激光诱导荧光检测微流控芯片生化分析仪的研制

研制出一种集激光诱导荧光检测、微流控芯片电泳及控制系统于一体的生化分析仪。分析仪内采用可重复使用的玻璃基质微流控芯片,利用销式固定技术实现芯片的精确定位,定位精度达到±2μm。以四触点高电压系统控制芯片上的进样和电泳分离操作。激光诱导荧光检测系统采用正交光路模式,对Cy5染料的检出限达到1.0×10-10mol/L(S/N=3)。以羟乙基纤维素为筛分介质,初步进行了ΦΧ174-HaeШdigest DNAmarker限制性片段的毛细管电泳分离。     

激光诱导荧光检测微流控芯片毛细管电泳分离多肽的研究

微流控分析系统是分析科学及分析仪器重要的发展前沿,是90年代初发展起来的微分析系统的主要组成部分及目前较为活跃的领域.将微流控分析系统应用于电泳分离,与传统的电泳分离手段相比较而言,具有微型化、可集成化、速度快、进样量小等特点.它的检测方法有多种,其中激光诱导荧光(Laser induced fluorescence,LIF)法因其灵敏度高,成为微流控芯片分析检测目前最广为采用的方法[1].     

通用型激光诱导荧光微流控芯片分析仪的研制与性能考察

设计和研制了一种通用型激光诱导荧光微流控芯片分析仪.检测部分按共聚焦检测原理设计,采用CCD(电荷耦合器件)监测通道,三维自动调节聚焦,发射波长滤光片可方便地更换以适应多种染料选择,能分别显示进样和分离通道2条电流-时间曲线.考察了该分析仪的检测灵敏度、检测极限和线性范围,显示了分析灵敏度高,检测限低和线性范围宽等特点,在自制注塑型PMMA塑料芯片上实现了φX174Haedi-gesT_dNA片段的分离测定和烟叶act基因PCR产物的分析     

激光诱导荧光检测微流控芯片毛细管电泳分离多肽的研究

微流控芯片分析系统是当前分析科学及分析仪器重要的发展前沿,是20世纪90年代初发展起来的微分析系统的主要组成部分.将微流控分析系统应用于电泳分离,与传统的电泳分离手段相比较,具有微型化、集成化、速度快等特点.     

一种简单的微流控芯片正交型激光诱导荧光检测系统

对微流控芯片检测技术的研究一直是近年来微全分析系统领域的研究热点.激光诱导荧光(Laser induced fluorescence,LIF)检测技术因其具有较高的灵敏度,成为目前微流控分析芯片采用最广的检测方法^[1].     

用于微流控芯片的共焦式激光诱导荧光检测器研制及在DNA片段分离检测中的应用

无胶筛分技术用于微流控芯片分离DNA将大大提高分析的速度,并且可以进一步集成化.目前这一技术虽然已有商品仪器--Agilent Bioanalyzer 2100,但是由于仪器本身各项参数均为定值不可更改,因此限制了该仪器的推广应用.     

微流控芯片电泳激光诱导荧光检测p53外显子上的突变点

利用单链构象多态性(SSCP),建立微流控芯片电泳(ME)联合激光诱导荧光检测(LIF)技术,检测人类p53基因点突变的方法。设计不同碱基长度的p53单链序列,针对易突变的外显子7,8,9进行SSCP分析,分离野生与突变的单链DNA序列;研究了筛分介质聚乙烯基氧化物(PEO)的浓度,场强对芯片电泳行为的影响。在PEO质量分数为0.5%,分离场强为260V/cm时,100 s之内就可以实现样品p53外显子7,8,9的野生型与突变型碱基的分离检测。     

