漆树漆酶催化氧化对苯二胺反应的微量热法研究

在厌氧条件下，０．１ｍｏｌ／Ｌ的磷酸盐缓冲溶液（ｐＨ＝７．４）中，用微量热法测定了２９８．１５Ｋ时漆树漆酶与对苯二胺反应的摩尔反应焓ΔｒＨｍ＝－１６３．３６±０．３６ｋＪ／ｍｏｌ，米氏常数Ｋｍ＝５．５８×１０－３ｍｏｌ／Ｌ和表观一级反应速率常数ｋ１＝８．６３×１０－３ｓ－１，及此条件下用对苯二胺作底物时的漆酶活性值ＥＡ＝０．０４５ＩＵ．还利用阿伦尼乌斯经验公式计算了该反应的表观活化能，并讨论了酶－底复合过程的结合能ΔＧ０的计算．     

漆树漆酶的催化氧化作用──Ⅸ．含叔丁基的儿茶酚类底物的漆酶催化氧化

用分光光度法对６个含叔丁基的儿茶酚类底物在不同ＰＨ条件下的离解和漆酶催化氧化行为进行了考察，测定了它们在ＰＨ８．０时的反应速度常数．结果表明，叔丁基的疏水性较好地适应了漆酶对底物疏水程度的要求，使这类底物更容易为漆酶所包结；漆酶活性中心周围的酸性氨基酸残基中的ω－羧基阴离子所提供的ｐＨ环境和质子转移作用，促进了这类底物的离解，使这类底物能在远低于其一级离解所需ｐＨ的环境中进行反应．速度常数数据显示，取代基的疏水作用和取代基参与双齿配位的能力是影响这类底物反应速度的主要因素；在叔丁基的存在下，取代基的电子效应对这类底物的反应速度的影响变得不明显．     

粗毛栓菌漆酶的分离纯化及部分性质研究

将一株自筛的粗毛栓菌（Trametes gallic Fr)接种在含有麦草粉的培养基中可获得较高产量的漆酶，此酶可以吸附到DEAE－纤维素上而被直接从发酵液中分离出来。采用DEAE－纤维素柱层析，用含有0.1-0.9mol/L NaCl的磷酸缓冲液（pH4.5)进行梯度洗脱，可以获得较为纯化的漆酶，经研究，该菌株所产漆酶，以邻联甲苯胺为底物，最适pH值为4.0，最适反应温度40℃，Km为0.105mmol/L。     

漆树漆酶的催化氧化作用——Ⅷ.四卤代氢醌的漆酶催化氧化

在静止条件下,对四卤代氢醌(TXQH_2,X=Cl、Br、I)的漆酶催化氧化行为进行了考察。结果证明,四卤代氢醌的酶反应具有几个明显特征:1)一级离解种是底物参与反应的必要形式;2)半醌自由基阴离子是反应的产物;3)半醌自由基经歧化转变成相应的对醌;4)整个反应过程呈现出连串反应属性。这些特征反映了漆酶催化氧化反应的共性。结果还表明,由于卤原子的吸电子作用不强,不能使自由电子有效地离域,生成的半醌自由基寿命短,衰减快;但在二甘醇存在下,可以有效地延缓半醌自由基的衰减,实现提高半醌自由基动力学稳定性的目的。     

漆树漆酶的催化氧化作用──Ⅵ．漆酶的催化氧化反应机理研究

在静止条件下，用分光光度法研究了底物２，３－二氰基－５，６－二卤氢醌（ＤＤＸＱＨ２，Ｘ＝Ｃｌ，Ｂｒ．Ｉ）的漆酶催化氧化反应，考察了底物离解与反应的关系，考察了半醌自由基的形成和衰减动力学，测定了不同ｐＨ条件下的表现反应速度常数（ｋｏｂｓｄ）、米氏常数（ｋｍ）、半醌自由基的形成速度常数（ｋｆ）和半醌自由基的衰减速度常数（ｋ２ｄ），探讨了环境对半醌自由基形成与衰减的影响，鉴定了反应最终产物的结构．结果证明：１）、底物的一级离解种是底物参与反应的必要形式；２）、半醌自由基阴离子是酶反应的直接产物；３）、半醌自由基的衰减是非酶的歧化反应，４）、由酶反应和非酶反应两部分构成的反应全过程是通过半醌自由基的形成和衰减作纽带联系着的，两个反应部分既独立又偶联，表现为一种特殊的连串反应属性．在此基础上，提出了邻、对苯二酚的漆酶催化氧化反应机理．     

苏云金杆菌4.0718菌株超氧化物歧化酶的纯化和性质研究

经 (NH4 ) 2 SO4 分级沉淀、SephadexG 75凝胶过滤和DEAE 5 2柱层析将苏云金杆菌 4.0 718菌株的超氧化物岐化酶 (SOD)纯化到均一程度 ,酶比活力达 688.0U/mg ,酶得率为 47.9% 该酶经KCN ,H2 O2 ,氯仿 乙醇抑制实验 ,金属元素含量测定和紫外可见吸收光谱测定 ,表明是Fe SOD 经反相高效液相色谱和电喷雾质谱联合分析等方法 ,测得酶分子量为 3 9.4861× 10 6 ,由两个相同亚基组成 ,N 末端氨基酸为丙氨酸     

反相胶束介质中漆酶催化反应中间体信息的捕捉及其解析

利用反相胶束独特的介质特性，捕捉到漆酶催化反应的中间体光谱动力学信号，实现了对酶催化反应过程的在线光谱研究．通过解析反应过程中在线测得的动力学光谱数据矩阵，解得中间体的生成和衰减均为一级反应，并求出实验条件下的反应速率常数．通过实验数据与解析结果的比较证实了方法的合理性．     

两个东亚钳蝎神经毒素cDNA的克隆和序列分析

构建了东亚钳蝎毒腺组织 c DNA文库 ,用 PCR筛选到两个新的神经毒素全长 c DNA,其开放阅读框(ORF)包括 :信号肽、成熟毒素和 /或额外氨基酸序列 ,它们编码的成熟毒素分别命名为 BmαTX9和 Bm IT( cp) 2 .序列分析表明 ,BmαTX9为抗哺乳动物神经毒素 ;Bm IT( cp) 2为痉挛型昆虫毒素 .文章还对东亚钳蝎神经毒素的命名 ,分类以及进化等问题进行了初步的探讨 .     

