高灵敏过氧亚硝酸根双光子荧光探针的构建与应用

炎症是生物体内与许多疾病相关的重要保护反应,过氧亚硝酸根(ONOO-)参与炎症过程,与炎症有着密切联系。采用6-羟基-2,3,4,4a-四氢-1H-氧杂蒽-1-酮(GCTPOC)作为双光子荧光团(双光子荧光活性截面δΦ=262 GM(1 GM=1×10^-50cm⁴·s·photons^-1·molecule^-1),激发波长λex=860 nm)设计并合成一种用于检测过氧亚硝酸根的双光子荧光探针GCTONOO。该探针具有良好的荧光响应,检出限低(13.5 nmol/L)、Stokes位移大(135 nm),可特异性识别ONOO-。细胞急性炎症模型实验结果表明,该探针可实现细胞炎症过程中ONOO-的荧光成像分析。     

用于活细胞成像的黏度荧光探针研究进展

细胞黏度作为一种重要的生理环境参数,影响着物质的转运、代谢、信号传递以及细胞分化与凋亡等生理活动.细胞黏度的变化与多种疾病和功能障碍密切相关.开发可用于细胞成像的黏度荧光探针对理解细胞内的各种生理活动和疾病诊断具有重要意义.本文系统总结了近年来靶向定位不同细胞器且可用于细胞成像的黏度荧光探针,从结构设计、检测机制、生物...     

近红外荧光探针用于生物硫醇的高灵敏检测

生物硫醇,如半胱氨酸(Cys)、同型半胱氨酸(Hcy)及谷胱甘肽(GSH)等在细胞内调节氧化还原反应和维持细胞正常功能中发挥着重要作用,高灵敏和高选择性地检测细胞内的生物硫醇具有重要意义。本文合成了一种可检测生物硫醇的荧光探针TTCNPy纳米颗粒,该探针具有近红外荧光发射(λem=727 nm)及较大的斯托克斯位移(260 nm)。基于生物硫醇中巯基的强亲核进攻能力,能够破坏荧光探针中的共轭π键,导致探针荧光猝灭。该探针能够在缓冲溶液中灵敏地检测生物硫醇,对Hcy、Cys、GSH的检测限分别为0.479,0.429,0.480μmol,具有较高的选择性和抗干扰能力。此外,该探针还具有合成简便、灵敏度高、选择性高、细胞毒性低的优点,可以用于检测溶液和细胞中的生物硫醇。     

新型心肌黄酶检测荧光探针的合成及生物成像

由于癌细胞以极快的速度不停生长,其内部需氧量远远超出血液的供应量,导致组织内部出现低氧。在固体肿瘤内,低氧导致部分酶出现过表达现象,其中硝基还原酶、偶氮还原酶及心肌黄酶的浓度变化最为明显。本研究中,我们以心肌黄酶作为检测目标,合成了一种新型荧光探针Milla 1。该探针将苯醌作为反应基团,在还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的共同作用下,经过还原反应并发生质子化,生成对苯二酚(或半醌),利用断键反应释放出荧光团,实现对心肌黄酶的光学检测。其中,Milla 1可与心肌黄酶发生专一识别反应,通过635 nm处荧光值的变化直接测定心肌黄酶含量的波动,进而检测出相关低氧区域的低氧程度。由于探针Milla 1具有选择性高、光稳定性好、毒性低等特点,探针Milla 1被成功用于HeLa细胞和秀丽隐杆线虫内源性和外源性的心肌黄酶检测和光学成像实验中。     

黏度和ONOO-双响应荧光探针的设计及成像应用

细胞内黏度和过氧亚硝酸根离子(ONOO-)含量影响正常细胞代谢和生理功能,与很多疾病过程密切相关.为此,设计合成了一种新型黏度和ONOO-双响应荧光探针VI-PN(2-((6-羟基-2,3-二氢-1H-氧杂蒽-4-基)亚甲基)丙二腈).在溶液体系中,该探针随着溶液(PBS/甘油)体系黏度增大,红色荧光(λeml = 6...     

用于残留农药检测的碳量子点荧光探针研究进展

农药的广泛使用促进了粮食作物产量的显著增加,但农药的滥用又导致了严重的环境污染.因此,农业产品中残留农药的实时、快速检测对于全球食物及环境安全有重要意义.碳量子点具有优异的荧光性能、可调的发射波长、优异的生物相容性以及显著的光稳定性,可用于构建残留农药检测的荧光探针.本文简要阐明了碳量子点荧光探针用于农药检测的技术优势...     

