东方旱麦草胚状体诱导和无性繁殖体系的建立

通过对东方早麦草无菌种子脱分化培养、继代培养、再分化培养的研究．建立了东方早麦草无性快速繁殖体系。结果表明：(1)2，4-D2．0mg／l KT0．2mg／l 肌醇100mg／l的MS培养基能促进东方早麦草幼芽脱分化；(2)2，4-D1．0mg／l KTO．3mg／l 肌醇100mg／l 天冬素150mg／l并以麦芽糖代替蔗糖的MS培养基能促进东方早麦草胚性愈伤组织、胚状体的产生；(3)胚状体在NAA0．1mg／l 大量元素110％的MS培养基上萌发生根．此体系为东方早麦草快速繁殖提供了一条新途径．     

新疆紫草外植体组织培养和植株再生

新疆紫草[Arnebia euchroma (Rovle) Johnston]嫩芽和幼叶切段在含有不同激素组合的琼脂培养基上产生了愈伤组织,其中在MSB+0.4mg/L NAA+0.2mg/L 2.4—D+1.0mg/L KT中愈伤组织诱导率较高,达82.2％.这些愈伤组织经过继代,生长很快。转入分化培养基后,愈伤组织表面产生了很多不定芽和少量胚状体。不定芽经扶壮,诱导生根,生长成完整植株并移栽成活。     

彩色棉再生体系影响因子及抗病基因NP-1转化的研究

选用彩色棉优良品种(棕色)：新彩1号、新彩2号，以下胚轴和子叶作为外植体，确立了5～6日苗龄的彩色棉下胚轴是较好的愈伤组织诱导外植体，不同激素组合及浓度对愈伤组织的诱导有重要作用，2，4—D是愈伤组织诱导中重要的激素，在附加有0．1mol／L2，4—D 0．1mol／LKT的MSB培养基上，诱导形成的愈伤组织质地疏松、生长旺盛，有利于分化为胚性愈伤，比较了不同糖源在愈伤组织诱导中的效应，在蔗糖和葡萄糖为糖源的培养基中，愈伤组织诱导率均为100％，但葡萄糖更有利于愈伤组织的形成和生长，蔗糖的诱导效果次之；麦芽糖和乳糖对愈伤组织的诱导效应不及蔗糖和葡萄糖；甘露醇作为糖源则抑制了愈伤组织的诱导和生长，在胚性愈伤组织的诱导培养中，KNO3加倍和NH4NO3减半的组合利于胚性愈伤组织的发生，在根癌农杆菌介导的抗病基因兔防御素NP—1转化过程中。外植体经农杆菌浸染10min，共培养48h较为合适，在添加头孢霉素500mg／L、卡那霉素50mg／L的培养基中筛选抗性愈伤组织。     

陆地棉体细胞胚胎的发生和遗传转化条件初探

以陆地棉（冀棉20）下胚轴为外植体，在含KT0．3mg／L和2，4－D0．08mg／L的MS培养基上，诱导产生了胚性愈伤组织，继代培养不需要添加激素，胚性愈伤组织即分化为胚状体，并萌发出小芽，胚状体萌发过程与合子胚相似，但出现了一些畸形胚，解剖学方法观察发现，这些畸形胚的维管束系统不明显或形态异常，以农杆菌介导法对冀棉20胚状体及胚性愈伤组织进行了雪花莲凝集素（GNA）基因的遗传转化条件探索，并以GUS基域瞬间进行检测加以证实，得出农杆菌的浓度为O．D600＝0．8时，浸染时间为5min，共培养时间为3d，筛选培养基中卡那霉素浓度为75mg／L，对冀棉20胚状体及胚性愈伤组织转化是较为适合的。     

瓯柑愈伤组织的玻璃化法超低温保存研究

采用玻璃化法对瓯柑愈伤组织进行超低温保存研究.瓯柑愈伤组织在含5%二甲亚砜(DMSO)的MS培养基上预培养5 d,室温下60%PVS2预处理20 min,然后用100%PVS2于0℃处理40 min,投入液氮(LN)保存,24h后在40℃水浴中迅速化冻,再用1.2 mol/L蔗糖培养液洗涤3次.用氯化三苯四氯唑(TTC)法检测,其存活率可达85.62%.冻后的愈伤组织转移到MS+6-BA 0.5 mg/L继代培养基上,在黑暗中培养生长,存活率可达76.32%.分析讨论了瓯柑愈伤组织玻璃化法超低温保存中存在的一些问题及意义,并对其前景进行了展望.     

