猪伪狂犬病病毒抗体检测的研究进展

伪狂犬病(PR)又名Aujeszky病,是OIE规定的通报疫病,由疱疹病毒引起的严重传染病,具有传播速度快、传播途径多和流行范围广等特点,成为仅次于口蹄疫和猪瘟的主要疫病之一。一些猪场伪狂犬病发病和流行比较严重,而且还有逐渐扩大的趋势,给养猪行业带来了巨大的挑战和经济损失。因此掌握伪狂犬病病毒的临床诊断和防控措施很有必要。本文则对猪伪狂犬病病毒的抗体检测进行了阐述,希望对猪伪狂犬病的诊断有所帮助。     

伪狂犬病病毒主要毒力基因缺失后的免疫原性研究

本试验研究伪狂犬病病毒（PRV）基因缺失疫苗株D1、D2和D3的免疫原性．对4周龄仔猪按不同剂量分别肌注接种D1、D2、D3后,于7、14d后采血：14d后用10^7pFU强毒株PRVFa滴鼻攻毒所有试验猪,攻毒7d后检查PRV在猪体内器官的分布．基因缺失毒株接种后试验组仔猪体温略有升高,接种部位未发生炎性反应,不向外散毒．PRVFa攻毒后试验组的仔猪体温稍有升高但不超过40℃,对照接毒组连续4d均超过40℃、有1头出现明显神经症状并死亡．强毒攻毒后,各剂量免疫组散毒均为2～3d,而对照组、同居猪散毒均为5d．对照组10个器官组织（大脑、小脑、三叉神经、心、肺、肝、肾、淋巴结、脾和扁桃体）均检测出PRV;D1组除大脑、小脑、肺脏外均检测出PRV;D2、D3组除大脑、小脑外,其它均检出PRV．免疫组的保护率均为100％,对照组为75％．试验结果表明D1、D2和D3能对接种猪提供充分的保护;攻毒后疫苗接种猪都向外排毒,但散毒天数均远低于对照组且未从同居感染猪中分离出病毒;D1、D2和D3是具有高度免疫原性且接种安全的基因缺失疫苗株．     

新疆分离株伪狂犬病病毒的致病机理研究

采用从本地发病猪采集的伪狂犬病病毒组织对家兔进行了人工感染,每天观察感染家兔临床表现。20h后每隔一段时间处死1只兔子,取其扁桃体、淋巴结、肝脏、肾脏、脾脏、脑等组织制成石蜡切片。用免疫酶组织化学染色法检测病毒在组织中分布情况。结果表明：病毒首先在扁桃体内出现,淋巴结次之;40h后病毒分布于全身各组织脏器中,尤其在淋巴结、心脏、肾脏、肝脏中病毒大量存在。     

PCR法检测小鼠自身携带的细小病毒

小鼠是 2种细小病毒ＭＰＶ和ＭＶＭ的终宿生。它们均可感染淋巴细胞 ,抑制体内肿瘤形成 ,污染细胞培养。由于细小病毒感染会干扰研究结果 ,因此确定小鼠感染ＭＰＶ还是ＭＶＭ是很重要的。本研究的目的是建立检测排泄物中病毒的ＰＣＲ方法 ,在血清抗体产生之前能够活体检测出ＭＶＭ和ＭＰＶ。排泄物中ＤＮＡ的提取最好用商品化的过柱方法 ,通过增加洗涤步骤帮助去除排泄物中的抑制物。为了提高敏感性 ,比较了4 5个循环扩增排泄物ＰＣＲ和只有 35个循环的组织ＰＣＲ。通过检测 37只来自同一群自然感染ＭＶＭ和ＭＰＶ成年Ｓｅｎｃａｒ小鼠的粪…     