微流控芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测法测定片剂中盐酸美西律的含量

建立了微流控芯片毛细管电泳激光诱导荧光检测法测定片剂中盐酸美西律含量的方法,对衍生条件和电泳条件进行了系统的考察。盐酸美西律经异硫氰酸荧光素(FITC)40℃衍生6h,以20 mmol/L硼砂为电泳缓冲溶液,进样30s后,分离电压2000V,可在1 min内完成一次检测。方法的检出限为0.022 mg/L、线性范围0.108～1.079 mg/L、相关系数0.994,加标回收率为99.7%～102.3%,方法适用于盐酸美西律的检测和质量控制。     

一种微流控芯片激光诱导荧光检测器的研制及应用

研制了一台正交结构的微流控芯片激光诱导荧光检测器.将较宽的芯片架固定在1个三维操作平台上,可用于检测点的调节和激光光斑校准微调.不同发射波长的半导体激光器以及不同波长的窄带滤光片均可方便更换,以满足不同品种的分析要求.该检测器结构简单、体积小和操作灵活方便,对微流控芯片的尺寸及通道结构适应性强.能在一定程度上满足多种芯片的应用研究需要.     

微流控芯片毛细管电泳柱后衍生激光诱导荧光检测氨基酸

建立了微流控芯片毛细管柱后扩散衍生激光诱导荧光检测氨基酸的方法。利用微流控芯片的二维平面结构特征,在分离通道末端增加支通道,通过扩散法引入柱后衍生试剂,避免了电压引入法对分离通道流型的影响,因而提高了分离效率。考察了支通道长度、衍生试剂液面高度、检测点位置对衍生结果的最优条件,考察了衍生试剂引入方法、催化剂种类、缓冲溶液种类对检测结果的影响。用20 mmol/L硼砂-NaOH(pH=10)溶液作为电泳缓冲溶液,与柱后衍生试剂1.0 mmol/L NDA+8.0 mmol/L 2-ME+35 mmol/L硼砂(pH 10.0)的30%(V/V)甲醇溶液反应,精氨酸、苯丙氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、丙氨酸、甘氨酸在不加任何添加剂的情况下可达到基线分离。本法用于板蓝根药材中主要游离氨基酸的分离检测,相对标准偏差小于4.4%(n=5),回收率为92.3%~98.6%。所测板蓝根药材中精氨酸和脯氨酸含量分别为14.97,8.02 mg/g。     

微流控芯片-激光诱导荧光检测器的研制及核酸片段分离检测中应用

采用自行设计的共焦式激光诱导荧光检测器（激发波长635nm，发射波长670nm），以cy5染料对检测器的空间分辨能力和灵敏度进行了测试，检出限达到10^-9mol／L。建立了一种微流控芯片快速分离检测DNA片段的方法。以0．8％羟丙基甲基纤维素（HPMC）为筛分介质，以（噻唑橙单体）To-pro-3为荧光标记染料，在玻璃微流控芯片中实现了dsDNA片段的无胶筛分和激光诱导荧光检测，12条DNA片段在75s内得到分离。     

微流控芯片-激光诱导荧光快速检测4种食源性致病菌

建立了食品中4种常见食源性致病菌的微流控芯片快速检测方法。根据副溶血弧菌的Vpara(16S-23S rDNA IGS)基因、沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfbO157基因和志贺菌的ipaH基因序列设计了4对特异性引物,对上述致病菌进行四重PCR扩增,采用微流控芯片-激光诱导荧光检测食品中4种常见致病菌的多重PCR扩增产物。优化了多重PCR扩增和微流控芯片电泳分离的实验条件。当芯片电泳的筛分介质HPMC-50浓度为2.2%、溴乙锭(EB)含量为3.75μmol/L、电场强度为120 V/cm时,pUC Mix DNAMarker-8和待测致病菌的多重PCR扩增产物可以实现基线分离,600 s内即可完成上述4种致病菌的同时检测,迁移时间的日内相对标准偏差为0.74%~2.09%。本方法能够检出1×102cfu/mL的副溶血弧菌、沙门菌、大肠杆菌O157:H7和志贺菌。方法特异性高,所设计的引物在10种非目的菌株体系中均未见扩增的片段。将本法应用于食品中上述致病菌的测定,获得了满意的结果,为常见食源性致病菌的快速检测提供了一种新的可靠分析手段,对保障食品安全具有重要的现实意义。     

