TMB目视比色法检测水中余氯的改进

为解决GB/T 5750.11-2006生活饮用水标准检验方法中的3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)目视比色法检测余氯时出现的评价方法准确性欠佳、TMB显色剂发黄、显色体系偏绿等问题,对TMB目视比色法的评价方法、TMB显色剂的配制条件和水样的检测条件进行了研究。结果表明,次氯酸钠不宜作为余氯标准物质来评价TMB目视比色法的改进效果,而通过检测显色体系的A450和目视比色值相结合的方法来判断方法改进效果更为准确。采用优级纯浓盐酸和无氯纯水室温搅拌溶解,可使显色剂无色透明,从而解决TMB显色剂发黄的问题,符合国标要求。将显色剂配制用酸(盐酸)的浓度由国标中0.1mol/L变更为0.6 mol/L,可解决余氯显色体系偏绿的问题。显色体系pH变化后,显色时间、显色温度、显色剂用量可仍按照国标方法的要求进行操作。通过以上改进措施,进一步提高了余氯检测结果的准确度。     

纸芯片显色法用于L-半胱氨酸的快速测定

该文以5,5'-二硫硝基苯甲酸(DTNB)为含巯基化合物的衍生化试剂,建立了其纸芯片快速检测新方法。显色剂DTNB和样品在显色区相遇并显色,用手机拍照记录,采用Photoshop软件分析显色强度,进行比色检测,并以L-半胱氨酸(L-Cys)为例,优化得到纸芯片检测L-Cys的最佳显色条件。结果显示,L-Cys浓度在0.01～0.1 mmol/L范围内与显色强度呈良好的线性关系(r=0.999 8),检出限达0.001 mmol/L。多种氨基酸和干扰离子对L-Cys在纸芯片上的测定干扰不超过±5%。采用该方法测得牛血清样品中L-Cys含量为0.013 mmol/L,加标回收率为99.1%～103%,该方法检测L-Cys具有操作简单、耗样量少、检测快速、重现性好等优点。     

纸芯片显色法同时检测乳酸脱氢酶和碱性磷酸酶

本文建立了一种基于纸芯片的乳酸脱氢酶(LDH)检测方法。实验优化了黄递酶(DIA)/碘硝基四唑紫(INT)显色体系检测LDH的条件,考察了方法的选择性,获得了较好的线性关系,并成功用于血清样品中LDH含量的测定。同时,结合DIA/INT和BCIP/NBT显色体系,通过构建一维、三维纸芯片,实现了LDH和碱性磷酸酶(ALP)的同时检测。两者同时检测时,颜色区分明显,相互之间干扰较小。纸芯片显色法操作简单、结果直观可见、效果良好。     

阵列纸芯片比色法检测碱性磷酸酶

采用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)显色体系,构建了阵列纸芯片比色检测碱性磷酸酶(ALP)的方法.首先,借助烘干处理方式在光刻法制备的阵列纸芯片微孔中固定显色试剂,然后加入ALP进行显色反应,最后,采用凝胶成像仪和普通照相机成像,读取显色强度(灰度值)进行比色检测.详细考察了显色条件对检测结果的影响,探讨了人血清白蛋白对ALP检测的增色效应,在最佳实验条件下,ALP检测的线性范围为1.5～20 U/L,检出限(3 σ)为0.78 U/L(n=18),比文献报道中纸芯片上检测ALP方法的检出限低约两个数量级.本方法成功用于实际血清样品检测,测定结果与临床值一致.在此基础上,构建了双色阵列纸芯片,通过颜色的变化实现了ALP的可视化半定量检测.     

基于氧化还原体系纸芯片法对血清尿酸含量的快速检测

建立了以纸芯片为分析平台的尿酸含量快速检测方法.基于尿酸的还原性,以FeCl3为氧化剂组成氧化还原体系,以邻二氮菲为显色剂对反应产物Fe2+进行显色,根据显色强度对尿酸含量进行测定.结果 表明,当FeCl3与尿酸比例为1.6∶1,反应10 min,显色剂pH 7.4时显色最佳.显色强度(RGB值)与尿酸浓度在1.19～5.95 mmol/L范围内呈良好线性关系,相关系数为0.9998.方法 的检测限为0.342 mol/L,日内和日间相对标准偏差分别为0.42％和0.47％.15种共存物质在允许误差范围内均无干扰.测得牛血清中尿酸含量为0.238 mmol/L,平均回收率为96.4％.该方法可用于血清中尿酸含量检测.     