猪伪狂犬病病原与疫苗的研究现状及防治思路

从形态、理化特性、培养、分子生物学等方面对伪狂犬病病原进行了研究，介绍了伪狂犬病疫苗研究的现状，提出了伪狂犬病的预防与控制措施。     

PCR检测试剂诊断对虾白点病毒

对虾白点病(whitespotdisease,WSSV)目前急需准确、快速的病毒诊断技术．PCR诊断方法是目前已知的最佳选择．但PCR技术在使用上存在着某些问题,例如专一性、灵敏度、假阳性、假阴性及定量等,是选择PCR做为病毒诊断试剂时,必须慎重考虑的问题．市面上已有商品化的虾白点病毒诊断试剂供养殖者选用．IQ2000系统采用已经过证实的白点病毒核酸序列作为PCR的反映标的,具专一性强、灵敏度高、可同时进行定性及定量检测、包含了内控制组及阳性标准品、可有效地排除假阴性及假阳性的问题等特点,无论在学术研究及实际养殖上都可证明其功效．以IQ2000为基础所发展出来的虾白点病毒安全指标,可提供养殖户作为虾白点病毒防治的参考依据．     

浅谈临沧猪伪狂犬病的防治

近几年来,临沧市部分地方零星散发猪伪狂犬病疫情,给养猪业带来了严重经济损失,笔者通过近几年对该病的病原学监测发现,该病的隐性感染率较高,随着季节和环境的变化,容易造成该病的流行,给临沧养猪业的健康发展带来极大隐患。     

B病毒PCR检测方法的建立

目的建立B病毒核酸的PCR检测方法。方法设计引物,用PCR方法扩增B病毒,并验证其灵敏性和特异性。结果引物P1、P2及P3、P4在以B病毒为模板时有特定大小的目的片段出现,在以其他病毒为模板时无目的片段出现;引物P5、P6以B病毒和人单纯疱疹病毒I型(HSVI)为模板能扩增出382bp的产物,经SacⅡ酶切后,B病毒产生176bp和206bp的两个片段,HSVI无变化。结论通过PCR方法成功的区分开B病毒,并且鉴定区分了B病毒和HSVI。     

PCR检测白血病患者外周血中EB病毒的DNA

目的：了解白血病患者ＥＢ病毒感染情况。方法：收集２１例急性淋巴细胞白血病、１例慢性淋巴细胞白血病、１５例急性粒细胞白血病、８例慢性粒细胞白血病患者及３２例正常对照组的外周血,分离单个核细胞,提取ＤＮＡ,应用ＰＣＲ方法检测ＥＢ病毒ＤＮＡ。结果：在１例初诊慢性粒细胞白血病病人样本中发现ＥＢ病毒阳性,余均为阴性。结论：白血病患者存在ＥＢ病毒感染情况,但并不普遍。     

猪伪狂犬病的诊断和控制

对广东某集约化猪场1993年10月流行的以母猪流产死胎和2周龄内仔猪以神经症状为主要表现的疫病进行诊断,经流行病学调查、临床诊断、动物试验和中和试验等方法确诊为伪狂犬病,应用哈尔滨兽医研究所生产的猪伪狂犬病弱毒疫苗作紧急免疫接种,2周内控制疫情.     

实时荧光反转录PCR检测呼吸道合胞病毒

目的 建立快速、准确、特异的实时荧光反转录PCR方法检测呼吸道合胞病毒(RSV).方法 根据RSV基因序列设计引物和探针并优化实时荧光反转录PCR反应体系,对686例临床标本进行检测,阳性结果测序验证.结果 本实验所建立实时荧光反转录PCR方法可准确、特异地检测RSV;686名呼吸道感染患儿中RSV感染达到16.5%(113/686).结论 本研究建立的RSV实时荧光反转录PCR方法快速、准确,结果可靠,可用于儿童RSV感染的临床诊断.     

