基于漂浮有机液滴凝固液相微萃取的黄酮类化合物分配系数及含量测定

以漂浮有机液滴凝固液相微萃取（SFODLPME）对中药中黄酮类化合物进行富集,建立SFODLPME-HPLC快速测定中药材样品中低丰度黄酮类化学成分含量的方法. 并讨论了黄酮类化合物富集倍数与浓度之间的关系、富集倍数与供相体积之间的关系,定义和阐述了EF1μg?mL-1及其物理意义,计算了漂浮有机液滴凝固相体积及黄酮类化合物的表观分配系数. 在SFODLPME的优化条件下结合高效液相色谱测得8种黄酮类成分的线性范围均为0.01~10.00μg/ml;检测限在1.0~0.01ng/mL;精密度RSD<7.0%;药材中分析物的回收率在96.0% ~104.2%. 当加入萃取溶剂体积为40μl 时,形成漂浮有机液滴凝固相体积为52±14μl;8种黄酮类成分的表观分配系数在44.8~243.9之间.     

高效液相色谱法测定北五味子中5种木脂素含量

应用高效液相色谱法测定北五味子中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素和五味子丙素等5种木脂素的含量。北五味子样品(1.000g)在70℃温度下用甲醇(20mL)微波辅助提取5min。分取部分提取液,以Hypersil ODS C18色谱柱为固定相,用乙腈和水以不同比例混合的溶液为流动相进行梯度洗脱,在检测波长225nm处进行测定。5种木脂素在一定的质量浓度范围内与其峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)在0.029 2~0.050 7mg·L-1之间。以样品为基体,在3个浓度水平加入混合标准溶液进行回收试验,测得回收率在95.3%~101%之间,测定值的相对标准偏差(n=6)在1.1%~2.4%之间。     

基质固相分散萃取-高效液相色谱法同时测定五味子中5种木脂素类化合物北大核心CSCD

研究建立了基质固相分散萃取-高效液相色谱(MSPD-HPLC)分析五味子中5种木脂素类化合物(五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素)的方法。采用反相C_(18)色谱柱进行分离,以0.1%(v/v)甲酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱,在波长250 nm下检测。考察了包括硅胶、酸性氧化铝、中性氧化铝、碱性氧化铝、佛罗里硅土、Diol、XAmide、Xion和C_(18)、C_(18)-ME、C_(18)-G_(1)、C_(18)-HC等在内的12种吸附剂以及吸附剂的质量、洗脱剂的种类、洗脱剂体积对五味子木脂素类化合物得率的影响。选定Xion作为MSPD-HPLC分析五味子中木脂素类化合物的吸附剂;基于吸附剂Xion的萃取参数优化结果表明:以0.25 g五味子粉末为固定值,Xion(0.75 g)为吸附剂,甲醇(15 mL)为洗脱剂,MSPD对五味子中木脂素类化合物具有较高的得率。建立的五味子中5种木脂素类化合物的分析方法,各目标分析物具有良好的线性关系(相关系数R^(2)≥0.9999),检出限与定量限分别介于0.0089~0.0294μg/mL和0.0267~0.0882μg/mL之间。对五味子木脂素类化合物进行低、中、高3个水平的加标回收试验,平均回收率为92.2%~111.2%,相对标准偏差为0.23%~3.54%。日内和日间精密度均小于3.6%。与超声辅助提取和热回流提取前处理相比,MSPD具有萃取和净化相结合、耗时少、所需溶剂量少的优点,且MSPD-HPLC获得的结果优于经典方法。所建立的方法成功应用于17批五味子中5种木脂素类化合物含量的分析。     

