30-isdB,将该重组载体转化至E.coli XL1-Blue中诱导表达蛋白.经SDS-PAGE和Westem blot鉴定,P...