新型胺类荧光分子探针的合成及其对羧酸分子的识别

以1,8-萘酰亚胺为基本结构单元设计合成了一种新型胺类荧光分子探针,利用红外光谱(IR)、核磁共振谱(1H NMR)、质谱(MS)和元素分析等方法对其结构进行了表征;利用荧光光谱滴定法考察了该化合物对5种羧酸分子的识别性能,并利用非线性最小二乘曲线拟合法计算了主客体相互作用的结合常数.研究结果表明它对对甲苯磺酰丙氨酸有很好的选择性识别能力.     

基于氧化石墨烯及染料标记的核酸三色荧光探针检测汞离子

利用氧化石墨烯(GO)、两种荧光染料标记的单链DNA及核酸染料SYBR GreenⅠ(SG-Ⅰ),构建了能特异性识别Hg²⁺的三色荧光探针,建立了一种快速、高效、高灵敏定量检测水体中汞离子(Hg²⁺)的新方法。在这种探针中,两种染料Tetramethyl-6-carboxyrhodamine (TAMRA)和Cyanine-5 (Cy-5)分别标记在两条单链DNA的5’端,这两条单链DNA中有一部分碱基互补配对,未互补的碱基均为胸腺嘧啶(T碱基)。在没有Hg²⁺存在时,两种荧光染料标记的单链DNA被吸附在GO的表面,TAMRA和Cy-5与GO靠近,荧光被GO猝灭,它们的荧光信号都很弱;此时,SG-Ⅰ被吸附在GO的表面或游离在溶液中,荧光信号也很弱。在有Hg²⁺存在时,两种荧光染料标记的单链DNA通过T-Hg²⁺-T结构特异性结合形成双链DNA,从而脱离GO的表面,TAMRA和Cy-5远离GO,荧光信号恢复;与此同时,SG-Ⅰ与双链DNA结合,荧光强度显著增强。根据TAMRA、C...     

基于双发射Ce-QDs-CPNs荧光纳米探针的H2O2检测方法

制备了具有双发射功能的Ce-QDs-CPNs荧光纳米探针,利用H2O2对Ce-QDs-CPNs双发射荧光特性的影响,建立了比率荧光检测H2O2的新方法。在Tris-HCl缓冲溶液中,Ce3+与ATP和QDs自组装形成配位聚合物Ce-QDs-CPNs,在310nm的激发波长下,Ce-QDs-CPNs在369和525nm处分别发射Ce（Ⅲ）和QDs的荧光峰。当存在H2O2时,Ce-QDs-CPNs中的Ce（Ⅲ）被氧化为Ce（Ⅳ）,使得369nm处Ce（Ⅲ）的荧光减弱,而525nm处QDs的荧光保持不变。利用Ce（Ⅲ）与QDs荧光发射峰强度比值的变化实现了H2O2的灵敏检测,线性范围为1nmol·L-130μmol·L-1,检测限为0.1nmol·L-1。双发射Ce-QDs-CPNs荧光纳米探针的合成快速简便,对H2O2检测的灵敏度高和选择性好,此外,本方法还可用于葡萄糖的定量分析。     

快速响应组氨酸的铱（Ⅲ）配合物荧光探针

以苯并噻唑为母体,引入弱配位能力的乙腈分子作为辅助配体,开发了两种对组氨酸响应的铱配合物荧光探针IrSN1和IrSN2,通过质谱研究了探针对组氨酸的响应机理。与探针IrSN2相比,探针IrSN1在DMF/PBS（体积比2/3）溶液中识别组氨酸时具有更好的选择性、较短的响应时间（≤15 min）和更高的灵敏度（检出限为9.67μmol/L）等优点,并初步研究了探针IrSN1在细胞生物成像上的应用。     

二氟硼姜黄素烯丙基醚的合成及Pd(0)荧光探针性质研究

钯（Pd）是一种性质非常特殊的稀有过渡金属,在化学以及材料科学中具有重要地位.钯催化反应的产物中常有一定浓度的残余钯污染,需要进一步纯化和检测.因此发展用于检测Pd的技术手段很有必要.零价钯可以通过对烯丙基氧化插入而切断烯丙基醚类化合物的C-O键.基于这个反应,设计合成了荧光分子二氟硼姜黄素烯丙基醚化合物,并测试了其紫外光谱和荧光光谱,研究了其对钯化合物的选择性识别作用.结果表明,该荧光分子对二价钯并无响应,只有零价钯Pd2(dba)3使该分子荧光发生猝灭.该荧光分子对于零价钯表现出很好的选择性和响应性,可作为基于脱烯丙基化反应检测零价Pd的荧光探针,为“turn off”型荧光探针.     