毛细管电泳和微流控芯片中的发光二极管诱导荧光检测

发光二极管诱导荧光检测由于体积小、利于微型化、成本低、耗能少、寿命长、应用波长范围较宽等优点,已备受关注.该文主要介绍荧光检测中所使用的几种光学元件,及由这些光学元件所组成的3种荧光检测的光路结构和以发光二极管作为光源诱导荧光检测在毛细管电泳和微流控芯片中的应用研究.引用文献50篇.     

微流控芯片细胞操纵及单细胞荧光检测

微流控芯片系统用于细胞分析是该技术近期发展的一个热点^[1,2],受到越来越多的关注,其主要原因在于微全分析系统具备高度微型化、集成化和设计灵活等特点,通过巧妙设计和准确加工能够实现细胞的培养、凋亡及检测等功能^[3].     

微流控芯片荧光检测系统研究进展

评述了1996～2010年以来微流控芯片荧光检测系统的研究进展,主要介绍微流控芯片中荧光检测系统,包括激光诱导荧光（LIF）、发光二极管（LED）诱导荧光和其他荧光检测装置的原理、光路结构及其应用（引用文献60篇）。     

微流控芯片系统流式细胞术及单细胞荧光检测

微流控芯片系统用于细胞分析是近年来该技术发展的一个热点,因而受到越来越多的关注．其主要原因在于微全分析系统具备高度微型化、集成化和设计灵活等特点,通过巧妙设计和精密加工能够实现细胞的培养、凋亡及检测等功能．流式细胞术(Flow cytometer,FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其它生物粒子进行定量分析和分选的检测手段,     

顺序注射-液芯波导H-通道芯片联用系统DNA片段的毛细管电泳分离激光诱导荧光检测

毛细管电泳微流控芯片分离-激光诱导荧光(LIF)检测DNA片段是近年来微流控分析系统中研究得较为成功的领域,该方向的研究成果极大地促进了微流控分析系统的发展.在相关的报道中,待分析样品和系统运行溶液仍然主要使用手工操作.     

微流控芯片电泳快速分离脂蛋白

描述了一种芯片电泳快速分离脂蛋白的方法. 利用自制的微流控芯片及激光诱导荧光技术电泳分离经硝基苯并噁二唑-C₆-酰基鞘胺醇预染的脂蛋白标本, 在40 mmol/L tricine缓冲液(pH 9.4)中加入40 mmol/L甲基葡胺, 在500 V电压下40 s进样, 在2000 V 电压下2 min内完成分离, 可出现低密度脂蛋白(LDL)与高密度脂蛋白(HDL)两条脂蛋白区带, 5次重复性试验其出峰时间变异系数(CV)为2.6%. 本法为高血脂患者提供了一种快速、简便、灵敏、重复性好的诊断方法.     

微流控芯片电泳的研究进展

该文综述了微流控芯片电泳的制备、结构和应用,比较了不同材料微流控芯片电泳的制备机理、表面改性和性能特点,归纳和总结了不同结构微流控芯片电泳的进样、分离和检测系统以及不同类型微流控芯片电泳在荧光物质、金属离子、糖、药物、核酸、DNA、氨基酸、多肽和蛋白质分析中的应用,并对微流控芯片电泳的未来发展方向做了展望.     

小型可连续进样微流控芯片分析的研制

报道了一种结构简单、可连续进样的小型控芯片分析仪的研制.顺序注射分析系统通过芯片上制作的接口将试样连续引入芯片,并采用自行设计的紧凑型光纤式激光诱导荧光检测器进行检测.该仪器用于芯片毛细管电泳分离实验室合成Cy5荧光染料,实现了连续进样和换样.峰高RSD为1.9%(n=11),试样通量35/h;相邻试样携出＜4%.