噬菌体展示肿瘤异性抗原表位的初步免疫活性研究

利用噬菌体展示技术将丝噬菌体（fd)基因8克隆入pKK233-3质粒中，将人的恶性黑色素瘤的抗原表位基因插入到修饰后的质粒载体中，制备了含有抗原表位的杂合噬菌体。利用纯化的表位抗原免疫小鼠，用间接ELISA方法采用双波长（450/630nm)动态检测抗体。结果表明，噬菌体-表位抗原刺激小鼠产生了抗体。抗体的含量随时间不断增加，到4周进达到高峰。小鼠脾淋巴细胞转化实验表明噬菌体-表位抗原产生了明显的淋巴细胞增殖反应，为研制肿瘤疫苗奠定了基础。     

溶血磷脂酰胆碱衍生物的合成及其对自然杀伤T细胞的激活作用

溶血磷脂酰乙醇胺（pLPE）是自然杀伤T细胞（NKT）的内源性抗原。溶血磷脂酰胆碱衍生物(LPC)与CD1d结合被NKT细胞识别并激活NKT细胞。本文以手性甘油醇缩丙酮为起始原料,合成了LPC衍生物（5和6）,其结构经¹H NMR, ¹³C NMR, ³¹P NMR和HR-MS(ESI)确证。研究了5和6〖STBZ〗的免疫活性。结果表明:100 ng·mL^-1 6负载mCD1d分子后可刺激2H4细胞释放IL-2因子（32.13±1.56 pg·mL^-1）,具有潜在的NKT激活性质。     

测试生物分子的新方法—伏安免疫法

本文综述了迄今为止国外和本实验室在伏安免疫法新领域的研究工作。阐述了伏安免疫法的发展和基本原理,讨论了伏安免疫分析的各种可行方法和前景。     

抗原肽与MHC分子相互作用QM/MM分子动力学模拟研究

在MHC I类(major histocompatibility complex class I)分子抗原加工提呈过程中抗原蛋白在抗原提呈细胞(antigen-presenting cells, APC)的胞浆中被蛋白酶体(proteasome)裂解成短肽peptide, 由转运相关蛋白(transporter associated with antigen processing, TAP)将蛋白酶体裂解产生的短肽片段从胞浆转运至内质网腔. 短肽peptide在内质网中与新生成的MHC I类分子结合, 形成peptide-MHC复合体被提呈到APC细胞表面, 与T细胞表面抗原受体(T cell receptor, TCR)特异性识别结合, 使得CTL细胞开始活化、增殖、分化, 进而对肿瘤细胞进行特异性杀伤. 目前对CTL细胞如何识别抗原肽-MHC复合物分子及抗原短肽peptide如何与主要组织相容性复合体MHC分子的相互作用识别结合的机理还不是很清楚. 传统的预测CTL细胞表位的方法没有考虑受体与配体结合过程中电子结构的变化, 电子结构的变化需要用量子力学方法来处理. 本文采用QM/MM多尺度生物大分子的分子动力学模拟方法, 以天然抗原肽TAX (LLFGYPVYVYU)与HLA-A*0201分子结合的晶体结构为模板, 替换抗原肽“锚点”氨基酸, 将口袋氨基酸残基的原子极化电荷在空间形成的静电势用电多极矩分量表示. 用箱线图分析每个口袋氨基酸分子静电势变化和功能, 确定Pocket B的Glu63和Lys66的功能是精细识别氨基酸和一级结合氨基酸, Pocket F的Asp77, Tyr84的功能是精细识别氨基酸, 而Asp77, Lys146是一级结合氨基酸, 表明QM/MM方法在提取抗原肽与MHC I类分子识别结合特异性信息是可行的, 这对了解免疫识别机理和指导肿瘤疫苗的开发都具有指导意义.     

基于原子力显微镜的人外周血CD8+T细胞形貌观察与力谱分析

体外分离人外周血CD8+T细胞,用植物凝结素(PHA)刺激活化,利用原子力显微镜(AFM)观察CD8+T细胞的形貌,并结合针尖修饰技术对力谱进行分析,确定了CD8抗原分子的分布.结果表明,与静息的CD8+T细胞相比,活化后的CD8+T细胞直径和高度增大,细胞表面变得更粗糙;CD8抗原-抗体的相互作用力大约是非特异性黏附力的5倍,活化后的CD8+T细胞上特异性黏附力(即CD8抗原分子位置)分布不均匀,其表面的CD8抗原分子分布以纳米团簇分布为主,CD8分子聚集更为明显,CD8+T细胞上CD8抗原-抗体相互作用力不随着活化而发生明显变化,说明CD8抗原-抗体之间具有高选择性.原子力显微镜为特异性T细胞的抗原识别和活化研究提供了一种新手段,能够使T细胞抗原识别和活化的机制得到更好地阐明.     