超高效液相色谱-质谱法测定醋五味子中7种木脂素的含量北大核心CSCD

采用超高效液相色谱-质谱法测定醋五味子中五味子酯甲、五味子酚、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、五味子醇甲和五味子醇乙等7种木脂素的含量。醋五味子样品0.200 0g用甲醇10mL超声提取30min。以ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱为分离柱,以不同体积比的乙腈和0.1%(体积分数)甲酸溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱,质谱分析中采用电喷雾正离子源和选择离子监测模式。7种木脂素的质量浓度在一定范围内与其对应的峰面积呈线性关系,方法的检出限(3S/N)为0.001~0.050mg·L^(-1)。对6.0mg·L^(-1)的7种木脂素混合标准溶液连续测定6次,测定值的相对标准偏差为1.2%~3.5%。方法用于醋五味子样品的分析,加标回收率为85.4%~99.3%。     

五味子中木脂素类成分的高效液相色谱-电喷雾质谱研究

采用液相色谱-电喷雾质谱联用(HPLC-ESI-MSⁿ)技术, 对北五味子与南五味子中木脂素类成分进行了系统研究. 通过HPLC-ESI-MS技术, 获得了相应化合物的保留时间、紫外光谱和分子量等信息, 利用电喷雾多级串联质谱技术(ESI-MSⁿ), 获得了相应化合物的结构信息. 研究结果表明, 北五味子与南五味子的主要木脂素成分除5个共有成分外其它成分差异较大, 并且其共有成分含量差别较大. 在此基础上, 建立了简便、快速的北五味子与南五味子药材分析鉴定的新方法.     

二维反相液相色谱制备五味子中的木脂素

应用自主研发的具有分离-富集模式的制备色谱工厂,建立了分离制备五味子木脂素有效部位及其单体化合物的方法。该方法首先以C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,水和甲醇为流动相,分离度和保留时间为考察指标,采集4个不同梯度的色谱信息,通过XTool色谱专家系统软件模拟,确定五味子木脂素第一、二维色谱条件;然后采用线性放大的方法,以C₁₈（250 mm×30 mm,10 μm）为第一、二维分离柱,C₁₈（80 mm×30 mm,10 μm）为富集柱,水为富集稀释液,对五味子木脂素进行二维色谱分离纯化;最后第一维分离得到9个可重复组分,第二维分离得到20个高纯度化合物,其中有6个单体化合物。结果表明该法重现性良好,可以实现五味子木脂素的系统性分离,对五味子化学成分的研究具有重要意义。     

凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取结合高效液相色谱法同时测定地表水中多环芳烃和酞酸酯

多环芳烃和酞酸酯是国际公认的优控污染物,因此准确快速地测定水中多环芳烃和酞酸酯非常重要。凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取(DLLME-SFO)是一种简便、快速、环境友好、灵敏度高的样品前处理技术。采用DLLME-SFO同时测定地表水中多环芳烃和酞酸酯的分析方法鲜有报道。该文采用凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取富集技术,结合高效液相色谱紫外/荧光法,建立了同时测定地表水中16种多环芳烃和6种酞酸酯的分析方法。考察优化了影响萃取效率的主要因素,包括萃取剂的种类和用量、分散剂的种类和用量、萃取时间和离子强度等。优化后的萃取实验条件为:5.0 mL水样,10μL十二醇为萃取溶剂,500μL甲醇为分散溶剂,涡旋振荡时间2 min,氯化钠用量0.2 g。目标化合物经多环芳烃专用色谱柱(SUPELCOSIL^TM LC-PAH, 150 mm×4.6 mm, 5μm)结合乙腈-水梯度洗脱分离,16种多环芳烃除苊烯外采用荧光检测,苊烯和6种酞酸酯采用紫外检测,外标法定量。结果表明,22种目标化合物的基质加标回收率为60.2%～113.5%,相对标准偏差为1.9%～14.3%;多环芳...     

