鼻咽癌组织中p15INK4b和p27KIP1基因甲基化及其相关性研究

目的探讨鼻咽癌组织中p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化状态在鼻咽癌临床早期诊断和治疗中的作用。方法应用甲基化特异性PCR方法对65例鼻咽癌组织（鼻咽癌组）和30例正常鼻咽上皮组织（对照组）中的p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化状态进行检测。结果鼻咽癌组中p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化阳性率分别为26.2%（17/65）和61.5%（40/65），两者总检出率为72.3%（47/65）；而对照组中均未检测到p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化；两组间p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化阳性率的差异具有统计学意义（均P＜0.01）。鼻咽癌组中p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化与其临床分期及病理特征均无明显相关性（均P＞0.05）。同时，p15INK4b基因甲基化和p27KIP1基因甲基化间无明显相关性（r=-0.03，P＞0.05）。结论p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化可能参与鼻咽癌的发生、发展；p15INK4b和p27KIP1基因启动子区甲基化具有一定的肿瘤特异性，有助于鼻咽癌的早期辅助诊断和治疗。     

TFF1在肺癌中的表达及作用研究

目的 研究三叶因子1（TFF1）在肺癌组织及肺癌细胞株中的表达、甲基化状态及其功能。方法 选取98 例非小细胞肺癌患者手术切除的肺癌组织,采用RT-PCR、MSP 检测TFF1 在肺癌组织中的表达与甲基化状态,分析其与患者临床特点的相关性,以及检测肺癌细胞株H23、H1299、L78、H446、H157 及95D 中TFF1 的表达和甲基化状态以及5-aza-2''-deoxycytidine（DAC）处理后细胞株中TFF1 表达的变化。TFF1 转染H23 细胞株,MTT 法及克隆形成实验检测其增殖能力和克隆能力的变化,细胞凋亡实验及Western blot 检测凋亡相关蛋白Caspase3 表达水平。结果 TFF1 在肺癌组织中的甲基化率为56.1%（55/98）。TFF1 甲基化与肺癌患者的TNM 分期和淋巴结转移显著相关（P＜0.001）。TFF1 在H23 和H157 中无表达,在H1299、H446 及95D 中表达较低,在L78 中表达较高。DAC 处理后,细胞株TFF1 表达的变化分别为表达恢复（H23、H157）,表达增强（H1299,H446,95D）和无明显改变（L78）。恢复表达TFF1 后,H23 细胞株的增殖及克隆形成能力明显减弱（P＜0.05）,细胞凋亡率和凋亡相关蛋白Caspase3 活性片段的表达明显增加。结论 TFF1 在肺癌组织中的甲基化状态与肺癌的TNM 分期和转移密切相关。TFF1 在肺癌细胞中的表达受DNA 甲基化的调控。肺癌细胞株H23 中恢复表达TFF1 可以抑制其增殖和克隆能力,促进其凋亡。     

胆囊癌中PTEN基因异常表达及甲基化的研究

目的 探讨胆囊癌的发生、发展及转移与PTEN 基因异常表达及其基因启动子区异常甲基化的关系。方法 选取胆囊癌标本44 例（胆囊癌组）和胆囊炎标本20 例（对照组）,通过免疫组织化学染色、Western-blot、甲基化特异性PCR法分析两组患者胆囊组织中PTEN 基因表达及启动子区甲基化差异。结果 与对照组相比,胆囊癌组中PTEN 基因表达阳性率明显下降（P＜0.01）,而启动子区甲基化阳性率显著增高（P＜0.01）;胆囊癌组中有淋巴结转移者PTEN 基因表达阳性率较无淋巴结转移者降低（P＜0.05）,而启动子区甲基化阳性率增高（P＜0.05）;胆囊癌分期增高,PTEN 基因表达阳性率降低（P＜0.05）,而启动子区甲基化阳性率增高（P＜0.05）。结论 PTEN 基因低表达是胆囊癌的发生、发展及转移的重要原因之一,其低表达与启动子区过度甲基化有关。     

去甲斑蝥素对人胰腺癌PANC-1 细胞凋亡作用的研究

目的 探讨去甲斑蝥素对人胰腺癌PANC-1细胞凋亡的作用及其机制。方法 将PANC-1 细胞株随机分为处理组 和对照组,处理组加入不同浓度的去甲斑蝥素培养24h后,CCK-8 法检测细胞增殖情况;流式细胞术分析细胞的凋亡情况;免疫印迹法检测细胞内质网应激和凋亡相关蛋白的表达;荧光定量PCR 技术检测细胞内质网应激和凋亡相关蛋白mRNA表达。结果 不同浓度去甲斑蝥素处理PANC-1细胞24h后,与对照组相比,能降低细胞的存活率并诱导其凋亡。与对照组相比,处理组中内质网应激和凋亡相关蛋白的表达水平均上调（均P＜0.05）,同时其mRNA 的表达水平亦均上调（均P＜0.05）。结论 去甲斑蝥素能明显抑制人胰腺癌PANC-1 细胞的生长并诱导其凋亡,并且具有浓度依赖性,这一作用可能是通过内质网应激介导的凋亡途径实现的。     