糖脂功能化聚二乙炔Langmuir-Schaefer薄膜与大肠杆菌的分子识别及动力学过程研究

在气液界面上研究了α-D-甘露糖苷-十六烷(MC₁₆)与10,12-二十五碳双炔酸混合单分子膜行为,二者具有较好的互溶性.在疏水的玻璃衬底上用Langmuir-Schaefer(LS)薄膜技术制备单层MC₁₆/PDA薄膜,研究了这种仿生薄膜与大肠杆菌jm109的相互作用.大肠杆菌jm109对MC₁₆修饰的聚二乙炔LS薄膜的吸附,使薄膜颜色由蓝色变为红色,用紫外-可见吸收光谱可进行定量检测.动力学研究显示比色响应值随时间的增加而增加,3min内即有显著变化,15min后趋于饱和,20min后CR值达到28%,进一步探讨了分子识别的动力学过程.     

化学发光免疫分析法检测血清中前列腺特异抗原复合物

采用杂交瘤技术构建抗前列腺特异抗原-α1-抗胰凝乳蛋白酶( Prostate specific antigen-α1-antichymot-rypsin complex,PSA-ACT)单克隆抗体(单抗)细胞株,共获得8株稳定分泌PSA-ACT单抗的细胞株,纯化后进行免疫特性鉴定并做单抗配对。选择其中一对单抗,采用辣根过氧化物酶( HRP)催化鲁米诺( lumino)-H2 O2化学发光体系,建立了测定人血清中PSA-ACT浓度的化学发光酶免疫分析方法( CLEIA)。对包被缓冲液、包被抗体浓度、酶标抗体稀释度、温育时间、发光反应时间和免疫反应步骤等实验参数进行了优化。在最佳实验条件下, PSA-ACT浓度在5~40 ng/mL范围内线性关系良好(R2=0.9943),检出限为0.53 ng/mL,批内相对标准偏差(RSD)为4.6%~6.6%,批间RSD为5.7%~8.0%,回收率为95.4%~104.2%,与游离前列腺特异性抗原F-PSA的交叉反应率为0.6%。本方法简单、稳定、灵敏、快速,为开发检测PSA-ACT的CLEIA试剂盒奠定了基础。     

几类典型的超分子液晶研究进展

超分子液晶结合了超分子化学和液晶两者的特点,是近年来研究的一个热点.在简述超分子化学和超分子液晶概念的基础上,对非共价键结合包括氢键型、离子型和金属络合型的超分子液晶结构和研究现状作了简介,并对超分子液晶常用的表征方法进行了概述.     

金纳米棒免疫层析试纸条定量检测前列腺特异性抗原

建立了一种基于金纳米棒(GNR)的免疫层析方法,用于快速定量检测前列腺特异性抗原(PSA)。以GNR为标记探针,通过包裹羧基化的聚合物后,采用共价偶联的方式连接抗PSA单克隆抗体形成偶联物,以鼠抗PSA单克隆抗体和羊抗鼠IgG分别喷涂硝酸纤维素膜,形成试纸条的检测线和质控线,采用三明治夹心法构建GNR免疫层析试纸条,用于PSA的定量检测。结果表明,GNR免疫层析试纸条特异性强,稳定性好,灵敏度高,对PSA检测的线性范围为0.1～50 ng/mL,检出限为0.1 ng/mL,批内和批间变异系数均小于10%,且具有良好的保存稳定性。本方法可用于检测血清中PSA的浓度水平,对于前列腺癌的早期诊断、监测治疗及预后判断具有重要意义。     

偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗原

本文提出了一种偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎Ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）的新方法。本法对酶标乙型肝炎Ｅ抗体测定的灵敏度比经典的ＥＬＩＳＡ显色光度法高２０倍。对ＨＢｅＡｇ的测定采用双抗体夹心法，对ＨＢｅＡｇ阳性对照血清的测定范围为１：１～１：１０２４，灵敏度比ＥＬＩＳＡ显色光度法高１６倍。用所建立的方法对实际病人血清样品进行了测定，并与现行的ＥＬＩＳＡ显色光度法进行对照，两种方法相关性很好。     

糖脂制剂主要成分半乳糖脑苷脂的1H NMR定量分析

利用^1HNMR谱的定量功能，通过与柱色谱分离所得半乳糖脑苷脂的谱图进行对比，找出了糖脂制剂混合物^1HNMR谱图中半乳糖脑苷脂、磷脂、胆固醇这3类化合物的特征峰化学位移，通过谱峰拟合的方法获得了特征峰面积，从而求出这3类化合物在混合物体系中的摩尔分数，得到令人满意的结果。     