凝固-漂浮分散液液微萃取-高效液相色谱法测定水样中氯酚

采用凝固-漂浮分散液液微萃取(SFO-DLLME)-高效液相色谱法测定水样中3种氯酚.以密度小于水,且凝固点为24 ℃的1-十二醇为萃取剂,甲醇为分散剂,对水样进行分散液液微萃取.将混合液离心,再通过冷冻凝固操作使漂浮的萃取剂和水相分离,萃取剂复溶后进样测定.本实验确定的最佳实验条件为:萃取剂200 μL、分散剂300 μL、1.2 g NaCl、1 mol/L H3PO4 200 μL、样品体积8.0 mL、萃取时间3 min.3种氯酚测定的线性范围为0.05～6.0 mg/L;检出限为20～38 μg/L.应用本方法分析实际水样,加标回收率在90.11%～107.7%之间;日间相对标准偏差在3.5%～4.6%之间.本方法扩展了分散液液微萃取萃取剂的选择范围,具有简便、快速、准确、环境友好等特点.     

凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定海水中苯并三唑类紫外线过滤剂

建立了海水中7种苯并三唑类紫外线过滤剂的凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取-高效液相色谱-串联质谱分析方法。优化后的萃取实验条件：20 μL十二醇为萃取溶剂,400 μL甲醇为分散溶剂,NaCl质量分数为8%,pH小于6,涡旋振荡时间2 min。目标化合物经Hypersil GOLD色谱柱（150 mm×2.1 mm,5 μm）结合甲醇-水梯度洗脱分离后,用正离子多反应监测模式进行质谱分析。在较宽的线性范围内,7种化合物的线性相关系数（r²）均大于0.99;基质加标回收率为68.3%~127.5%,相对标准偏差为0.9%~15.2%,方法的检出限为0.001~0.090 μg/L,定量限为0.003~0.300 μg/L。将建立的方法用于大连8个海滨浴场海水中苯并三唑类紫外线过滤剂的测定,部分浴场海水有不同程度的检出。该方法简便、快速、环境友好、灵敏度高,可用于海水中苯并三唑类紫外线过滤剂的分析检测。     

凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取结合高效液相色谱法同时测定自来水中氯代多环芳烃与多环芳烃

建立了自来水中6种氯代多环芳烃和15种多环芳烃的凝固漂浮有机液滴-分散液液微萃取高效液相色谱分析方法,并探讨了萃取剂种类和用量、分散剂种类和用量、氯化钠含量及涡旋振荡时间等因素对萃取效率的影响。优化后的萃取实验条件为:10μL十二醇为萃取溶剂,500μL甲醇为分散溶剂,6%NaCl,涡旋振荡时间2 min。目标化合物经多环芳烃专用柱(SUPELCOSILTMLC-PAH,150 mm×4.6 mm,5μm)分离后,外标法定量。结果表明,21种目标化合物在一定质量浓度范围内线性良好,相关系数均不低于0.999;在低、中、高3个加标水平下的回收率为70.6%～98.7%,相对标准偏差(RSD)为2.0%～10%;方法的检出限(LOD,S/N=3)为0.000 7～0.009μg/L,定量下限(LOQ,S/N=10)为0.002 2～0.028μg/L。可用于自来水中氯代多环芳烃和多环芳烃的分析检测。     

北五味子果实、茎和叶中微量元素的测定

采用硝酸和过氧化氢混合酸体系作消化液,利用电感耦合等离子质谱(ICP-MS),对延边地区不同产地五味子中微量元素的含量,进行了测定和研究。测定了不同产地五味子叶、茎、果实中Mg、Ca、Fe、Zn、Cu、Mn、Cr?Ni?Pb?Cd等19种元素的含量水平。测定结果显示五味子中K、Ca、Mg、Fe含量丰富,而Pb、Cd的含量很低。不同地区的五味子茎、叶、果实中微量元素含量存在很大差异。     

Anti-diabetic Effects of Polysaccharides from Ethanol-insoluble Residue of Schisandra chinensis(Turcz.) Baill on Alloxan-induced Diabetic Mice

The ethanol-insoluble residue of Schisandra generated during lignans industrial production is usually treated as solid waste. However, there is active polysaccharide which could be used in it. In this work, the water-soluble polysaccharides from the ethanol-insoluble residue of Schisandra(ESCP) were obtained and their anti-diabetic effect was evaluated. The results indicate that ESCP could significantly reduce the blood glucose level in alloxan-induced diabetic mice. Moreover, the ESCP could significantly improve the lipid metabolism and increase the content of liver glycogen in alloxan-induced diabetic mice. The results indicate that ESCP could be developed into a potential natural hypoglycemic agent.     