大黄素联合5AzA-cdR对胰腺癌抑癌基因p16、RASSF1A去甲基化作用研究

目的研究大黄素是否可增强5AzA-cdR对胰腺癌Panc1细胞抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用。方法采用细胞增殖实验检测不同浓度大黄素对Panc1细胞的生长抑制情况，焦磷酸盐测序PCR（BSP）分别检测大黄素、5AzA-cdR及大黄素联合5AzA-cdR对Panc1细胞抑癌基因p16、RASSF1A甲基化状态的影响，并用荧光定量PCR（FQ-PCR）和Westernblot分别检测p16、RASSF1A及甲基转移酶DNMT1、DNMT3a在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果大黄素以时间和浓度梯度依赖性抑制Panc1细胞生长。BSP结果显示大黄素具有微弱的去甲基化作用，5AzA-cdR具有一定程度的去甲基化作用，当两者联用时，去甲基化作用更加显著；FQ-PCR和Westernblot结果显示大黄素与5AzA-cdR联用时，p16、RASSF1A的表达水平均较空白对照明显增高（均P＜0.05），DNMT1、DNMT3a的表达水平均较空白对照明显降低（均P＜0.05）。结论大黄素与5AzA-cdR联用可通过降低DNMT1和DNMT3a的表达水平来增强5AzA-cdR对胰腺癌抑癌基因p16、RASSF1A的去甲基化作用。     

鸦胆子素D 对人胰腺癌细胞株 Panc-1体外增殖的抑制作用

目的 探讨鸦胆子素D对人胰腺癌细胞株Panc-1 体外增殖的影响。方法 人胰腺癌细胞株Panc-1经不同浓度 （0、5、10、20、40、60滋mol/L）鸦胆子素D分别作用24、48、72 h 后,应用CCK-8 法检测鸦胆子素D 对Panc-1细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测Panc-1细胞凋亡情况;Western blot 检测Panc-1 细胞经0、5、10、20、30、60滋mol/L 的鸦胆子素D 处理24h 后以及20滋mol/L的鸦胆子素D处理24、48、72 h后,细胞中Bax 及Bcl-2 的表达。结果鸦胆子素D对Panc-1细胞的增殖抑制作用呈明显浓度和时间依赖性,60滋mol/L时对Panc-1作用24、48、72 h后细胞存活率分别为54.44%、33.00%、21.63%,凋亡率分别为47.29%、63.80%、72.16%;0、5、10、20、30、60滋mol/L 的鸦胆子素D 作用于Panc-1 细胞72h 后的细胞存活率是100%、71.60%、60.37%、46.78%、39.98%、21.63%,凋亡率分别为0、26.63%、45.62%、56.18%、62.21%、72.16%;随着鸦胆子素D 作用时间的延长或浓度的增加Bax 蛋白的表达升高,Bcl-2蛋白的表达降低。结论鸦胆子素D 可显著抑制人胰腺癌Panc-1 细胞生长,并促进其凋亡,在一定的浓度和时间范围内,其作用呈明显浓度和时间依赖性,其作用机制可能是通过促进Bax 的表达,降低Bcl-2 的表达 实现的。     

HBsAg 对健康成人外周血单核细胞来源树突状细胞Tim-3信号通路的影响

目的 探讨HBsAg 对健康成人外周血单核细胞来源树突状细胞（MD-DCs）的免疫活性及对T细胞免疫球蛋白黏 蛋白分子3（Tim-3）和下游信号分子核因子-κB（NF-κB）蛋白表达的影响。方法 分离健康成人外周血单核细胞,经GM-CSF、IL-4 联合诱导为树突状细胞（DCs）,流式细胞术检测DCs 表面标志物表达水平。MD-DCs 分4 组添加不同浓度HBsAg（0、1、2、5滋g/ml）,分别设为对照组、+1滋g/ml 组、+2滋g/ml 组、+5滋g/ml 组,Western 印迹法检测Tim-3、NF-κB 信号蛋白表达,细胞增殖与毒性检测试剂检测MD-DCs 刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,ELISA 法检测细胞因子分泌水平。结果 外周血来源单核细胞成功诱导分化为DCs。与对照组相比,+2滋g/ml 及+5滋g/ml 组MD-DCs Tim-3 及NF-κB 表达水平均上调,刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力均增强,炎症因子IL-6、IL-10、IFN-γ 分泌水平均增高（均P＜0.05）,而+1滋g/ml 组较对照组无统计学差异（均P＞0.05）。与其他3 组相比,+5滋g/ml 组MD-DCs Tim-3、NF-κB、炎症因子分泌水平增高,刺激同种异体淋巴细胞增殖能力增强（均P＜ 0.05）。结论 HBsAg 上调MD-DCs Tim-3 及NF-κB表达水平,增强MD-DCs 免疫活性,且刺激作用随HBsAg 浓度的增高而增强。     