有机化学教学中几个概念的讲授

阐述了对共轭烯烃的1,2和1,4加成反应、乙醇分子内与分子间脱水反应、羟醛缩合机理、酯缩合中催化剂的选择以及R, S构型命名等的认识和见解,并将这些认识和理解应用于有机化学教学实践中,取得了较好的效果。     

几种除草剂农药在高效液相色谱手性固定相上的对映体分离

采用正己烷-极性醇正相体系为色谱流动相,稳杀得、萘丙胺等几种不同种类的除草剂农药在Pirkle刷型(S,S)-Whelk-O1手性柱或自制的纤维素三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)(CDMPC)手性柱上获得了成功的手性分离。研究了流动相中醇类改性剂对手性识别的影响,初步探讨了手性识别的机理,并摸索出最佳的对映体分离条件。     

Recent Advances in Homogeneous Carbonylation Using CO2 as CO Surrogate

Carbon dioxide is a sufficient and important carbon resource, which has been widely used as a C1 building block in synthetic chemistry. Carbonylations with CO are important processes in industry. However, due to the toxicity of CO, its storage and transport are problematic. Attentions are gradually focused on using other safe reagents to be the CO surrogates in carbonylation reactions. This review focuses on the summary of recent developments in using CO₂ as a CO surrogate in homogeneous catalysis. Reductive processes by using H₂, Si‐H, alcohols, etc and redox‐neutral processes are separately summarized.     

几种多取代吡咯的NMR研究(Ⅰ)

本文测定了1-笨基-2-甲基-3-乙酰基-5-对氯苯基吡咯(I)等十个多取代吮咯的¹HNMR谱和其中五个化合物的¹³CNMR谱。归属了共振谱线,证实了各化合物的分子结构。得到了2-甲基-3-乙酰基-5-对氯苯基吡咯基-1在苯衍生物中的经验取代基增量。     

微生物腈水合酶的研究进展

腈水合酶 ( Nitrile Hydratase E C4.2 .1 .84,简称 NHase)是一种微生物酶 ,它可催化多种腈化合物水解生成酰胺[1] ,酰胺在酰胺酶 ( Amidase)的作用下 ,进一步转化生成羧酸及氨气 .这与腈水解酶( Nitrilase)催化腈水解一步生成羧酸的途径有所不同 .微生物 NHase可广泛地应用于氨基酸、酰胺、羧酸及其衍生物的合成 . 1 980年 ,Asano等人[2 ] 首次发现微生物 Rhodocococcus sp. N- 774NHase可降解有毒的乙腈 ,不久即被成功地应用于工业生产丙烯酰胺 .近来 ,NHase也被用于制备手性药物 ,如 Gilligan 等 [3 ]成功地用 Rhodocococcus equ…     

铱基催化1-已烯氢甲酰化反应的研究

自1938年Otto Roelen从事Fisher-Ttopsch发现氢甲酰化反应以来,这类反应一直是有机合成和金属催化领域热点之一。目前合成醛及其衍生物的氢甲酰化反应已成为金属均相催化体系中使用可溶性催化剂最大的工业应用范例。而自20世纪90年代出现的Cativa(铱基催化剂),因具有原料价格低,稳定性好,易溶解,     

高分子合金相容剂的研究进展

综述了高分子合金相容剂的重要研究进展,包括相容剂体系和相容性表征的研究。目前新研制出的相容剂主要有PVDF—g—AAc—g～TPU、EAGMA、PP～g—MAH和PP_g—MAH—St;这些相容剂克服了高分子合金和高分子基复合材料热稳定性差的缺点,降低了共混物的加工温度,并提高了材料的强度和抗冲击性能。现代表征技术在检验相容剂增容效果和表征高分子合金相容性起到了很好的作用,利用转矩流变仪和DSC检验相容剂的作用基团、扫描电镜和透射电镜观测EMG增容后的MDPE／PA6和MDPE／PET的断口形貌和组分的平均粒径、偏光显微镜和WAXD表征交联LLDPE~PP／LLDPE／PP合金晶型和结晶行为。作者针对相容剂对合金性能影响的研究存在的争议与分歧,认为高分子合金相容剂向功能化和复合化发展。     

含螺环结构农药研究进展

综述了近年来含螺环结构化合物在农药方面的研究进展, 详细介绍了部分螺环化合物的合成方法, 总结了螺环农药的结构特征. 对该类化合物的应用前景进行了展望.     

多种记忆方法相结合提高物理化学重要公式的记忆效率*

物理化学是一门逻辑性强、公式繁多的化学基础理论课。结合列举实例,总结了联想记忆法、类比记忆法、化繁为简记忆法、归类记忆法和逻辑关联记忆法等多种方法在物理化学重要公式记忆中的应用,使学生通过应用这些方法提高记忆物理化学公式的效率。