骨骼肌兴奋收缩偶联时肌膜下小泡的超微结构变化

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌肌膜下小泡在收缩潜伏期内的时相-形态变化。方法：采用双红外线探测器-计算机控制的电刺激-超低温快速冷冻固定同步技术,对电刺激后的蟾蜍骨骼肌组织作快速冷冻固定,冷冻置换,微波浸透包埋和超薄切片,在透射电镜下观察该骨骼肌细胞在电刺激后0．0ms,4．6ms,24ms的超微结构变化。结果：未加刺激的骨骼肌细胞的肌膜下仅见少量小泡分布;施加刺激4．6ms后肌膜下出现大量小泡,并由3～8个小泡融合成聚合体;24ms后小泡急剧减少,仅残留少量小泡紧靠肌膜下。结论：骨骼肌兴奋．收缩偶联发生时,肌膜下出现大量小泡。     

电刺激—冷冻固定法研究兴奋收缩偶联时骨骼肌的超微结构形态变化

兴奋－收缩偶联时，肌浆网中的钙离子是通过何种途径被刺激而释放的？偶联发生时期形态变化与其功能变化存在着什么的关系？这是细胞生物学、生理学几十年来最感兴趣的研究热点之一。     

骨骼肌兴奋收缩偶联时肌浆网膜Ca2+通道的研究

目的：从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌肌浆网、T-管在收缩潜伏期内超微结构的时相—形态变化。方法：采用双红外线探测器—计算机控制的电刺激—超低温快速冷冻固定同步技术,对电刺激后的蟾蜍骨骼肌组织作快速冷冻固定,采用透射电镜对骨骼肌在电刺激后0．8ms,2ms,4．6ms,10．8ms和18．4ms的超微结构变化进行观察。结果：刺激0．8ms后,肌浆网和T-管未见明显改变。刺激2ms后,SR内出现电子密度较大的物质。刺激4．6ms后,肌浆网膜内外侧可见一一对应的电子密度大的物质。刺激10．8ms后,SR与T-管形态又恢复原状,SR内电子密度大的物质消失。结论：骨骼肌兴奋-收缩偶联发生时,肌浆网的形态发生改变,肌浆网内出现电子密度较大的物质且逐渐向靠近T-管的方向移动。     

骨骼肌兴奋收缩偶联时肌浆网内Ca2+释放的形态-功能变化研究

采用双向红外线探测器－计算机控制的电刺激－超低温快速冷冻固定同步技术,透射电子显微镜,X－射线能量色散谱及Ca^2 细胞化学技术,从超微结构形态学角度,实时研究并获取骨骼肌兴历－收缩偶联时,肌浆网内Ca^2 释放及肌浆网的形态改变。研究表明：1．骨骼肌组织在收缩潜伏期内,肌浆网膜与T－管膜接触。2．在潜伏期（＜10ms)内,肌浆网内的钙离浓度随时间经历的延长而减少。3．骨骼肌组织在收缩潜伏期开始0．8ms时,在T－管外周围（纳米处）,有Ca2 分 ,丰,可以认为骨骼肌兴奋收缩偶联时,T－管外存在Ca^2 结合位点。     

骨骼肌在兴奋收缩偶联潜伏期内毫秒级功能变化时的形态研究

骨骼肌在兴奋收缩偶联潜伏期内毫秒级功能变化时的形态研究杨勇骥郑尊邵晓良夏金辉余宏宇姜永良宋田斌吴越（第二军医大学基础部生物物理研究所，上海２００４３３）采用双向红外线探测器—计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术对骨骼肌组织电刺激后，在潜伏期...     

骨骼肌收缩潜伏期内肌浆网结构的毫秒级变化研究

采用低温冷冻技术、计算机控制的毫秒级实时处理技术对潜伏期内骨骼肌结构变化时进行固定 ,以观察骨骼肌肌浆网、Ｔ 管在收缩潜伏期内超微结构的时相—形态变化。该项研究为最终解决骨骼肌兴奋收缩偶联发生时 ,其肌浆网内Ｃａ2 + 的释放机制问题 ,提供形态学上的证明。材料与方法从蟾蜍大腿部分离出长约 1 5ｃｍ ,宽约 2ｍｍ腓肠肌组织。将取下的肌组织放入任氏液中静息约10ｍｉｎ ,待其松弛 (静息时间不能超过 4 0ｍｉｎ ,否则收缩功能减弱 )。将银丝微电极仔细的插入静息后的骨骼肌两端 ,然后小心的将其放在经过我们改装后的Ｒｅｉｃｈｅ…     

骨骼肌兴奋收缩偶联时钙诱导钙释放机理的研究

近年来 ,国外学者由生理学实验发现 ,在骨骼肌兴奋 -收缩偶联过程中 ,不仅存在 DCT假说 ,还存在钙诱导钙释放 ( Calcium Induced Calcium Release,简称 CICR)假说 (该假说一般用于解释心肌兴奋 -收缩偶联时 ,肌浆网内的 Ca2 + 释放机理 )。但因肌组织 (包括骨骼肌与心肌 )兴奋 -收缩偶联发生时的变化时间极快 ,达到毫秒级水平 ,因此目前常规化学固定 (固定时间以分钟计 )制样法无法保留肌组织兴奋 -收缩偶联发生瞬间时的超微结构形态及离子 (包括 Ca2 + ,Na+ ,K+ 等 )浓度的变化。我们采用双向红外线探测器 -计算机控制的电刺激与超低…     

骨骼肌肌纤维中的Ca^2＋ sparks现象研究

钙火花（即Ca^2＋ sparks）是肌兴奋-收缩偶联关键性假说-Ca^2＋诱导Ca^2＋释放（CICR）局部控制理论的基础，是肌兴奋-收缩偶联的基本单位。钙火花是肌浆网（sarcoplasmic reticulum，SR）膜上钙释放通道（RyRs）自发开放或由T管膜上单个L-型钙通道（DHPr）开放触发引起的局部钙释放现象。虽然对“钙火花”的研究已有近10年，但目前确切的发生机制还不清楚。我们利用激光扫描共聚焦显微镜对经Flou-3 AM染色的人工剥离的蟾蜍骨骼肌肌纤维进行连续扫描分析，在骨骼肌肌纤维中捕获钙火花现象。