两种不同功能蜘蛛丝的物理化学结构表征与力学性能

蜘蛛丝是一种具有优良机械性能的天然动物蛋白纤维,它特有的结构和性能与其生物学功能密切相关.采用氨基酸自动分析仪、傅立叶转换红外光谱仪、单纤强力仪和电子显微镜对棒络新妇(Nephila clavata)卵袋框丝(纺自大壶状腺)与内层丝(纺自柱状腺)两种不同功能蜘蛛丝的物理化学结构表征、力学行为与性能进行测试研究.结果表明这两种蜘蛛丝的氨基酸组成和蛋白二级结构与其力学行为与性能相一致,蜘蛛丝似乎呈现出一定的机械性能,以适应其不同的功能要求,这对人们进行新型安全防护材料的仿生设计将有重要的指导意义.     

海洋紫色杆菌β-琼胶酶的分离纯化及性质

从青岛近海海水中分离得到一株高产琼胶酶的海洋紫色杆菌SY12.紫色杆菌SY12的发酵液上清经硫酸铵沉淀,凝胶过滤层析,离子交换层析和凝胶过滤层析等蛋白纯化步骤,得到纯化的野生琼胶酶AgaY.琼胶酶纯化了133.63倍,酶比活力为320.7 U/mg;纯化的琼胶酶经SDS-PAGE检测,显示为单一条带,其相对分子质量约为50 ×103.研究结果表明琼胶酶AgaY降解琼脂糖的β-1,4-糖苷键,其主要产物为新琼四糖和新琼二糖.对AgaY进行酶学性质研究,发现其最适反应pH为7.0,最适反应温度为40 ℃;Hg2 ,Ag ,Zn2 ,Cu2 和Pb2 等金属离子可以显著的抑制琼胶酶AgaY的活力.研究发现,AgaY的催化活性不依赖于离子的存在,AgaY对EDTA不敏感.     

掌叶半夏胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及其性质

经硫酸铵分级沉淀、热处理、DEAE等方法从掌叶半夏中分离出一种不含糖的具有抗虫作用的胰蛋白酶抑制剂(Pinellia pedatisecta trypsin in hibitor,PPTI),SDS-PAGE电泳与反相液相色谱(RT-HPLC)检测证明分离得到一纯蛋白,质谱(LC-MS)测定其相对分子质量为20596.09.荧光光谱分析研究结果显示:PPTI在pH低于9、温度低于60℃时,PPTI的三级结构相对稳定;抗虫活性结果显示有较好的抗芽虫作用.     

新疆北部两种兔尾鼠乳酸脱氢酶和酯酶同工酶的比较研究

本文采用聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳法分别分析了黄兔尾鼠(Lagurus lutcus Eversmann)和草原兔尾鼠(Lagurus lagurus Pallas)的八种组织器官(肝脏、心脏、肌肉、肾脏、胃、脑、肺和横膈)中的乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)同工酶。实验结果表明,(1)在同种动物的不同组织中,同工酶谱带及活性表现不同,具组织特异性。(2)异种动物的相同组织中,每种同工酶的谱带和活性不同,具有种间特异性。(3)在异种动物中,EST同工酶的差异性大于LDH同工酶的差异性;因此,EST同工酶可作为区分亲缘关系相近物种的遗传指标。(4)黄免尾鼠似乎是通过增加LDH同工酶的B亚基和EST同工酶的活性来适应干旱及半干旱的荒漠生境。     

饮用水库上游农村污水生态净化与农业利用方案设计

针对地处城市饮用水源上游的山区农村,提出生态净化与农业利用相结合的水污染控制方案,即将村庄生活污水经新建干管收集后,顺势自流输入到三级生态塘进行生态净化,用潜污泵将清液提升到山上进行竹林灌溉.探讨农村污水收集方式和净化工艺的适用性,并进行竹林喷灌负荷核算和投资效益分析.阐述该方案在削减污染提高水库水质、改善农村生活环境和促进农业增产增收等方面的综合作用.     

紫桑椹紫色素理化性质的研究

对紫桑椹紫色不的理化性质了详细的研究,结果表明,该色素水溶性好,耐热性和耐光性较好,盐,人,金属离子对色素的色泽无不良影响,柠檬酸有增色效应。     

[C_（16）min]Br改性累托石的制备与性能研究

以热稳定性较高的离子液体1-十六烷基-3-甲基咪唑溴盐（[C16min]Br）为改性剂,以水为溶剂对累托石（REC）进行有机处理,制得离子液体型累托石（[C16min]Br-REC）.通过元素分析考察了反应配比、制浆浓度、反应温度、反应时间、pH值对REC阳离子交换量（CEC）的影响,并通过红外光谱、X-射线衍射、透射电镜、热失重分析对有机累托石的结构和性能进行了表征.结果表明：改性后累托石层间距由2.23nm扩大到3.14nm,[C16min]Br-REC的热分解温度比十六烷基三甲基溴化铵改性累托石（CTAB-REC）提高了71℃.