CXCR4和VEGF—C在胃癌淋巴结转移中的作用及相关性

目的探讨CXCR4和VEGF—C在胃癌淋巴结转移中的作用及两者的相关性。方法应用免疫组化法及RT—PCR检测CXCR4及VEGF—C在人胃癌组织中的表达水平，并分析其与胃癌淋巴结转移的关系。结果CXCR4及VEGF—C蛋白在癌旁组织中无阳性表达，在胃癌组织中均呈阳性表达。胃癌组织中CXCR4及VEGF—C蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织（P〈005或0．01），且No组织、N、＋N2组织、N3组织中CXCR4及VEGF—C蛋白阳性表达率两两比较差异均有统计学意义（P〈005或001）。不同胃癌组织中CXCR4mRNA及VEGF—CmRNA的表达明显不同，差异均有统计学意义（P〈005或001）。胃癌组织中CXCR4表达与VEGF-C表达呈显著正相关（r=0．355，P〈001）。结论胃癌中CXCR4和VEGF—C的表达呈正相关，两者的协同作用与胃癌患者淋巴结转移密切相关，进一步研究两者的作用机制可能对预测淋巴结转移及判断预后有重要临床价值。     

转化生长因子-β1对大鼠腹膜间皮细胞炎症因子及细胞外基质表达的影响

目的 研究转化生长因子-β1（TGF-β1）对大鼠腹膜间皮细胞炎症因子表达和细胞外基质（ECM）积聚的影响。方法 体外培养SD 大鼠原代腹膜间皮细胞,静止24h 后,采用RT-PCR 检测TGF-β1（10ng/ml）刺激后0、3、6、12、24、48h 单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白介素-6（IL-6）、Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）、纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）mRNA 的表达情况;Western blot 检测TGF-β1（10ng/ml）刺激后0、4、12、24、48h CollagenⅠ和PAI-1 表达情况;ELISA 法检测MCP-1 和IL-6 表达情况。结果 TGF-β1处理6h 后MCP-1、IL-6 和PAI-1mRNA 即开始逐渐升高,与0h 组的差异均有统计学意义（均P＜0.05）,24h 后显著升高（均P＜0.01）;TGF-β1 处理12h 后CollagenⅠmRNA 表达开始明显升高,与0h 比较差异有统计学意义（P＜0.05）,24h 后有显著升高（P＜0.01）;TGF-β1 处理4h 后IL-6 表达水平升高（P＜0.05）,24h 后显著升高（P＜0.01）;处理12h 后MCP-1 和PAI-1 表达水平较0h 明显升高（P＜0.05）,处理24h 后CollagenⅠ表达水平显著升高（P＜0.05）;TGF-β1 显著增加MCP-1、IL-6、CollagenⅠ、PAI-1 及其mRNA 的表达上调。结论 TGF-β1可能通过诱导大鼠腹膜间皮细胞炎症因子上调表达和ECM积聚导致腹膜纤维化。     

上皮细胞黏附分子在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的 探讨上皮细胞黏附分子（EPCAM）在胃癌组织中的表达及其与胃癌浸润转移及预后的关系,以及EPCAM作为胃癌早期诊断、预后判断和治疗靶点的临床价值。方法 应用免疫组织化学法检测436 例胃癌组织及92例癌旁非肿瘤胃黏膜组织中EPCAM 的表达情况,分析并探讨EPCAM 的表达与临床病理参数及预后的关系。结果 在92 例非肿瘤胃黏膜组织中,50例（54.3%）EPCAM 蛋白为阴性表达,42例（45.7%）呈弱阳性表达。在436 例胃癌组织中,EPCAM 蛋白高表达179 例（41.1%）,低表达257 例（58.9%）,主要在细胞包膜表达。EPCAM 蛋白的表达强度与肿瘤部位、肿瘤大小、Lauren 分型、浸润深度、淋巴结分期、TNM 分期、淋巴结转移和远处转移密切相关（均P＜0.01）,而与患者性别、分化程度、组织学类型无关（均P ＞0.05）。EPCAM 高表达患者的5 年生存率（57.2%）明显低于EPCAM 低表达胃癌患者的5 年生存率（17.3%,P＜0.05）。I、II 和III 期EPCAM高表达胃癌患者的5年生存率明显低于EPCAM 低表达患者的5年生存率（P＜0.05）;IV 期EPCAM 高表达和低表达胃癌患者的5年生存率无统计学差异。EPCAM 表达、远处转移和TNM 分期（均P＜0.05）是胃癌的独立预后因素。结论 EPCAM 在胃癌中高表达,且其表达与淋巴结转移、远处转移、肿瘤的TNM 分期显著相关,提示EPCAM 可以作为胃癌的早期诊断的筛查指标以及治疗的靶点之一。     