稳定表达egfp基因细胞的构建与克隆

将增强的绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent pprotein,EGFP）基因插在HCMV（humancytomegolovirus）启动子下游,构建了表达质粒pCA13-eG,用脂质体Lipofectin介导分别转染HeLa细胞、Vero细胞,仅通过细胞传代,就最能稳定高效表达EGFP的绿色细胞,比较发现,质粒pCS13-eG转染后,产生能高效表达EGFP的HeLa细胞其比率高于Vero细胞;EGFP高效表达对Vero细胞的毒性大于对HeLa细胞的毒性,本研究表明,绿色细胞轮廓清晰,由于其特有的性质,在用于细胞的形态观察、细胞分裂等研究时会有所作为。     

溴代十六烷基三甲胺存在下铜铁同时与苯基荧光酮显色反应的研究

对 Cu2 + 、Fe3+ 在溴代十六烷基三甲胺 (CTMAB)存在下同时与苯基荧光酮的显色反应进行了研究 ,发现它们与苯基荧光酮均能形成稳定的络合物 ,Cu2 +络合物的最大吸收波长为 5 99nm,摩尔吸光系数为 1 .0 8×1 0 5;线性范围 0～ 7μg/2 5 m L.Fe3+络合物的最大吸收波长为 63 8nm,摩尔吸光系数为 8.87× 1 0 4 ,线性范围 0～6μg/2 5 m L.在水样中进行回收率的测定 ,结果满意 .     

吖啶橙-细胞DNA荧光抑制法初步筛选抗癌药物的研究

以二倍体鼠肝细胞为标准细胞，用荧光探针吖啶橙（ＡＯ）示踪药物／细胞ＤＮＡ的作用而提出了一种用Ｈａｄａｍａｒｄ变换显微荧光图象分析法初步筛选抗癌药物的新方法．对Ｄ－氨基葡萄糖的３ｄ过渡金属的配合物、Ｄ－氨基葡萄糖与β－萘酚醛的Ｓｃｈｉｆ碱及其与３ｄ过渡金属的配合物和它们分别与甘氨酸形成的混配物共四个系列２２种化合物与细胞ＤＮＡ的作用进行了研究，结果表明：Ｃｏ（Ⅲ）ＮＧ，Ｃｏ（Ⅱ）ＮＧ，ＣｕＮＧ，ＣｕＧｌｕ，ＮｉＮＧ，ＣｕＧｌｕＧ，Ｆｅ（Ⅲ）ＮＧ７种化合物有明显的抗癌活性，其中ＣｕＧｌｕ对Ｇ０期细胞更为敏感．     

土霉素酸性降解物与β-环糊精包络配合物的荧光光谱研究与应用

对土霉素在浓硫酸作用下的降解物——脱水土霉素与β－环糊精（β－ＣＤ）形成的包络配合物的条件、作用机理进行了研究，探讨了可能的包络方式，研究表明电子效应与空间效应是影响包络配合物形成的两个主要因素，测定了包络配合物的形成常数，并建立了利用转化荧光结构法测定土霉素的新方法，用该法测定土霉素的结果令人满意，回收率为９８．２％～１００．９％，平均回收率为９９．８％（ｎ＝５）．     

铽离子与3，4-二羟苯丙氨酸的荧光反应及其分析应用

实验发现稀土铽离子能与3,4-二羟苯丙氨酸发生络合反应,并发射出铽离子的特征荧光．本文对铽离子与3,4-二羟苯丙氨酸的络合发光反应进行了详细研究,由此提出了一种简便、快速、灵敏检测3,4-二羟苯丙氨酸的新方法,并且试验了其它氨基酸对其测定的干扰情况,表明该法具有较好的选择性．在激发波长为300nm,发射波长为490nm 与550nm处测定其荧光强度,3,4-二羟苯丙氨酸浓度在2.0×10-8～5.0×10-5mol/L范围内与体系的荧光强度具有良好的线性关系,相关系数为0.9992,其检出限为6.0×10-9mol/L(S/N=2)．用本法对混合样品进行回收率测定与对药物多巴片的测定,都取得了令人满意的结果．     

β-环糊精与四环素类抗菌素酸性降解物包络物的荧光光谱研究与应用

对四环素类抗菌素在浓硫酸作用下的降解物脱水四环素类抗菌素与β－环糊精的相互作用进行了研究，发现脱水四环素，脱水土霉素能与β－环糊精形成包络物，而脱水金霉素和脱水强力霉素与β－环糊精的包络作用则十分微弱，从四环素类抗菌素和β－环糊精的分子结构出发，对包络物的形成机理进行了研究，分别测定了包络物的形成常数，建立了利用转化荧光结构法测定四环素、土霉素和甲烯土霉素这３种四环素类抗菌素的新方法，结果令人满意．