北五味子中一种新的莽草酸衍生物的分离纯化及其含量测定

从北五味子中提取分离得到一种新的莽草酸衍生物, 经一维、二维核磁共振波谱(1D NMR, HMQC, HMBC)等数据解析, 鉴定为莽草酸正丁酯. 并采用ZORBAX Extend C18柱, 以乙腈-0.05%磷酸为流动相进行梯度洗脱, 检测波长为215 nm, 流速1.0 mL/min, 建立了北五味子中莽草酸正丁酯含量的高效液相色谱分析方法. 结果表明, 莽草酸正丁酯在2~65 μg/mL浓度范围内线性关系良好, 相关系数r=0.9999, 平均回收率为98.25%, 相对标准偏差(RSD)为1.55%, 表明本法简单准确, 重复性好.     

自动真空液相色谱装置的研制及其在五味子成分分离中的应用

为满足天然产物高效分离的需求,本文研制了自动真空液相色谱(AUTO-VLC)装置并用于五味子石油醚萃取物的分离。该装置由自主设计的流动相储备系统、10通分流切换阀、3通切换阀、3个不同规格的动态轴向压缩色谱柱、10通馏分收集阀和馏分收集器组成,采用可编程逻辑控制器(PLC)S7-200实现了分离过程的不同比例流动相切换、不同规格色谱柱选择、分离时间设定及馏分收集的自动控制及监测。应用于五味子成分分离的结果表明:采用150 mm直径动态轴向压缩色谱柱的VLC,从100 g五味子石油醚萃取物中一次分离得到6个组成明显不同的样品(S1~S6)。建立了通过多次薄层色谱(TLC)展开筛选VLC分离条件的方法,并进行了分离验证。VLC分离条件选择方法:自动真空液相色谱的初始洗脱剂的比例以首次TLC展开时全部目标化合物的比移值(R_f)介于0~0.45时展开剂的组成为宜;梯度洗脱比例变化以k值(展开次数(n)与R_f的线性函数斜率)和TLC分离度为依据选择;不同R_f范围内洗脱次数由n≈ ΔR_f/k计算。采用选择的条件从样品S5中分离得到了13个组分和4个纯度在85%以上的化合物,仅耗时17 h。AUTO-VLC的研制对于中药成分的自动和系统性分离具有重要价值。     

Microwave-assisted extraction and fingerprint studies of Schisandra chinensis (Turcz.) by high performance liquid chromatography and gas chromatography

In order to choose an appropriate extraction method, samples of Schisandra chinensis (Turcz.) Baill were extracted by different methods and it was found that microwave-assisted extraction gave the best results. The contents of schisandrin, schisantherin, deoxyschizandrin, and r-schizandrin of 10 samples collected from different regions in China were determined by HPLC. The chromatograms of ten samples were used to establish the fingerprints of Schisandra chinensis (Turcz.) Baill and two methods based on HPLC and GC were applied to them simultaneously. The fingerprints consisted of 18 common peaks obtained by HPLC and 17 common peaks obtained by GC, which showed good stability and repeatability with RSD less than 3% for retention time. The fingerprints are suitable for identifying and differentiating samples by geographical origin and can be used for quality control.     