龙牙百合体细胞胚的诱导及植株再生

以龙牙百合鳞片为外植体，以MS为基本培养，通过添加不同浓度的6-BA，2，4-D，研究了其体细胞胚发生的最佳培养条件，并对体细胞胚的发生过程进行了形态学观察。结果表明：影响龙牙百合体细胞胚发生方式的因素是2，4-D。当2，4-D浓度低于0．5mg／L时，体细胞胚以直接方式发生，起源于鳞片表皮下数层细胞或深层的细胞，依次经过多细胞原胚，球形胚，心形胚，成熟胚等阶段，其形态学发育过程与合子胚相似。当2，4-D浓度适中时，体细胞胚以间接方式发生，起源于愈伤组织内部的胚性细胞团，其形态学发育过程也与合子胚相似；诱导胚性愈伤组织的最适培养基为MS＋0．5mg／L6-BA＋2．0mg／L2，4-D，在分化形成体细胞胚时，需降低或去除2，4-D。     

温泉瓶尔小草离体培养及种质试管保存培养基的筛选

以温泉瓶尔小草新生幼叶为外植体,应用均匀设计法筛选其最适宜的离体培养和种质试管保存各阶段培养基.结果表明,最适合愈伤组织诱导的培养基为WPM＋ZT0.50 mg·L-1＋2,4-D1.90 mg·L-1,诱导率为96.5%;芽苗分化的培养基为WPM＋ZT1.70 mg·L-1＋NAA0.10 mg·L-1,分化率为99.0%;生根培养基为1/4MS＋IAA0.05 mg·L-1＋IBA0.03 mg·L-1,生根率达97.8%以上;试管保存培养基为WPM＋KT1.10 mg·L-1＋根皮苷3.20 mg·L-1,通过24个月的保存,芽苗生长率仅在6.5%以下.试验结果证明,成功建立了温泉瓶尔小草离体培养体系,常温条件下利用延缓生长的方法在试管内保存温泉瓶尔小草种质是可行的.     

基于均匀设计优化深山草莓花瓣离体培养及植株再生体系

应用均匀设计法对深山草莓花瓣诱导愈伤组织和愈伤组织再分化芽苗的主要因子和水平进行了探讨.结果表明,深山草莓花瓣愈伤组织诱导的适宜培养基为LS+TDZ 2.06 mg.L-1+2,4-D 0.60 mg.L-1,诱导率为98%;愈伤组织再分化芽苗的适宜培养基为1/2 LS+TDZ 2.30 mg.L-1+NAA 0.10 mg.L-1+KT1.30 mg.L-1,分化率为96.3%.炼苗移栽后观察植株的形态、花、果及生长等特征,以筛选具有优良性状的株系.     

山荷叶离体培养和种质试管保存技术研究

摘要：以山荷叶新生嫩叶为外植体,基于均匀设计法筛选其最适宜的离体培养和种质试管保存各阶段培养基.结果表明,最适合愈伤组织诱导的培养基为MS+6 BA 1.00 mg·L-1+IBA 0.08 mg·L-1,诱导率为99.7%;愈伤组织再分化培养基为MS+6 BA 2.80 mg·L-1+IBA 0.02 mg·L-1+GA30.90 mg·L-1,分化率为99.5%;生根培养基为1/6MS+IAA 0.02 mg·L-1+IBA 0.04 mg·L-1,生根率达99.2%以上;试管保存培养基为1/4MS+6 BA 0.10 mg·L-1+根皮苷2.50 mg·L-1,通过27个月的保存,芽苗生长率仅在7.9%以下.试验结果证明,成功建立了山荷叶离体培养体系,常温条件下利用延缓生长的方法在试管内保存山荷叶种质是可行的.     

