N-磷酰化肽酯及小肽与溶菌酶相互作用的ESI-MS研究

用ESI-MS研究了一系列结构具有可比性的N-磷酰化肽酯及小肽和溶菌酶的非共价相互作用, 比较了磷酰化肽酯及小肽分子中的不同基团对相互作用的影响. 结果表明—OH对其与溶菌酶的相互作用有较大贡献; 芳香环由于位阻原因, 对相互作用有促进和阻碍双重效应; 当—OH与芳香环相连时会发生协同效应, 可使相互作用显著增强. 磷酰化肽酯及小肽的体积大小、空间位阻对相互作用亦有显著影响. 磷酰化二肽中氨基酸残基的构型、顺序、碳链长短的变化(增加1～2个C)对其与蛋白溶菌酶之间的相互作用在质谱中没有表现出影响. 分子结构较为伸展、分子柔顺性好、空间位阻较小的磷酰化小肽更容易使蛋白在溶液中的构象趋于收缩, 而构象较为收缩的蛋白分子更易结合空间位阻较小的磷酰化小肽分子.     

N-磷酰化肽酯及小肽与氨基酸相互作用的ESI-MS研究

采用ESI-MS研究了一系列结构具有可比性的N-二异丙氧基磷酰化肽酯及小肽同20种蛋白氨基酸及3种D型氨基酸(D-Ala、D-Ser、D-Phe)的非共价相互作用。结果表明,可形成π-π共轭体系的芳香环,可显著增强磷酰化肽酯及小肽与氨基酸的相互作用力,π-π堆积力是首要的非共价相互作用力;可形成氢键的极性基团有利于形成复合物,但能否形成氢键还要受到分子柔顺性的影响;另外,分子大小、空间位阻对复合物的形成也有影响;而氨基酸的手性对它们的相互作用在质谱条件下没有表现出影响。     

ESI质谱法对黄酮-7-磷酰化氨基酸酯与溶菌酶相互作用的研究

采用电喷雾(ESI)质谱技术,研究了4种黄酮-7-磷酰化氨基酸酯与溶菌酶的弱相互作用,实验结果表明4种化合物均能与溶菌酶形成非共价复合物,在相同条件下,未检测到黄酮与溶菌酶形成的非共价复合物,说明在黄酮分子中引入N-磷酰化氨基酸,能改变黄酮的分子极性,从而使其与生物大分子之间的相互作用情况发生变化;通过改变锥孔电压,分别对4种黄酮-7-磷酰化氨基酸酯-溶菌酶复合物的耐压能力进行检测.结果显示,黄酮-7-磷酰化氨基酸酯b与溶菌酶形成的复合物最稳定,它们之间存在最强的弱相互作用.     

电喷雾质谱法研究人参皂苷与溶菌酶的相互作用

用电喷雾质谱法研究了溶菌酶与人参皂苷Rg1和Re的非共价相互作用。非共价复合物的解离常数可以由溶菌酶和复合物的峰高直接计算得到。由各个体系得到的溶菌酶与Rg1和Re的一级解离常数KD, 1是一致的,但是二级解离常数KD, 2的差别较大。由此可以推断出复合物的峰高越强,结果的精密度越好。当固定溶菌酶的浓度不变时,复合物的解离常数会随着人参皂苷的浓度的增加而略微的增大。而当固定人参皂苷的浓度时,复合物的解离常数会随着溶菌酶的浓度的增加而减小。计算结果还证明了人参皂苷Rg1与溶菌酶的结合能力大于Re。     

ESI-MS研究N-苯甲酰基-脱氢枞胺衍生物与血管紧张肽Ⅲ的相互作用

采用电喷雾质谱法,考察了4种最新合成的N-苯甲酰基-脱氢枞胺衍生物（NBDD）——N-苯甲酰基-脱氢枞胺(NBD),N-邻氯苯甲酰基-脱氢枞胺(NClBD),N-苯甲酰基-脱氢枞胺-7-酮(NBDO),N-邻氯苯甲酰基-脱氢枞胺-7-酮(NClBDO)与具有重要生理作用的血管紧张肽Ⅲ（AngⅢ）的相互作用。结果表明,这4种化合物与AngⅢ以不同的摩尔比 (1:1,3:1,5:1)混合时,均可形成非共价复合物,并主要形成+2价复合物离子。对4种NBDD:AngⅢ为1:1的+2价复合物离子[NBDD-AngⅢ+2H]2+进行了2级质谱分析,并根据相对碰撞能的大小,比较了这4种复合物离子的稳定性。对NBDD:AngⅢ为2:1的+2价复合物离子[(NBDD)2-AngⅢ+2H]2+进行了2级和3级质谱分析,并探讨了(NBDD)2-AngⅢ复合物中NBDD分子与AngⅢ的结合方式。     