黄色卵黄背后的化学

论述了禽蛋卵黄显色物类胡萝卜素的主要组成物质--叶黄素及玉米黄素的结构、命名和基于分子轨道理论的光谱学显色原理,并从氧化还原反应角度出发探讨了植物色素叶黄素及玉米黄素基于物种繁衍保护的抗氧化联合防御机制。     

纸基微孔阵列芯片比色法检测乳酸脱氢酶

利用纸基微芯片便捷、直观的优势,采用吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)显色体系,借助凝胶成像仪和普通照相机两种成像方式,建立了纸基微孔阵列芯片比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的方法。在最佳实验条件下,显色强度与LDH浓度呈线性相关。采用凝胶成像仪检测时,线性范围为10~150 U/L,检出限(3σ)为9.44 U/L(n=18)。采用照相法获得的线性范围为15~150 U/L,检出限(3σ)为12.36 U/L(n=18)。实验表明,人血清白蛋白(HSA)对显色结果具有增强作用,探讨了HSA的增色作用,并以HSA为增强试剂得到工作曲线。基于纸基微孔阵列芯片的LDH活性测定方法具有操作简单、结果直观可见、灵敏度高等优点,对于脱氢酶类的便捷检测有一定参考价值,可望在生物医疗检测领域获得应用。     

基于显色法的纸基微流控芯片用于水中的三氮检测

硝酸盐、亚硝酸盐和氨氮(简称"三氮")是水体中的主要污染物,目前我国的地表水和浅层地下水中普遍存在三氮污染问题。本研究将显色法与纸基微流控技术结合,制备了单通道纸基微流控芯片,在优化的反应条件下,分别对3种含氮化合物进行检测,亚硝酸盐、硝酸盐和氨氮的检出限分别为0.001 mmol/L、 1 mmol/L和1 mg/L;在实际样本的检测中,3种样本的加标回收率均在95.4%～114.9%之内。其次,通过合理的结构设计将分别用于3种含氮化合物检测的单通道纸基微流控芯片集成于一体,制备出用于三氮同时检测的多通道纸基微流控芯片,多通道纸基微流控芯片的检测结果与单通道纸基微流控芯片的检测结果具有良好的一致性。本研究提出的基于显色法的多通道纸基微流控芯片可对水中的三氮进行同时检测,并且,此芯片具有成本低廉、灵敏度高和便于操作等特点,适用于现场快速检测,有望在资源匮乏的水源污染地区推广。     

光电化学技术应用于抗氧化分析的研究进展

在新陈代谢过程中,机体会产生大量以自由基为主要形式的氧化活性物质,而抗氧化剂可以通过电子转移的方式捕获并中和自由基,从而有效抵御自由基引起的细胞损害,以保障和维护人体健康.食品作为人体外源性抗氧化剂的重要来源可以有效补充因体内代谢及体液排出而损失的抗氧化物质,因此对食品中抗氧化物质消除自由基的能力即抗氧化能力的测定和评价具有重要意义.光电化学技术作为一种简单快捷、低成本、低背景且高灵敏度的测定方法,能够有效克服光学法、色谱法和电化学法等传统测试手段在抗氧化容量分析中的不足.本文综述了基于半导体及其复合材料的光电化学传感平台的构建及食品体系抗氧化容量分析的研究进展,评论了多种检测体系的特点并对其研究前景进行了展望.     

基于微流控纸芯片-显色法快速测定全血中尿酸的含量

提出了基于微流控纸芯片-显色法快速测定全血中尿酸含量的方法。使用喷蜡打印机将设计的微通道网格打印在色谱纸上,经过加热处理得到微流控纸芯片。在微流控纸芯片I区(样品预处理区)滴加3.2μL 0.10 g·mL^-1乙二胺四乙酸(EDTA)溶液和4.8μL 0.015 g·mL^-1壳聚糖溶液,干燥,得到微流控纸芯片检测平台。全血样品与磷酸盐缓冲液(pH 7.4)按体积比1∶4混合,分取混合溶液13μL滴加至I区,红细胞与血浆在壳聚糖和EDTA的凝集作用下发生分离,血浆流动至II区(显色区);待血浆完全铺满II区后,滴加3μL三氯化铁和邻二氮菲的混合溶液,静置反应2 min,用手机拍照,采用Photoshop CS2软件分析显色区的颜色强度,得到RGB值(红、绿、蓝三色叠加值),根据标准曲线计算尿酸含量。结果表明：全血中葡萄糖等常见还原性物质均不影响尿酸含量的测定;尿酸浓度在0.05～0.85 mmol·L^-1内与RGB值呈线性关系,检出限(3.3s/k)为0.03 mmol·L^-1。方法用于实际全血样品分...     