A REPRESENTATION FORMULA RELATED TO SCHR(O)DINGER OPERATORS

Schr(o)dinger operator is a central subject in the mathematical study of quantum mechanics.Consider the Schrodinger operator H = -△ V on R, where △ = d2/dx2 and the potential function V is real valued. In Fourier analysis, it is well-known that a square integrable function admits an expansion with exponentials as eigenfunctions of -△. A natural conjecture is that an L2 function admits a similar expansion in terms of "eigenfunctions" of H, a perturbation of the Laplacian (see [7], Ch. Ⅺ and the notes), under certain condition on V.     

On a class of self-similar processes with stationary increments in higher order Wiener chaoses

We study a class of self-similar processes with stationary increments belonging to higher order Wiener chaoses which are similar to Hermite processes. We obtain an almost sure wavelet-like expansion of these processes. This allows us to compute the pointwise and local Hölder regularity of sample paths and to analyse their behaviour at infinity. We also provide some results on the Hausdorff dimension of the range and graphs of multidimensional anisotropic self-similar processes with stationary increments defined by multiple Wiener–Itô integrals.     

On a class of Riemann surfaces

It is considered the class of Riemann surfaces with dimT1 = 0, where T1 is a subclass of exact harmonic forms which is one of the factors in the orthogonal decomposition of the spaceΩH of harmonic forms of the surface, namely The surfaces in the class OHD and the class of planar surfaces satisfy dimT1 = 0. A.Pfluger posed the question whether there might exist other surfaces outside those two classes. Here it is shown that in the case of finite genus g, we should look for a surface S with dimT1 = 0 among the surfaces of the form Sg\K , where Sg is a closed surface of genus g and K a compact set of positive harmonic measure with perfect components and very irregular boundary.     

CONTENTS OF VOLUME 30

正~~     

Instructions for contributions

正Applied Mathematics-A Journal of Chinese Universities,Series B(Appl.Math.J.Chinese Univ.,Ser.B)is a comprehensive applied mathematics journal jointly sponsored by Zhejiang University,China Society for Industrial and Applied Mathematics,and Springer-Verlag.It is a quarterly journal with     

Journal of Mathematical Research with Applications Guide for Authors

正Journal overview:Journal of Mathematical Research with Applications(JMRA),formerly Journal of Mathematical Research and Exposition(JMRE)created in 1981,one of the transactions of China Society for Industrial and Applied Mathematics,is a home for original research papers of the highest quality in all areas of mathematics with applications.The target audience comprises:pure and applied mathematicians,graduate students in broad fields of sciences and technology,scientists and engineers interested in mathematics.     

Staircase transportation problems with superadditive rewards and cumulative capacities

A cumulative-capacitated transportation problem is studied. The supply nodes and demand nodes are each chains. Shipments from a supply node to a demand node are possible only if the pair lies in a sublattice, or equivalently, in a staircase disjoint union of rectangles, of the product of the two chains. There are (lattice) superadditive upper bounds on the cumulative flows in all leading subrectangles of each rectangle. It is shown that there is a greatest cumulative flow formed by the natural generalization of the South-West Corner Rule that respects cumulative-flow capacities; it has maximum reward when the rewards are (lattice) superadditive; it is integer if the supplies, demands and capacities are integer; and it can be calculated myopically in linear time. The result is specialized to earlier work of Hoeffding (1940), Fréchet (1951), Lorentz (1953), Hoffman (1963) and Barnes and Hoffman (1985). Applications are given to extreme constrained bivariate distributions, optimal distribution with limited one-way product substitution and, generalizing results of Derman and Klein (1958), optimal sales with age-dependent rewards and capacities.To our friend, Philip Wolfe, with admiration and affection, on the occasion of his 65th birthday.Research was supported respectively by the IBM T.J. Watson and IBM Almaden Research Centers and is a minor revision of the IBM Research Report [6].