Development of Dispersive Liquid‐Liquid Microextraction Based on Solidification of Floating Organic Drop for the Determination of Trace Cobalt in Water Samples

A liquid‐phase microextraction technique was developed using dispersive liquid‐liquid microextraction based on solidification of floating organic drop combined with flame atomic absorption spectrometry, for the extraction and determination of trace amounts of cobalt in water samples. Microextraction efficiency factors, such as the type and volume of extraction and dispersive solvents, pH, extraction time, the chelating agent amount, and ionic strength were investigated and optimized. Under optimum conditions, an enrichment factor of 160 was obtained from 10.0 mL of water sample. The calibration graph was linearin the range of 1.15‐110 μg L^?1 with a detection limit of 0.35 μg L^?1. The relative standard deviation for ten replicate measurements of 10 and 100 μg L^?1 of cobalt were 3.26% and 2.57%, respectively. The proposed method was assessed through the analysis of certified reference water or recovery experiments.     

Variation of the Lignan Content of Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. and Schisandra sphenanthera Rehd. et Wils.

A rapid and convenient extraction technique followed by HPLC analysis has been developed for determination of lignans in Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. and Schisandra sphenanthera Rehd. et Wils. Under the optimized conditions the lignans schisandrin, schisantherin, deoxyschisandrin, and γ-schisandrin were extracted from ten samples collected from different regions in China and then quantified by HPLC. The lignan content of the ten samples is different. S. sphenanthera Rehd. et Wils. is richer in deoxyschisandrin but there is less schisandrin and γ-schisandrin is not found. S. chinensis (Turcz.) Baill. is usually richer in γ-schisandrin, the maximum amount being 4.263 mg g⁻¹, although one sample contained none. This method is simple, rapid, sensitive, and repeatable, and is suitable for identification and differentiation of samples from different regions of China.     

离子液体分散液相微萃取对苯丙烯酸类化合物的浓缩及作用机制

研究了离子液体分散液相微萃取(ILDLPME)机理, 建立了简单、快速、灵敏的ILDLPME-HPLC(高效液相色谱)同时测定中药白附子中5种低丰度苯丙烯酸类化合物含量的方法, 对不同产地白附子的质量进行了比较和评价. 在最佳的ILDLPME-HPLC条件下, 测得咖啡酸的线性范围为1.28×10^-3~2.60 μg/mL, 对羟基桂皮酸及阿魏酸的线性范围为1.28×10^-4~2.60 μg/mL, 桂皮酸及对甲氧基桂皮酸的线性范围为1.28×10^-3~4.00 μg/mL, 检出限分别为0.13, 0.01, 0.01, 0.13和0.13 ng/mL, 日内精密度RSD<7.9%, 日间精密度RSD<9.7%, 药材中分析物的回收率在86.9%~112.6%之间, ILDLPME 对5种分析物的富集倍数分别在56.0~159.3倍之间. 结合5种苯丙烯酸类化合物ILDLPME萃取前后紫外光谱的变化, 提出了ILDLPME萃取苯丙烯酸羧基-离子液体电荷转移超分子(CTSMCIL)机理. 本研究为建立中药白附子的质量控制方法提供了理论依据和实验基础.     

分散液液微萃取-上浮溶剂固化/高效液相色谱法测定沉积物中的十溴联苯醚

建立了沉积物中痕量十溴联苯醚的分散液液微萃取-上浮溶剂固化-高效液相色谱-紫外法(DLLME-SFO-HPLC-UV)。以正交试验数据为训练样本,采用BP(Back propagation)神经网络模型优化了分散液液微萃取-上浮溶剂固化条件:分散剂为1.00mL甲醇、萃取剂为35.0μL十二醇、NaCl质量浓度为10.00%、萃取时间10min和pH=5,其萃取率(ER)可达62.22%。方法的线性范围为3.5～1400ng/g(r=0.9960),检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为2.3pg/g(S/N=2)和5.6pg/g(S/N=5),实际样品的加标回收率为97.7%～104.2%。本方法集萃取、富集、分离步骤于一体,简化了沉积物中十溴联苯醚的前处理过程。