辛硫磷试纸的制备及其在金银花检测中的应用

利用比色法原理制备了辛硫磷检测试纸,对显色体系进行了筛选,对试纸制备的条件进行了研究,制备了标准比色卡,通过与国标法对比,对试纸进行了评价。以加厚滤纸为辛硫磷检测试纸的纸材,在体积分数0.5%的2,6-二溴苯醌氯酰亚胺溶液中浸泡5 min,干燥条件为30℃下鼓风干燥20 min。检测时在溴蒸气上的熏蒸时间为25 s,辛硫磷检测试纸检出限为5 mg/L,检测结果与国标法相吻合。     

可检测多酚以及儿茶素等抗氧化物质的传感器芯片

东洋大学开发出了可检测多酚以及儿茶素等抗氧化物质的传感器芯片，该芯片主要用于测定食品的抗氧化物质含量。检测抗氧化物质时，除了传感器芯片之外还需要有测定装置。相应的测定方法与以前方法不同。该装置传感器芯片与测定装置组合在一起，便于携带，可以像pH计一样轻松地进行测定。     

基于氧化还原反应界面可视化定量检测辣根过氧化物酶

该文建立了一种可视化的、基于氧化还原反应界面移动距离定量检测辣根过氧化物酶（HRP）的方法。比较了隐色结晶紫显色体系和3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色体系对HRP的显色效率,并构建了基于3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色体系的氧化还原反应电泳滴定模型。同时,文中还设计了适用于该模型的小型化、便携式滴定检测芯片,并对滴定通道凝胶中组分进行了优化。结果表明,界面移动距离与HRP浓度存在对数线性关系,检测灵敏度可达0.002 mg/L,且可在10 min内完成HRP的裸眼检测。该方法不需要配备信号读取装置,用户只需要读取有色界面移动的距离即可实现对待测物的可视化定量检测,对于即时检测具有潜在的应用价值。     

微流控纸芯片法研究去甲肾上腺素与牛血清白蛋白相互作用

建立了一种基于微流控纸芯片测定牛血清白蛋白（BSA）与去甲肾上腺素结合常数的快速检测方法。以纸芯片为分析平台,在样品加载区键合BSA;重酒石酸去甲肾上腺素（NE-B）与Fe³⁺发生氧化还原反应,产物Fe²⁺与显色剂邻二氮菲在纸芯片上进行显色,通过手机拍照,Photoshop软件分析显色强度。以去甲肾上腺素浓度倒数为横坐标,显色强度RGB值的倒数为纵坐标进行线性拟合,计算出药物与蛋白的结合常数K_b。结果表明：该方法日内重复性相对标准偏差（RSD）为0.55%,日间重复性RSD为0.76%;在1.5～5.5 mmol/L范围内,去甲肾上腺素与BSA的K_b为1598.33 L/mol。该方法可用于还原性药物与BSA的作用常数测定,具有样品用量少、成本低廉、检测速度快的特点。     

纸芯片上转换荧光法检测凝血酶北大核心CSCD

纸芯片因其制作简单、成本低廉、生物兼容性好、检测背景低等众多优点,被越来越多的学者所重视,目前,纸芯片上的检测对象大多为葡萄糖、尿酸、乳酸等小分子~[1]。因此,将纸芯片应用于生物大分子检测将拓宽其应用范围,特别是对疾病相关分子的检测,将使其更好地应用于个人诊断（POC）。目前,纸芯片的检测方法中,显色法灵敏度不高、荧光法有很强的背景干扰。上转换荧光法本质上是一种反斯托克斯发光,在近红外光的激发下.     