DMSO对籼稻广陆矮4号种子愈伤组织诱导、再分化和过氧化物酶同工酶谱的影响

本文以二甲亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)作为外源因素研究其对培养的植物外植体的影响。 材料与方法 籼稻广陆矮4号(Oryza Satira L.Subsp.Indica CV.Guangluai 4)种子.1.1％DMSO预处理:去壳种子经酒精表面消毒后,浸于1％DMSO水溶液中,在25—30℃振荡培养6,12,24小时,并以不经DMSO溶液浸种的种子为对照。2.诱导培养基:N6,加蔗糖3％,2.4-D3mg/l,KT0.5mg/l,pH5.8。分化培养基:MS,加蔗糖3％,NAA0.5mg/l,KT10mg/l,水解乳蛋白500mg/l,pH5.8。培养条件:25±1℃,光照培养。接种9—10天后,统计愈伤组织诱导率,转入分化培养后15天统计分化率。3.过氧化物酶同工酶凝胶电泳:按照方国伟等的方法进行。     

籼稻幼胚组织培养高频率植株再生及其基因转化的研究

以籼稻品种特青的幼胚作为外植体,研究了激素对愈伤组织诱导及植株再生的影响。ＭＳ＋２,４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ作培养基,愈伤组织诱导率达１００％;愈伤组织在ＭＳ＋ＫＴ３ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上,分化频率为６７．３％,在此基础上利用基因枪转化技术,将外源的ｂａｒ基因导入了水稻基因组,转基因植株表现出对除草剂Ｂａｓｔａ很强的抗性。     

羽衣甘蓝组织培养研究

以羽衣甘蓝的花蕾、花茎和腋芽为外植体,进行组织培养试验.结果表明:花蕾、花茎消毒时间以5~7min为好,腋芽消毒时间以8 min为宜,以腋芽为外植体,以MS基础培养 6-苄基腺嘌呤(BA)2 mg 萘乙酸(NAA)0.2 mg 3%蔗糖进行培养较好,继代培养以MS基础培养 BA 3 mg NAA 0.2 mg 3%蔗糖增殖率最高;在生根阶段,以50%MS(1 L) NAA0.4 mg 1%蔗糖生根效果最好,生根率达94.79%;移栽基质以蛭石最好,羽衣甘蓝组培苗成活率达86.7%,且生长健壮.     

建兰组织培养及根状茎增殖的动力学

以建兰品种小桃红根状茎为外植体,研究植物生长调节剂对根状茎增殖、分化和生根的影响,以及根状茎的增殖对培养基中营养物质消耗的变化规律。结果表明,根状茎增殖的最佳培养基是MS+6-BA 0.5mg·L-1+蔗糖30g·L-1,根状茎生长速度为7.33;根状茎分化的最佳培养基是MS+NAA 0.6mg·L-1+TDZ 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1,分化率为93.10%;生根的最佳培养基是1/2MS+NAA 1.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1+AC 0.05%,生根率为96.3%。根状茎增殖的生长量变化呈S型曲线,与细胞培养不同,各时期界限并不是很明显。培养基中碳源、氮源和磷酸盐的消耗曲线与根状茎的生长曲线基本一致。pH由于根状茎先消耗碱性盐(铵态氮)而下降,后利用硝态氮而上升。更多还原     

新疆甜瓜组培体系的优化及抗病转基因研究

选用新疆优良甜未成熟子叶切块作为外植体，经过组织培养获得再生植株，以MS为基本培养基，取3日龄子叶块外植体，选用MS＋6－BA0－2.5mg/L诱导丛生芽，最高诱导率可达89％，在整个再生体系建立过程中，6－BA的浓度逐渐降低，在生根培养培养基中，附加活性炭和硝酸银有利于极的诱导，在甜瓜高效再生体系基础上，用根癌农杆菌介导法将几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因导入新疆甜瓜中，经卡那霉素的抗性筛选，获得转化的再生根植，用PCR反应，点杂交及SDS－PAGE等手段，进一步研究了再生植株的基因整合与达情况，经PCR扩增反应和琼脂糖电泳检测，在转化植株中扩增出了特异片段，点杂交检测转化植株有阳性反应，SDS－PAGE分析表明，转化植株比对照在35.5KD处有一条明显的蛋白质谱带，其分子量与几丁质酶基因表达产物分子量相符，初步确定该基因在转化植株风得到正常表达。     

太空莲根状茎离体繁殖初代培养条件

以太空莲3号根状茎为实验材料,研究了培养基成分、培养基状态、取材部位和取材时间对其初代培养的影响。研究结果表明:(1)初代培养的最佳培养基为:下层为MS+0.5mg·L-1NAA(单位下同)+0.5GA3+1.56-BA+30.0Vc+0.1%活性碳的固体培养基,上层为3-4mm厚的MS+0.5NAA+0.5GA3+1.56-BA+30.0Vc的液体培养基;(2)顶芽培养明显优于侧芽,侧芽培养多为无效;(3)取材时间在10月-12月外植体处于休眠前期为佳,污染率低,诱导率高。