电喷雾多级质谱研究功能小分子与蛋白质的非共价相互作用——推荐一个化学生物学教学实验

肌红蛋白不仅便宜易得,而且自身就是一种由蛋白质和铁卟啉环辅基通过非共价相互作用构成的复合物.因此,以肌红蛋白为研究模型,带领学生实践基于电喷雾多级质谱技术的酶抑制剂直接筛选策略,重点考查不同有机溶剂比例及pH等样品制备条件对复合物测定结果的影响,以及如何利用二级质谱技术实现功能小分子配体的在线定性分析.该实验已在我校化学生物学专业本科生"化学生物学综合实验"教学工作中进行了多轮教学实践,通过实践不断优化实验设计,取得了良好的教学效果.     

荧光及ESI质谱法研究溶菌酶与磷酰化黄酮的相互作用

分别用荧光法和ESI质谱法研究了磷酰化黄酮和溶菌酶的相互作用 .结果均显示磷酰化黄酮能够和溶菌酶发生弱相互作用 ,与黄酮相比它对溶菌酶更具亲和力 .根据荧光猝灭双倒数图计算了磷酰化黄酮与溶菌酶之间的结合常数为k2 0℃ =1.68× 10 4L/mol,k3 7℃ =1.0 6× 10 4L/mol,实验证明随着温度的升高 ,磷酰化黄酮与溶菌酶的结合常数逐渐降低 ,说明了两者之间形成了复合物 ,此荧光猝灭过程为静态猝灭 .根据F ster能量传递原理计算出磷酰化黄酮在溶菌酶上的结合距离 ,并根据热力学参数确定了磷酰化黄酮与溶菌酶之间的作用力类型为电荷作用力     

电喷雾离子化飞行时间质谱研究鸡蛋清溶菌酶与β-环糊精的新型复合物

运用电喷雾离子化飞行时间质谱分析鸡蛋清溶菌酶与β－环糊精的复合物。通过减少β－环糊精的配制浓度至原来的1/5,发现形成1:2和1:3复合比的溶菌酶-β-环糊精复合物的离丰度减弱,但化学计量比为1:1的复合物变化不大,证明该新型复合物为非特异性非共价复合物。此外还对质谱参数、分析条件对复合物离子化的影响作了详尽的考察,得出在nozzle电压为200V时复合物信号最强,在不影响生物分子高级结构的前提下添加少量的有机溶剂如甲醇、乙腈等能较明显地改善质谱信号。     

大豆苷元磷酰化衍生物的合成及其与溶菌酶复合物的ESI研究

通过改进的Atherton-Todd反应,得到了5个新的大豆苷元磷酰化衍生物,其结构被X-ray,IR, NMR和ESI确认. ESI质谱证实在气态下磷酰化大豆苷元能和溶菌酶形成非共价复合物,而大豆苷元与溶菌酶的非共价复合物未能检测到. 通过变换ESI的orificevoltage,检测了不同的磷酰化大豆苷元与溶菌酶非共价复合物的相对稳定性.     

α-乳白蛋白与磷酰化黄酮弱相互作用ESI质谱研究

采用电喷雾（ESI）质谱技术,研究了4种磷酰化黄酮与α-乳白蛋白间的弱相互作用,试验结果表明4种磷酰化黄酬均能与α-乳白蛋白形成非共价复合物,但由于小分子结构稍有差别,它们跟α-乳白蛋白又分别有着不同程度的结合。     

Understanding the Fragmentation Pathways of Carbocyclic Derivatives of Amino Acids by Using Electrospray Ionization Tandem Mass Spectrometry

Aminoacyl derivatives of aminoadamantanes amantadine and rimantadine have been investigated in regard to their antiviral properties. So far, few studies on the mass spectrometric fragmentation pathway of these compounds have been reported using high-resolution mass spectrometry (HRMS). Two major fragmentation pathways have been observed. For the rimantadine derivatives, losses of rimantadine and N-(1-adamantyl) ethylformamide were described. Similarly, in case of amantadine derivatives, there were losses of amantadine and N-(1-adamantyl) formamide. The loss of the aminoacyl group was common to all of the studied compounds. Understanding the fragmentation mechanism can bring new insight into the characterization of these compounds.     