多离子可视化检测的纸基微流控芯片的构建及应用

本文基于纸基微流控技术,构建了一种基于Pb²⁺、Cr⁶⁺、Fe³⁺以及NO₂^-多离子可视化检测的纸基微流控芯片,其具有可携带以及即时检测等优点,在水体离子污染检测方面具有潜在的应用价值。该纸芯片利用流体的亲疏水性质构建了具有样品收集区、检测区的微平台,通过四种离子的不同显色反应可以实现对多离子的可视化检测,并且通过软件进行RGB色度分析,在0到20 ppm浓度范围内构建了色彩强度值RGB与NO₂^-浓度变化的定量检测分析标准曲线,根据该曲线计算出检出限为0.405 ppm,同时该纸芯片也可以完成对其他三种离子即时定性的检测。     

纸芯片上转换荧光法检测凝血酶

正纸芯片因其制作简单、成本低廉、生物兼容性好、检测背景低等众多优点,被越来越多的学者所重视,目前,纸芯片上的检测对象大多为葡萄糖、尿酸、乳酸等小分子~[1]。因此,将纸芯片应用于生物大分子检测将拓宽其应用范围,特别是对疾病相关分子的检测,将使其更好地应用于个人诊断(POC)。目前,纸芯片的检测方法中,显色法灵敏度不高、荧光法有很强的背景干扰。上转换荧光法本质上是一种反斯托克斯发光,在近红外光的激发下,可以很好地     

抗氧化能力评价方法

生物体系中的氧化与抗氧化系统失衡会导致氧化应激,被认为同诸多疾病的发病机理密切相关,具有抗氧化能力的物质能有效抵御氧化应激的有害损伤。本文介绍了氧化应激的有关概念,包括活性氧物种、抗氧化剂、氧化损伤等,并重点针对生物体内和体外的各种活性氧、活性氮物种清除能力检测方法以及本研究小组最新发展的利用金纳米壳复合材料和其他小组基于纳米材料的评价方法进行了综述与比较,包括化学原理、优缺点及实际应用等。简要分析了目前检测方法存在的问题并对未来标准化检测方法进行了展望。     

高效液相色谱-质谱联用快速筛选并鉴定黄芩甲醇提取物中抗氧化活性成分

建立了高效液相色谱-质谱联用技术快速筛选和鉴定黄芩甲醇提取物中抗氧化活性成分的方法.在黄芩甲醇提物中加入适量的二苯基三硝基苯肼( DPPH)作为实验组,避光室温反应30 min后直接经液相色谱分析,并与不加入DPPH的空白组进行比较.有抗氧化活性的成分因会与DPPH反应而使峰面积减少,而不具有抗氧化活性的成分峰面积则不变.基于色谱数据可以获得有抗氧化活性组分的相对活性强度,基于质谱数据可获得活性组分的结构信息用于结构鉴定.本方法成功地从黄芩甲醇提取物中筛选并鉴定出了黄芩苷、千层纸素A-7-O-B-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和千层纸素A4种较强的抗氧化活性成分.本方法利用HPLC-MS技术对复杂体系(如中药提取物)中小分子的分离和鉴定优势,可以直接筛选出黄芩甲醇提取物中的抗氧化活性成分,而不需要繁琐的前期分离和纯化,并且不需要仪器改装工作,有利于实现复杂体系中抗氧化活性成分的高通量筛选.     

基于DNA的比色分析法快速测定尿液中的Hg2+

以琼脂糖珠作为固定DNA的载体,建立了可视化的快速检测尿液中Hg2+的方法。DNA对Hg2+特异性识别后,其构象发生变化,启动相邻序列DNA酶的类过氧化物酶催化活性,进而催化氧化双氧水介导的ABTS(2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸))体系,溶液显绿色。考察了各种物质用量对检测体系的影响。在最优实验条件下,体系在420 nm处的吸光度与Hg2+浓度呈良好线性关系,线性范围为5~200 nmol/L,检出限为2 nmol/L。应用于真实尿样中Hg2+检测,加标回收率为95.1%~99.8%,相对标准偏差(n=5)为1.5%~3.1%。本方法对Hg2+具有良好的选择性,且检测不受其它金属离子干扰。另外,以琼脂糖珠为固相载体,能实现高效快速分离,有效排除尿液中其它物质对显色的影响,提高了检测的准确度和灵敏度。