伪狂犬病毒表达载体的构建

利用伪狂犬病毒湖北地方株胸腺核苷激酶基因和ｇＧ糖蛋白基因启动子，构建了ＰＲＶ基因转移载体。通过β－半乳糖苷酶基因确定了ＰｇＧ控制下外源基因的表达并筛选出表达β－半乳糖苷酶的ＰＲＶ重组病毒。     

套式PCR检测斑节对虾白斑症病毒（WSSV）

解剖患白斑症斑节对虾的鳃组织,制备成不同释放倍数的模板,对其进行白斑症病毒（WSSV）的PCR扩增,结果显示所建立的套式PCR的灵敏度大约为一步PCR的10^4倍;对感染病毒后不同时期的斑节对虾进行PCR检测,发现感染早期经一步PCR检测为WSSV阴性的样品,套式PCR的检测结果为阳性;对发病虾塘中的几种甲壳类动物进行PCR检测,发现经一步PCR检测为阴性的长臂虾、秉氏厚蟹和褶痕相手蟹等宿主,套式PCR的检测结果为阳性。表明所建立的WSSV套式PCR检测法较普通的一步PCR有更大的应用价值和意义。     

猪伪狂犬病的防制体会

近几年随着养猪业的迅猛发展，猪的各种疾病也此起彼伏，猪伪狂犬病就是其中的一种，其感染率和发病率有扩大蔓延之势。     

套式PCR检测淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)方法应用

目的检测目前小鼠和地鼠中淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒的感染情况。方法采用套式PCR方法对小鼠和地鼠脑及小鼠脏器进行扩增,检测LCMV基因;同时对血清进行ELISA试验,将两种方法的结果进行比较。结果从小鼠的脾脏和肾脏中检测到NP基因的存在,检出率2/148;ELISA检出率5/148。结论PCR与ELISA检测方法相结合,准确率高,证明目前小鼠中存在LCMV的感染。     

对虾疫病病毒的实验室常规检测方法

对虾疫病病毒的快速检出，是防治暴发性流行病的关键所在。本文简述了利用电镜负染技术，电镜超薄切片技术和聚合酶链反应邓ＰＣＲ技术等检测对虾疫病的具体方法，并且对结果进行了讨论。     

家兔人工感染疑似猪伪狂犬病病科的病理学观察

采用石河子地区某猪场疑似伪狂犬病病猪脑悬 液人工接种于家兔,从被感染家兔表现不可忍受的奇痒,发热典型症状,剖检和病理组织学及包涵体的观察结果表明,该猪场的患猪可诊断为伪狂犬病。     

鸽圆环病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

目的 建立鸽圆环病毒(PiCV)TaqMan探针荧光定量PCR方法并对其进行初步应用。方法 通过比对NCBI发表的PiCV各分离株序列,选取其polymerase基因保守序列设计引物探针,建立PiCV的荧光定量PCR方法,对方法的特异性及敏感性进行验证;取浓度为3.48×10⁵和3.48×10⁴copies/μL的质粒标准品,每个浓度做6个平行,重复检测3次,计算组内和组间变异系数,验证方法的重复性和稳定性;用该方法检测采自北京某养殖场的鸽肝、脾、肺、法式囊样本各40份及鸽盲肠样本36份,以验证此方法在实际应用中的检测能力。结果 建立的PiCV荧光定量PCR方法在3.48×10⁷～3.48×10¹ copies/μL范围Ct值与质粒浓度呈线性关系,标准曲线Slope为-3.381,R²值为1,扩增效率为97.61%。可检测到的PiCV最低浓度为34.8 copies/μL,与常规PCR法相比,检测灵敏度高2个数量级;以猪圆环病毒2型、禽腺病毒I型及III型、禽白血病病毒、禽网状...     

SHBV的PCR检测方法的建立及其检测

以新分离的猴B病毒毒株为材料,建立了一种PCR快速鉴定SHBV的方法,并通过对PCR产物的限制性酶切分析可与HSV－1相区分,并对这一新分离的B病毒毒株的克隆片段进行了序列分析。