Construction and Analysis of N-phosphoryl Peptide Libraries

N-Phosphoryl peptide libraries were constructed by transformation from homo-oligopeptide libraries, which was synthesized by self-assembly of amino acids with the assistance of phosphorus oxychloride. Electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS) was used to monitor the reaction.     

Palladium-catalyzed 1,3-butadiene telomerization with methanol. Improved catalyst performance using bis-o-methoxy substituted triarylphosphines

New, improved phosphine ligands for palladium-catalyzed butadiene telomerization with methanol have been discovered. Using high throughput experimentation and an Electrospray Ionization-Mass Spectrometry (ESI-MS) investigation of telomerization catalysts solutions, we have identified phosphines of the type P(C₆H₄-2-OMe)₂(C₆H_5−n(X)_n), where X is an electron-withdrawing group, as high selectivity, high activity phosphine ligands for butadiene telomerization with methanol to 1-methoxy-2,7-octadiene (MOD-1). These ligands were designed to mitigate anaerobic oxidation of phosphines by alkylation which was shown by Electrospray Ionization-Mass Spectrometry (ESI-MS) studies to correlate with catalyst death and palladium precipitation in working telomerization catalyst solutions. The best phosphine-promoted catalysts achieve selectivities to desired 1-methoxy-2,7-octadiene of 94% at high butadiene conversion, significantly improved over those achieved commercially by triphenylphosphine.     

月桂酰基苹果酸酯胶束电动色谱-质谱法同时测定牛黄上清片中5种生物碱

建立了基于月桂酰基苹果酸酯的胶束电动色谱-质谱法同时分离测定牛黄上清片中黄连碱、小檗碱、药根碱、黄柏碱以及川芎嗪5种有效成分含量的新方法。以7.5 mmol/L月桂酰基苹果酸酯-15 mmol/L氨水-50 mmol/L醋酸铵(含12.5%的乙腈,pH=7.0)为电泳介质,未涂层弹性石英毛细管(88 cm×50 μm)为分离通道,50%异丙醇水溶液(含3 mmol/L乙酸)为鞘液,在25 kV的运行电压下,各组分可以在18 min内得到基线分离。各组分的浓度与其峰面积呈现良好的线性关系,迁移时间和峰面积的相对标准偏差均小于5%,样品中5种生物碱成分的样品加标回收率在96.0%～105%之间。该法简便、快速、准确、重现性好,可用于牛黄上清片中这5种有效成分含量的同时测定。     

New supramolecular ferrocenyl amides: synthesis,characterization, and preliminary DNA-binding studies

Three ferrocenyl amides have been synthesized and characterized by analytical techniques. Based on single-crystal X-ray analysis, a supramolecular structure was attributed to 1 owing to the presence of intermolecular non-covalent interactions. UV-Visible spectroscopy, viscometry, and dynamic laser light scattering was used to assess the mode of interaction and binding of these complexes with DNA, which varied in the sequence 1?>?2?>?3. The binding is presumably due to the ability of these complexes to form secondary non-covalent interactions with DNA bases. Complex-DNA adduct formation depends on the nature of R of the amide.     

类黄酮化合物对G-四链体及双链DNA选择性的电喷雾质谱研究

利用电喷雾质谱(ESI-MS)研究了4种常见的类黄酮化合物芦丁、槲皮素、葛根素和柚皮苷与2种不同形态结构的G-四链体DNA和3种双链DNA的非共价相互作用,比较了这些小分子化合物与不同形态结构DNA结合的强弱及形成复合物的化学计量.结果表明,芦丁和槲皮素对G-四链体DNA具有一定的选择性,同时它们对双链DNA的选择性也较高;而葛根素和柚皮苷对G-四链体DNA仅显示了较低的选择性.     

电喷雾质谱的非共价键蛋白质复合物研究

电喷雾质谱(ESI-MS)已经成为检测和研究生物分子弱相互作用,即非共价键作用的一个重要分析手段.ESI-MS除了具有快速、灵敏、专属的特点以外,还有能够直接得出复合物的分子量和化学计量比的优点.本文通过蛋白质与蛋白质、配体、金属离子的非共价复合物的例子阐述了ESI-MS技术的主要特性,综述了ESI-MS在非共价键蛋白质复合物方面的早期和近期应用研究成果.引用文献34篇.     

直接进样电喷雾质谱分析烷基苯磺酸盐

采用直接进样法,电喷雾质谱分析三次采油用烷基苯磺酸盐,可以得到定性结果,定出该表面活性剂中各组分的分子式,操作简单易行．